没食子酸与牛血红蛋白相互作用的研究

没食子酸与牛血红蛋白相互作用的研究

论文摘要

牛血红蛋白(bovine hemoglobin,BHb)与人血红蛋白高度同源,且易获得,常用于血红蛋白与小分子化合物结合的研究。没食子酸(gallic acid,GA)作为一种多酚类小分子化合物,可被用作小分子药物模型,研究其与BHb的相互作用,可为其在医药领域的应用提供理论依据。运用紫外-可见光谱(UV-vis spectroscopy)、荧光光谱(fluorescence spectroscopy)、傅里叶变换红外(Fourier transform infrared,FTIR)光谱、圆二色光谱(circular dichroism,CD)等手段,在pH 7.0条件下,研究GA与BHb的相互作用。紫外-可见光谱的结果表明,GA对BHb的氧合状态没有影响,不会使氧合血红蛋白脱氧。结合荧光光谱和相关公式计算结果可知,GA与BHb相互作用发生了荧光猝灭,且猝灭常数随着温度的升高而增大,说明GA与BHb相互作用的猝灭类型为动态猝灭;通过计算得到了不同温度下GA与BHb相互作用的结合常数,分别为Ka298=7.941×103L/mol,Ka308=10.478×103L/mol; GA与BHb之间主要靠疏水作用力结合,可自发发生反应;色氨酸和酪氨酸残基所处微环境受到扰动,色氨酸残基的荧光吸收峰强度比酪氨酸残基变化大,表明GA与BHb分子的结合位点更接近于色氨酸残基。FTIR光谱和CD的检测结果显示,与GA作用前后,BHb均以α-螺旋结构为主,即GA对BHb分子的二级结构影响较小。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 实验方法
  •     1.3.1 缓冲体系的配制及检测样品的制备
  •     1.3.2 紫外-可见光谱与荧光光谱的检测
  •     1.3.3 FTIR检测
  •     1.3.4 CD检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 GA对BHb血红素基团的影响
  •   2.2 GA对BHb构型的影响
  •   2.3 荧光猝灭
  •   2.4 结合常数、结合位点数和作用力类型
  •   2.5 GA对BHb发光基团的影响
  •   2.6 利用傅里叶变换红外光谱技术检测GA对BHb二级结构的影响
  •   2.7 利用圆二色光谱技术检测GA对BHb二级结构的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 施沈佳,李剑瑛,黎中宝,陈俊德,吴坤远

    关键词: 没食子酸,牛血红蛋白,相互作用,光谱测定

    来源: 生物技术进展 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 有机化工

    单位: 集美大学水产学院,国家海洋局第三海洋研究所国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术中心,福建农林大学食品科学学院

    基金: 国家自然科学基金项目(41676129,41106149)资助

    分类号: TQ460.1

    DOI: 10.19586/j.2095-2341.2018.0103

    页码: 54-61

    总页数: 8

    文件大小: 1741K

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