导读:本文包含了淋巴结窦内皮细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:内皮,细胞,淋巴结,淋巴管,血管,卵巢癌,培养基。
淋巴结窦内皮细胞论文文献综述
张斯雅[1](2018)在《淋巴管内皮细胞通过NIK调节B细胞淋巴结归巢及SAPHO综合征外周血γδT细胞相关研究》一文中研究指出目的:淋巴细胞在中枢淋巴器官发育成熟后,经血流定居在外周淋巴器官,并在全身器官、组织以及炎症部位发挥多种生物学功能。淋巴细胞归巢是淋巴细胞迁移的一种特殊形式,不同群或亚群的淋巴细胞在移行过程中具有相对选择性,即某一特定的淋巴细胞群或亚群定向归巢到相应的组织或器官。淋巴细胞归巢过程的分子基础是淋巴细胞与各组织、器官血管内皮细胞粘附分子的相互作用。其中,B细胞归巢到淋巴结的过程需要通过高内皮小静脉在趋化因子(尤其是CXCL13)的指导下完成。然而,CXCL13并不是由高内皮小静脉直接产生,其如何介导B细胞归巢到淋巴结的分子机制目前还未阐明。NF-κB信号通路参与免疫反应、炎症反应、细胞凋亡、肿瘤发生等多种生物进程。NIK作为非经典NF-κB途径的关键分子也在维持完整的淋巴系统功能,特别是在维持完整的淋巴结和B细胞群,发挥重要作用。但对于其在淋巴管内皮细胞中的作用仍不甚明了,本研究旨在探索淋巴管内皮细胞中的NIK分子对于淋巴管功能的影响及其分子机制。方法:本研究将NIK-flox小鼠与Lyvel EGFP-hCre小鼠交配繁育出淋巴管内皮细胞条件性敲除NIK的小鼠(NIKLEC-KO,NIKfl/flLyvel+/Cre)及同窝对照的野生型(NIK+/+Lyvel+/Cre)小鼠。首先通过流式细胞术对小鼠的免疫器官进行表型分析,并通过耳部淋巴回流功能检测和异硫氰酸荧光素着色实验,评价NIKLEC-KO小鼠淋巴管引流液体和运输树突状细胞的功能。然后利用体内归巢实验检测主要细胞亚群的归巢情况。通过RT-qPCR分析相关趋化因子的表达,最后免疫小鼠通过酶联免疫吸附试验检测小鼠的抗体分泌能力以评价其体液免疫功能。结果:在本研究中,发现介导非经典NF-κB途径活化的激酶NIK对淋巴管内皮细胞介导的B细胞归巢到淋巴结发挥了重要作用。淋巴管内皮细胞条件性敲除NIK的小鼠并未表现出淋巴管的完整性破坏或整体功能的异常,但却表现出淋巴结中的B细胞比例显着降低。而在该小鼠脾脏中并未出现B细胞比例及生存状态的异常。B细胞的过继转移实验发现淋巴管内皮细胞特异性敲除NIK使淋巴结招募B细胞的功能发生障碍。此外,本研究进一步发现NIK介导淋巴管内皮细胞CXCL13和CCL19的表达。结论:NIK是通过调节淋巴管内皮细胞产生B细胞归巢趋化因子CXCL13进而使初始B细胞归巢到淋巴结。目的:SAPHO综合征是累及皮肤和骨关节的慢性无菌性炎症,主要表现为滑膜炎、痤疮、脓疱病、骨肥厚、骨炎。SAPHO综合征的发病原因及发病机制尚不清楚。有研究报道SAPHO综合征患者外周血中Th17比例升高。由于γδT细胞也是IL-17的一个重要来源,有可能参与SAPHO综合征的疾病进程。因此,本研究从检测SAPHO患者外周血γδT细胞表型入手,进而分析γδT细胞受体(TCRγδ)抗原互补决定区3(CDR3)的特征和双磷酸盐治疗后对外周血γδT细胞的影响,从叁个方面试图探索γδT细胞是否参与SAPHO综合征的疾病进程。方法:42名SAPHO综合征患者被按照可视化的模拟量表(VAS)疼痛评分和巴斯强直性脊柱炎活动指数(BASDAI),分为疾病活动期患者(18名)和疾病稳定期患者(24名)两组;另外,16名健康志愿者被用作对照。我们用流式细胞术分析并对比了这叁组外周血单核细胞中γδT细胞的相关表型,并分析了这些指标与患者的VAS和BASDAI的相关性。接下来,我们用特异性PCR和高通量测序的免疫组库技术分析并对比了分别来自疾病活动期(4名)、稳定期(4名)的8名患者以及4名健康对照外周血单个核细胞样品中TCRγδ CDR3的特征。