忽地笑α-葡萄糖苷酶编码基因的分子克隆与原核表达

忽地笑α-葡萄糖苷酶编码基因的分子克隆与原核表达

论文摘要

利用RACE技术从忽地笑(Lycoris aurea (L’Hér.) Herb.)花瓣中克隆获得一个α-葡萄糖苷酶编码基因Lau Agl。该基因cDNA全长2 810 bp,开放阅读框为2 613 bp,编码含有870个氨基酸残基的LauAgl蛋白质。LauAgl蛋白质氨基酸序列具有α-葡萄糖苷酶特征性的保守结构域和天冬氨酸残基组成的活性中心,其N端含有一个由21个氨基酸组成的信号肽序列,还具有一些蛋白质糖基化的潜在位点(N-X-S/T共有序列)。LauAgl蛋白质与石刁柏、椰子、油棕等其他植物的α-葡萄糖苷酶的氨基酸序列一致性达到63%以上。利用pET表达系统,通过截掉其N-端信号肽序列,可以实现LauAgl蛋白质在大肠杆菌中的诱导表达。本研究为Lau Agl蛋白质的功能鉴定及其在忽地笑种子萌发与生长发育中的作用研究提供理论基础。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 α-葡萄糖苷酶候选基因在忽地笑不同组织中的丰度
  •   1.2 忽地笑α-葡萄糖苷酶编码基因的克隆
  •   1.3 LauAgl蛋白质氨基酸序列的生物信息学分析
  •   1.4 LauAgl氨基酸序列的同源性
  •   1.5 LauAgl的原核表达分析
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 试验材料
  •   3.2 RNA的提取
  •   3.3 组织中基因丰度分析
  •   3.4 全长c DNA的克隆
  •   3.5 生物信息学分析
  •   3.6 LauAgl的原核表达及SDS-PAGE电泳检测
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李宜奎,李洁,程丽,钱彬彬,汪仁

    关键词: 忽地笑,葡萄糖苷酶,分子克隆,原核表达

    来源: 分子植物育种 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,农作物

    单位: 江苏省中国科学院植物研究所

    基金: 国家自然科学基金项目(31572151),江苏省自然科学基金项目(BK20160599),江苏省植物资源研究与利用重点实验室基金项目(JSPKLB201505)共同资助

    分类号: Q943.2;S567.239

    DOI: 10.13271/j.mpb.017.003562

    页码: 3562-3569

    总页数: 8

    文件大小: 7429K

    下载量: 86

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