实验设计在原核表达条件优化中的应用

实验设计在原核表达条件优化中的应用

论文摘要

目的应用实验设计(Design of Experiment,DOE)优化原核表达条件。方法分别通过单因素变量和DOE方案优化pET32a-Ferritin在E. coil BL21(DE3)中的诱导表达条件(诱导时间、诱导剂浓度和起始菌体密度),并对两种方案得出的诱导条件的表达效率进行比较。结果单因素变量实验方案的最优条件为:菌体A600为0. 6时添加0. 5 mmol/L IPTG诱导4 h;DOE方案最优条件为:菌体A600为0. 8时添加1. 0 mmol/L IPTG诱导10 h。DOE方案更加便捷和准确,且表达效率更高。结论在处理多因素交互作用问题中,DOE方案能更加便捷地获得准确的外源蛋白表达的最优条件。本研究为原核表达系统的优化提供了新的方案,也为DOE方案在生物工程领域的更多应用提供了参考。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 质粒及菌株
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 Ferritin表达条件的单因素优化
  •     1.3.1 诱导剂浓度
  •     1.3.2 诱导时间
  •     1.3.3 起始菌体密度
  •   1.4 Ferritin表达条件的DOE优化
  •   1.5 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 单因素实验优化
  •     2.1.1 诱导剂浓度对Ferritin表达的影响
  •     2.1.2 诱导时间对Ferritin表达的影响
  •     2.1.3 起始菌体密度对Ferritin表达的影响
  •   2.2 DOE方案优化
  •   2.3 DOE与单因素变量法优化结果的比较
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王宏,佟芳,章青,庞立丽,李志鹏,刘庆友

    关键词: 实验设计,原核表达,优化,响应曲线

    来源: 中国生物制品学杂志 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京生物制品研究所有限责任公司,广西大学动物科学技术学院

    基金: “十三五”国家科技重大专项:病毒性传染病病原谱和病毒基因变异变迁规律研究(2018ZX10713002)

    分类号: Q78

    DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002908

    页码: 1322-1328+1342

    总页数: 8

    文件大小: 444K

    下载量: 237

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