第叁步我们采集30名纳入博宁-帕米膦酸二钠临床试验的SAPHO患者治疗前后的外周血,通过流式细胞术分析患者外周血yδT细胞的相关表型变化。最后,通过ELISA检测SAPHO患者血浆中CCT5的水平。结果:SAPHO患者外周血总的γδT细胞比例较健康对照显著下降,其中疾病活动组下降的尤为明显;患者Vδ1T细胞在患者中显着下降,而Vδ2T细胞没有差异;CD27+/CD27-γδT细胞的比值在活动期SAPHO患者中显着低于健康对照和稳定期患者。患者γδT细胞比例与VAS和BASDAI这两个疾病指标都没有显着的相关性,但Vδ2/Vδ1 γδT细胞和CD27+/CD27-γδT细胞两个比值与SAPHO的疾病进程呈现显着负相关,其中Vδ2/Vδ1 γδT细胞比值与VAS呈显着负相关,而CD27+/CD27-γδT细胞比值与VAS和BASDAI都呈现显着负相关。免疫组库结果发现所有SAPHO患者和稳定期患者的δ链多样性较健康对照显著降低;在出现频率前50的δ链CDR3序列中,克隆大小>10%的CDR3序列数SAPHO活动期患者显着低于健康对照,而>1%的CDR3序列数SAPHO稳定期患者显着高于健康对照;患者的γ链与对照相比,倾向于使用更短的CDR3区,而这种缩短并不是由于随机插入片段长度变短引起的;在TCRγδCDR3 V/J胚系基因片段取用频率方面,SAPHO综合征患者与健康对照的差异主要集中于γ链,包括TRGV3取用频率降低和TRGV5、TRGJ1取用频率升高。在应用双磷酸盐治疗后,SAPHO患者外周血Vδ2T细胞比例降低,Vδ1T细胞比例没有变化,记忆型γδT细胞比例降低,Vδ2T细胞向效应细胞分化增加。最后,活动期SAPHO患者血浆CCT5水平低于健康对照和稳定期患者,使用双磷酸盐治疗可以提高血浆CCT5水平,血浆CCT5水平与SAPHO疾病活动性评分VAS及BASDAI均有显着的负相关性。结论:γδT细胞,尤其是CD27-的γδT细胞亚群在SAPHO综合征的疾病进程中可能发挥一定的作用。SAPHO综合征患者的γδT细胞发生了一些与疾病相关的免疫组库特征的改变,Vδ2T细胞可能在双磷酸盐治疗SAPHO的过程中发挥一定作用,本研究为γδT细胞在SAPHO综合征疾病进程中发挥一定的作用提供了证据。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2018-05-01)
张新颖[2](2014)在《人淋巴管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向高转移细胞分泌蛋白的影响及候选蛋白的分析与验证》一文中研究指出第一章:人淋巴管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向转移细胞分泌蛋白表达的影响目的:本研究以人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系(SKOV3)、淋巴结定向高转移的亚克隆细胞系(SKOV3-PM4)、人淋巴管内皮细胞(HLEC)为研究对象,建立共培养体系,初步探讨人淋巴管内皮细胞对高转移性上皮性卵巢癌细胞分泌蛋白的影响。方法:将细胞按单独和共培养体系分为4组(A: SKOV3, B: SKOV3+HLEC, C: SKOV3-PM4, D:SKOV3-PM4+HLEC),收集各组细胞的培养上清液。采用抗体芯片和iTRAQ-2D-LC-MALDI-TOF/TOF/MS(基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术和相对与绝对定量同位素标记技术)方法检测各组细胞培养基中的蛋白,筛选出差异明显的分泌蛋白,通过gene oncology、DAVID、string、coremine、KEGG PATHWAY等生物信息学软件,对差异蛋白的功能、生物过程、定位、各蛋白之间的相互作用等进行分析,初步筛选出与卵巢癌淋巴结定向转移相关的节点蛋白。结果:(1)抗体芯片结果表明: C组与A组相比,有39个蛋白发生改变,其中Progranulin(GRN)、VEGFA等34个差异蛋白表达上调,SPARC、IGFBP7等5个差异蛋白表达下调;D与C组相比,有41个蛋白发生改变,其中VEGFA、GRN等22个差异蛋白表达上调,SPARC、IGFBP7等19个差异蛋白表达下调。(2)质谱分析鉴定出SKOV3, SKOV3+HLEC, SKOV3-PM4, SKOV3-PM4+HLEC细胞的分泌蛋白均为200多种(置信度大于95%的蛋白点),SKOV3-PM4与SKOV3相比较,SKOV3-PM4培养上清液中存在36个差异细胞因子,其中表达量上调的有22个,表达量下调的有14个;SKOV3-PM4+HLEC与SKOV3-PM4相比较,共培养后存在65个差异细胞因子,表达上调的有37个,表达量下调的有28个。(3)差异蛋白主要涉及物质代谢、酶活性调节、DNA合成、转录和翻译、细胞内离子运输、细胞粘附等生物学过程。通过蛋白互作网络图分析确定SPARC、VEGFA、GRN等与卵巢癌淋巴结转移密切相关。结论:淋巴结定向转移与淋巴管内皮细胞微环境关系密切,共培养后的差异蛋白涉及到基质细胞蛋白、细胞粘附作用因子、白细胞介素、趋化因子及细胞信号转导等方面。第二章:人淋巴管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向转移细胞分泌蛋白影响的候选蛋白验证目的:对蛋白芯片及质谱鉴定出的差异蛋白进行验证,经生物信息学分析后,选取与淋巴结定向转移高度相关的VEGFA、IGFBP7及SPARC,验证其在临床血清标本和卵巢癌不同淋巴结转移潜能细胞的表达情况。方法:采用ELISA方法对卵巢癌患者血清、卵巢良性患者血清、正常体检者血清标本及细胞培养基进行VEGFA、IGFBP7蛋白验证;采用RT-PCR及免疫荧光技术方法验证SPARC在卵巢癌SKOV3细胞、卵巢癌淋巴结定向高转移SKOV3-PM细胞的表达。结果:经ELISA在卵巢癌、良性肿瘤及正常人血清中验证发现VEGFA、IGFBP7差异有统计学意义(P<0.05),VEGFA在恶性组表达最高,正常组表达低;IGFBP7的表达在正常组中表达最高,恶性组中表达低。RT-PCR及免疫荧光技术结果显示SPARC在卵巢癌定向高转移细胞中的表达较卵巢癌细胞下调。结论:VEGFA表达上调及IGFBP7、SPARC的表达下调与卵巢癌淋巴结定向高转移密切相关。第叁章:肿瘤微环境与肿瘤淋巴结定向转移的研究进展。(文献综述)正常细胞处于一个相对稳定的内环境,按正常的程序进行着增殖、分化、凋亡以及相关因子的分泌和表达,而肿瘤发生、发展则不断打破这一平衡,逐渐形成一个适于自己生长的组织外环境,即肿瘤微环境。而肿瘤微环境中的众多促淋巴管生成因子、炎性条件、组织缺氧、酸性微环境以及间质高压形成等病理生理特性能促进肿瘤淋巴管生成,进而促进肿瘤淋巴结转移病灶的形成。本文就肿瘤微环境、淋巴管生成与卵巢癌淋巴结转移的关系作一综述。(本文来源于《广西医科大学》期刊2014-06-01)
陈伟斌[3](2014)在《结肠癌血管内皮生长因子-C及血管内皮细胞生长因子受体-3的表达与淋巴结转移的关系》一文中研究指出目的探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及血管内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3)的表达与结肠癌淋巴结转移的关系。方法收集经病理证实的结肠癌手术标本45例(研究组,淋巴结转移23例,未转移22例)和同期良性结肠黏膜息肉标本20例(对照组)。均采用免疫组织化学SP法检测结肠癌组织及良性结肠黏膜息肉组织中VEGF-C及VEGFR-3的表达水平,分析VEGF-C、VEGFR-3表达与淋巴结转移的关系。结果研究组VEGF-C阳性率及VEGFR-3表达均高于对照组(均P<0.01)。淋巴结转移组的VEGF-C阳性率及VEGFR-3阳性表达(LVD)均明显高于淋巴结未转移组[(91.3%比40.9%),(21.07±5.14比10.56±5.01),均P<0.01]。结论结肠癌存在VEGF-C及VEGFR-3的高表达,可能与促进淋巴结转移有关。(本文来源于《实用临床医学》期刊2014年04期)
张新颖,尹富强,刘丽,高婷,阮和云[4](2013)在《人淋巴管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向转移细胞分泌蛋白表达的分析》一文中研究指出目的:初步探讨人淋巴管内皮细胞(HLEC)对卵巢癌淋巴结定向转移细胞(SKOV3-PM4)分泌蛋白的影响。方法:将细胞体系分为4组(A组:SKOV3;B组:SKOV3+HLEC;C组:SKOV3-PM4;D组:SKOV3-PM4+HLEC),采用抗体芯片和iTRAQ-2D-LC-MALDI-TOF/TOF/MS方法检测各组细胞培养基中的蛋白,筛选出差异明显的分泌蛋白,对其行生物信息学分析,并采用ELISA方法在人血清标本和细胞培养基中进行验证。结果:抗体芯片与质谱分析结果提示,C组与A组相比、D组与C组相比Progranulin(GRN)、VEGFA表达上调,SPARC、IGFBP7表达下调。经过综合生物信息学分析,IGFBP7和VEGFA联系紧密,相互影响。与正常组血清相比,VEGFA在卵巢癌中的表达最高,IGFBP7表达最低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:淋巴结定向转移与淋巴管内皮细胞微环境关系密切,共培养后的差异蛋白涉及到基质细胞蛋白、细胞黏附作用因子等方面。其中VEGFA、GRN的表达上调及SPARC、IGFBP7的表达下调与卵巢癌淋巴结定向高转移密切相关。(本文来源于《中国肿瘤临床》期刊2013年19期)
陆南杭,张勇,冯自豪,亓发芝[5](2013)在《VEGF-C基因修饰的淋巴结移植促进淋巴内皮细胞再生的初步研究》一文中研究指出目的探讨采用VEGF-C基因修饰的淋巴结移植对移植淋巴结周围组织内淋巴内皮细胞再生的影响。方法取成年雄性SD大鼠36只,体重200.1~271.5 g,选取一侧采用带血管蒂淋巴结同侧原位移植方法制备腋窝淋巴结移植模型后,随机分为两组(n=18),分别将1.5×108PFU带Flag标签的VEGF-C基因过表达腺病毒载体及空载腺病毒载体注射入实验组及对照组大鼠移植淋巴结中。术后3 d,免疫荧光染色观察淋巴结内带Flag标签蛋白的表达情况;术后1、2、4周,免疫荧光染色观察移植淋巴结周围组织内Prox-1蛋白的表达并计算其荧光密度值;术后2、4周,通过测定患肢皮下注射偶氮蓝后大鼠血液在620 nm波长下吸光度(A)值,观察淋巴回流功能改善情况,以正常大鼠(正常组)及淋巴结移植大鼠(空白对照组)作为对照。结果术后3 d实验组及对照组移植淋巴结内均可检测到带Flag标签蛋白的表达。术后1、2、4周,实验组移植淋巴结周围组织内Prox-1蛋白荧光密度值呈进行性增加,且均明显强于对照组(P<0.05)。正常组及空白对照组大鼠血液A值分别为0.539±0.020及0.151±0.007。术后2周实验组及对照组A值分别为0.170±0.011及0.168±0.010,4周时分别为0.212±0.016及0.197±0.006,均显着低于正常组(P<0.05),但与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组及对照组间比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论 VEGF-C基因修饰的淋巴结移植能显着促进移植淋巴结周围组织内淋巴内皮细胞的再生,但在4周内不能改善大鼠患肢淋巴回流功能。(本文来源于《中国修复重建外科杂志》期刊2013年05期)
刘丽,黎丹戎,钟艳平,李力,高婷[6](2013)在《淋巴管内皮细胞微环境对卵巢癌淋巴结定向高转移细胞上皮-间质转化的影响》一文中研究指出目的通过人卵巢癌淋巴结定向高转移的细胞株(SKOV3-PM4)与人淋巴管内皮细胞株(HLEC)的条件培养和共培养,探讨HLEC微环境对SKOV3-PM4的运动迁移能力以及上皮-间质转化(EMT)的影响。方法采用transwell小室体外侵袭法,观察经HLEC的条件培养后SKOV3-PM4的侵袭、迁移能力的改变。SKOV3-PM4经HLEC的条件培养和共培养后的爬片细胞,采用免疫组化法检测转化生长因子(TGF-β1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达的变化。结果经HLEC培养基的条件培养后SKOV3-PM4细胞的侵袭率为(53±11)%,单独培养的SKOV3-PM4细胞的侵袭率为(30±5)%(P<0.05);条件培养后SKOV3-PM4细胞的迁移率为(48±5)%,单独培养的SKOV3-PM4细胞的迁移率为(34±2)%(P<0.05)。SKOV3-PM4细胞经条件培养和共培养后TGF-β1和vimentin表达上调(P均<0.05),E-cadherin表达下调(P<0.05)。结论淋巴管内皮细胞微环境可促进卵巢癌淋巴结定向高转移细胞间质化的转变,增强卵巢癌细胞的侵袭、迁移能力。(本文来源于《中国癌症防治杂志》期刊2013年01期)
高婷,黎丹戎[7](2012)在《卵巢癌淋巴结定向转移细胞和血管内皮细胞共培养后细胞的生物学特性研究》一文中研究指出目的在体外卵巢癌淋巴结高转移细胞(SKOV3-PM4)-人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical venous endothelial cells,HUVEC)交互培养、共培养体系中研究交互培养、共培养后细胞的生物学特性。方法建立荧光标记的SKOV3-PM4、HUVEC细胞,分别收集SKOV3-PM4细胞和HUVEC细胞(本文来源于《中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科肿瘤会场(妇科肿瘤学组、妇科病理学组)论文汇编》期刊2012-11-02)
高婷,黎丹戎[8](2012)在《卵巢癌淋巴结定向转移细胞和人淋巴管内皮细胞共培养后细胞的生物学特性研究》一文中研究指出目的在体外卵巢癌淋巴结高转移细胞(SKOV3-PM4)-人淋巴管内皮细胞(human lymphatic endothelial cells,HLEC)共培养体系中研究交互培养、共培养后细胞的生物学特性。方法建立绿色荧光蛋白慢病毒载体标记的SKOV3-PM4、红色荧光标记的HLEC细胞,分别收集SKOV3-PM4细胞和HLEC细胞培养基上清,作为交互培养的条件培养基,建立两种细胞交互培养与共培养的体系,MTT法测定生长曲线测定,HE染色、电镜观察细胞超微结构的改变,激光共聚焦显微(本文来源于《中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科肿瘤会场(妇科肿瘤学组、妇科病理学组)论文汇编》期刊2012-11-02)
高婷[9](2012)在《卵巢癌淋巴结定向高转移细胞与内皮细胞共培养后细胞的生物学特性研究》一文中研究指出第一章卵巢恶性肿瘤淋巴结定向高转移及其肿瘤微环境的研究进展(文献综述)卵巢上皮癌是妇科恶性肿瘤中发病率占第叁位,死亡率却位居第一位的恶性疾病。由于卵巢深居于盆腔深处,位置很隐蔽,卵巢癌在发病早期缺乏特异性症状及体征,很难在早期发现和诊断,约60%-70%的卵巢癌患者确诊时已属晚期。为探索卵巢肿瘤微环境对卵巢癌淋巴结定向转移的影响,本研究以卵巢癌淋巴结高转移细胞(SKOV3-PM4)、人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)、人淋巴管内皮细胞(HLEC)为研究对象,通过构建共培养模型,观察其对细胞的生物学特性的影响。现综合近年来的文献,对人卵巢恶性肿瘤淋巴结定向高转移及其肿瘤微环境的研究现状作一简要综述。第二章卵巢癌淋巴结定向转移细胞和血管内皮细胞共培养后细胞的生物学特性研究目的:在体外卵巢癌淋巴结高转移细胞(SKOV3-PM4)-人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical venous endothelial cells, HUVEC)交互培养、共培养体系中研究交互培养、共培养后细胞的生物学特性。方法:建立荧光标记的SKOV3-PM4、HUVEC细胞,分别收集SKOV3-PM4细胞和HUVEC细胞培养基上清,作为交互培养的条件培养基,建立两种细胞交互培养与共培养的体系,MTT法测定生长曲线测定,HE染色、电镜观察细胞超微结构的改变,激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、Transwell穿膜运动实验、划痕实验、明胶酶谱分析等方法研究交互培养、共培养后各组细胞的生物学特性。结果:与单独培养的SKOV3-PM4细胞相比,采用HUVEC细胞条件培养基交互培养后的SKOV3-PM4细胞伪足增多、核分裂像增多,生长速度明显快于SKOV3-PM细胞,G1期的细胞比例降低,G2、S期的细胞比例升高,细胞的运动侵袭能力增强;与单独培养的HUVEC相比,采用SKOV-PM4细胞条件培养基交互培养后HUVEC形态改变明显,出现空泡化超微结构,生长速度与HUVE细胞相似,G1期的细胞比例升高,G2、S期的细胞比例降低,细胞的运动侵袭能力增强。共培养的绿色荧光标记的SKOV3-PM4细胞-红色荧光标记的HUVEC细胞在激光共聚焦显微镜下可见两种细胞的融合现象;明胶酶谱分析显示,基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)在单独的SKOV3-PM4细胞中低表达,在HUVEC中不表达,在共培养的SKOV3-PM4-HUVEC中高表达。结论:交互培养、共培养后SKOV3-PM4、HUVEC细胞与单独培养的SKOV3-PM4、 HUVEC相比细胞的形态发生改变,细胞增殖、侵袭、迁移运动能力均增强,推测这些生物学行为的改变与细胞生长的微环境及细胞间相互作用途径有关。第叁章卵巢癌淋巴结定向转移细胞和淋巴内皮细胞共培养后细胞的生物学特性研究目的:在体外卵巢癌淋巴结高转移细胞(SKOV3-PM4)-人淋巴管内皮细胞(human lymphatic endothelial cells, HLEC)共培养体系中研究交互培养、共培养后细胞的生物学特性。方法:建立绿色荧光蛋白慢病毒载体标记的SKOV3-PM4、红色荧光标记的HLEC细胞,分别收集SKOV3-PM4细胞和HLEC细胞培养基上清,作为交互培养的条件培养基,建立两种细胞交互培养与共培养的体系,MTT法测定生长曲线测定,HE染色、电镜观察细胞超微结构的改变,激光共聚焦显微镜、Trans-well穿膜运动试验、划痕实验、小管形成实验、明胶酶谱分析等方法研究交互培养、共培养后各组细胞的生物学特性。结果:与单独培养的SKOV3-PM4细胞相比,采用HLEC细胞条件培养基交互培养后的SKOV3-PM4细胞伪足增多、核分裂像增多,生长速度明显快于SKOV3-PM细胞,细胞的运动侵袭能力增强;与单独培养的HLEC相比,采用SKOV-PM4细胞条件培养基交互培养后HLEC形态改变明显,胞浆内出现空泡化超微结构,生长速度稍高HLEC细胞,细胞的运动侵袭能力增强,细胞的成管能力也增强。共培养的绿色荧光标记的SKOV3-PM4细胞-红色荧光标记的HLEC细胞在激光共聚焦显微镜下可见两种细胞的融合现象;明胶酶谱分析显示,基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)在单独的SKOV3-PM4细胞中低表达,在HLEC中不表达,在共培养的SKOV3-PM4-HLEC中高表达。结论:交互培养、共培养后SKOV3-PM4、HLEC细胞与单独培养的SKOV3-PM4、 HLEC相比细胞的形态超微结构发生明显的改变,细胞增殖、侵袭、迁移、运动能力均增强,推测这些生物学特性发生改变可能与细胞生长的微环境及细胞间相互作用途径有关。第四章应用二维电泳和质谱技术筛选卵巢癌淋巴结定向转移细胞上清液中分泌蛋白质的差异性的初步研究目的:通过分离并鉴定卵巢癌淋巴结定向转移细胞系分泌蛋白的差异性,以发现分泌蛋白在肿瘤侵袭迁移过程中的作用。方法:收集卵巢癌(SKOV3)、卵巢癌淋巴结定向高转移细胞(SKOV3-PM4)的无血清培养液中的蛋白,用双向电泳分离细胞上清液中的蛋白进行比较。选择在SKOV3-PM4上清液中明显差异表达的蛋白点,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)质谱分析。结果:对筛选出的在SKOV3-PM4细胞上清液中明显差异表达的20个蛋白点,共有7个蛋白点被成功鉴定,其中在SKOV3-PM4细胞上清液中高表达的为5个,低表达2个。结论:SKOV3-PM4相对于SKOV3细胞上清液中蛋白存在明显的差异,差异蛋白与肿瘤的侵袭迁移过程相关(本文来源于《广西医科大学》期刊2012-06-01)
高婷,黎丹戎,李力,张玮,阮和云[10](2012)在《血管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向转移细胞侵袭能力的影响》一文中研究指出目的:研究血管内皮细胞对卵巢癌淋巴结高转移细胞的运动迁移和侵袭能力的影响。方法:建立卵巢癌淋巴结高转移细胞(SKOV3-PM4)、人脐血管内皮细胞(human umbilical venous endothelial cells,HUVEC)条件培养基的交互培养体系,通过MTT法测定生长曲线,HE染色观察细胞超微结构的改变,Transwell穿膜运动实验、划痕实验、明胶酶谱分析等实验方法研究交互培养后各组细胞的侵袭转移能力的变化。结果:与同期单独培养的SKOV3-PM4、HUVEC相比,交互培养后的SK-OV3-PM4伪足增多,生长速度明显快于SKOV3-PM4,交互培养后HUVEC呈不规则形态,出现空泡化超微结构,生长速度与HUVEC相似,细胞的运动和侵袭能力增强,基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在单独的SKOV3-PM4中低表达,在HUVEC中不表达,在共培养的SKOV3-PM4-HUVEC中高表达。结论:HUVEC上清液培养后的SKOV3-PM4的生物学行为和运动侵袭能力发生改变,推测可能与血管内皮分泌的VEGF、MMP-2等因子有关。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2012年01期)
淋巴结窦内皮细胞论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
第一章:人淋巴管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向转移细胞分泌蛋白表达的影响目的:本研究以人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系(SKOV3)、淋巴结定向高转移的亚克隆细胞系(SKOV3-PM4)、人淋巴管内皮细胞(HLEC)为研究对象,建立共培养体系,初步探讨人淋巴管内皮细胞对高转移性上皮性卵巢癌细胞分泌蛋白的影响。方法:将细胞按单独和共培养体系分为4组(A: SKOV3, B: SKOV3+HLEC, C: SKOV3-PM4, D:SKOV3-PM4+HLEC),收集各组细胞的培养上清液。采用抗体芯片和iTRAQ-2D-LC-MALDI-TOF/TOF/MS(基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术和相对与绝对定量同位素标记技术)方法检测各组细胞培养基中的蛋白,筛选出差异明显的分泌蛋白,通过gene oncology、DAVID、string、coremine、KEGG PATHWAY等生物信息学软件,对差异蛋白的功能、生物过程、定位、各蛋白之间的相互作用等进行分析,初步筛选出与卵巢癌淋巴结定向转移相关的节点蛋白。结果:(1)抗体芯片结果表明: C组与A组相比,有39个蛋白发生改变,其中Progranulin(GRN)、VEGFA等34个差异蛋白表达上调,SPARC、IGFBP7等5个差异蛋白表达下调;D与C组相比,有41个蛋白发生改变,其中VEGFA、GRN等22个差异蛋白表达上调,SPARC、IGFBP7等19个差异蛋白表达下调。(2)质谱分析鉴定出SKOV3, SKOV3+HLEC, SKOV3-PM4, SKOV3-PM4+HLEC细胞的分泌蛋白均为200多种(置信度大于95%的蛋白点),SKOV3-PM4与SKOV3相比较,SKOV3-PM4培养上清液中存在36个差异细胞因子,其中表达量上调的有22个,表达量下调的有14个;SKOV3-PM4+HLEC与SKOV3-PM4相比较,共培养后存在65个差异细胞因子,表达上调的有37个,表达量下调的有28个。(3)差异蛋白主要涉及物质代谢、酶活性调节、DNA合成、转录和翻译、细胞内离子运输、细胞粘附等生物学过程。通过蛋白互作网络图分析确定SPARC、VEGFA、GRN等与卵巢癌淋巴结转移密切相关。结论:淋巴结定向转移与淋巴管内皮细胞微环境关系密切,共培养后的差异蛋白涉及到基质细胞蛋白、细胞粘附作用因子、白细胞介素、趋化因子及细胞信号转导等方面。第二章:人淋巴管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向转移细胞分泌蛋白影响的候选蛋白验证目的:对蛋白芯片及质谱鉴定出的差异蛋白进行验证,经生物信息学分析后,选取与淋巴结定向转移高度相关的VEGFA、IGFBP7及SPARC,验证其在临床血清标本和卵巢癌不同淋巴结转移潜能细胞的表达情况。方法:采用ELISA方法对卵巢癌患者血清、卵巢良性患者血清、正常体检者血清标本及细胞培养基进行VEGFA、IGFBP7蛋白验证;采用RT-PCR及免疫荧光技术方法验证SPARC在卵巢癌SKOV3细胞、卵巢癌淋巴结定向高转移SKOV3-PM细胞的表达。结果:经ELISA在卵巢癌、良性肿瘤及正常人血清中验证发现VEGFA、IGFBP7差异有统计学意义(P<0.05),VEGFA在恶性组表达最高,正常组表达低;IGFBP7的表达在正常组中表达最高,恶性组中表达低。RT-PCR及免疫荧光技术结果显示SPARC在卵巢癌定向高转移细胞中的表达较卵巢癌细胞下调。结论:VEGFA表达上调及IGFBP7、SPARC的表达下调与卵巢癌淋巴结定向高转移密切相关。第叁章:肿瘤微环境与肿瘤淋巴结定向转移的研究进展。(文献综述)正常细胞处于一个相对稳定的内环境,按正常的程序进行着增殖、分化、凋亡以及相关因子的分泌和表达,而肿瘤发生、发展则不断打破这一平衡,逐渐形成一个适于自己生长的组织外环境,即肿瘤微环境。而肿瘤微环境中的众多促淋巴管生成因子、炎性条件、组织缺氧、酸性微环境以及间质高压形成等病理生理特性能促进肿瘤淋巴管生成,进而促进肿瘤淋巴结转移病灶的形成。本文就肿瘤微环境、淋巴管生成与卵巢癌淋巴结转移的关系作一综述。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
淋巴结窦内皮细胞论文参考文献
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