酶反应论文_李辰,刘晓雷,白雪,刘明远

导读:本文包含了酶反应论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:胆酸,通量,辣根,保真度,碱基,可变性,嘌呤。

酶反应论文文献综述

李辰,刘晓雷,白雪,刘明远[1](2019)在《基于时间分辨光谱技术揭示牛心细胞色素c氧化酶反应机制》一文中研究指出细胞色素c氧化酶(CcO)是线粒体膜酶,该酶在氧化还原反应中起重要作用。牛心CcO是哺乳动物中的经典结构,明晰其结构和功能的关系,对于借鉴理解人体内的一些线粒体疾病具有重要的意义。令人遗憾的是,尽管牛心CcO的晶体结构已知[1],但因其具有13个亚基,难以实现点突变并结晶突变体,对其详细反应机理的研究受到制约。(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08)

吴翔宇[2](2019)在《DNA聚合酶反应绕过D-/L-异核苷-胸苷产生的潜在致突变性研究》一文中研究指出以修饰的非天然核苷作为主体结构所衍生出来的核苷类药物已经在抗病毒、抗肿瘤治疗中发挥着积极的作用。但是,由于正常生命体需要的天然核苷与非天然核苷结构相似,从而导致DNA聚合酶的选择性松懈可能会将修饰核苷引入到正常DNA链中,进而造成体内正常DNA的化学损伤。非天然核苷酸及其衍生物的掺入可能会引起的基因变异,甚至会影响或完全阻碍正常核酸的生物功能,引起生物体系统紊乱的毒副作用。本论文旨在从核苷的化学和立体修饰角度,深入研究一种核苷药物分子(异核苷)掺入DNA链之后,异核苷在体内的代谢及毒副作用。本论文还研究了生物体内各种聚合酶对药理活性明确或具有潜在活性的异核苷的识别能力;在此基础上,本论文进一步深入研究了异核苷损伤的核酸在这些酶的作用下是如何进行复制的。特别地,研究了异核苷类药物分子置于核酸链中后,其在正常细胞的复制过程中的跨损伤修复或变异。目前B家族DNA聚合酶可以识别D-异核苷叁磷酸结构,而L-核苷损伤的DNA在体外B家族DNA聚合酶的作用下,具有很强的自我修复能力。为了研究在不同家族DNA聚合酶的指导下,异核苷损伤的核酸的复制和跨损伤修复能力。本论文通过酶聚合反应动力学分析和保真度测定等实验,研究了异核苷对人体生物功能的抑制问题。通过研究异核苷掺入到DNA链中对遗传信息的复制与传递产生的影响,揭示了潜在异核苷类药物分子的具体毒副作用。本论文进行了以下实验:1.分别以D-/L-异核苷-胸苷为起始原料,合成了相应的D-/L-iso-T亚磷酰胺单体。采用固相的亚磷酰胺化学法,合成了异核苷修饰的核苷酸链。2.利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了以含D-/L-iso-T修饰的核苷酸链为模板的引物的延伸性质;在此基础上进行了动力学分析。结果表明单个或连续两个D-iso-Ts位点修饰的核苷链均可以被Taq和Vent(exo-)DNA聚合酶识别并扩展到模板全长。而含L-iso-T位点修饰的核苷链均不能被这两种DNA聚合酶识别。随着D-iso-T掺入量的增加,脱氧核糖核苷酸叁磷酸(dNTP)掺入的速率逐渐降低。这证明了 DNA聚合酶对异核苷具有抑制作用。3.通过PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究了含D-iso-T修饰的DNA模板指导的测序、保真度分析和热力学稳定性。结果表明D-iso-T与A/G配对时热力学稳定性比其他两个碱基对高。D-iso-T修饰位置除了存在正常TA配对外,还存在单个碱基中的滑动突变。这种滑动突变在生理学上具有重要意义:它不仅揭示了 D-iso-T损伤对人类生物学功能的抑制作用机制,还为聚合酶作用下含有D-iso-T损伤的DNA的遗传变异提供理论依据。(本文来源于《北京交通大学》期刊2019-08-01)

赵圆圆[3](2019)在《利用流平衡分析方法研究聚球藻代谢酶反应之间的协同性》一文中研究指出光合作用是生物界赖以生存的基础,也是地球碳氧循环的重要媒介。光合代谢系统提供了生命体基本的物质来源,同时是未来生物工业发展的基石。光合代谢网络的研究是生物学的热点问题之一。通过对全球碳循环的主要参与者和初级生产力的主要贡献者--光合生物蓝细菌聚球藻(Synechococcus)的代谢流、代谢途径等网络特性的研究,了解生物体代谢过程,以及酶反应之间的影响。生物过程的系统级建模和模拟,在定量和动态获得细胞功能方面具有指导作用。本文利用基于约束的代谢网络分析方法在计算机中模拟细胞代谢,分析聚球藻代谢网络的基本拓扑结构和网络内在联系。iJB785模型是为聚球藻Synechococcus elongatus PCC 7942建立的模型,以该聚球藻为实验对象,我们通过对其代谢网络中的反应进行逐一删除,使用FBA方法分析敲除反应后的代谢网络的通量分布,以及该反应的敲除对其余反应的影响,并找到代谢网络中对整个系统有影响的反应,进一步验证其网络理论和模型方法的可行性。对所构建的突变体进行代谢研究,比较其与野生型Synechococcus在上述功能方面的差异。并使用FVA方法找到给定约束条件的目标函数的最优值,并优化每个反应的最小和最大通量值,从而确定聚球藻代谢网络中每个反应通量的可允许范围,且通过使用FVA方法对网络中的反应进行分类,能粗略判断代谢网络的部分必需与非必需基因。代谢网络的最小反应集是能够维持生物体生命体征的最小反应集合,既可使生命体在恶劣的生存环境中保持最小的消耗,也可以在工业生产中实现最大的产出。传统的方法难以快速有效的找到达到某一生物学目标并满足最小化代谢调节的生命体的最小反应集,根据基因必要性,通过结合数学中的凸优化理论,找到一种在时间和规模上都优于传统方法的凸优化方法。(本文来源于《贵州师范大学》期刊2019-03-28)

陈文晶,王志刚,徐伟慧,刘泽平,吕智航[4](2018)在《邻苯二甲酸酯污染对黑土转化酶与脲酶反应动力学的影响》一文中研究指出采用室内模拟法,以东北黑土为供试土壤,以邻苯二甲酸二甲酯(DMP)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)为代表,采用3,5-二硝基水杨酸法和靛酚蓝比色法测定土壤转化酶和脲酶的活性,研究邻苯二甲酸酯(PAEs)污染对黑土转化酶和脲酶活性及其反应动力学的影响。结果表明,PAEs抑制了黑土中转化酶和脲酶的活性。基于土壤酶活性和PAEs浓度作线性回归,求得黑土轻微污染的临界指标(ED10):DMP污染黑土中转化酶和脲酶的ED10分别为24.352和5.015 mg·kg-1;DBP污染黑土中转化酶和脲酶的ED10分别为16.911和8.677 mg·kg-1。根据ED10值越小越敏感的原则,判定黑土中脲酶对PAEs污染比较敏感,可将脲酶活性作为反映PAEs污染黑土的生化指标。DMP和DBP使黑土中转化酶和脲酶酶促反应动力学参数降低,属于反竞争抑制机制。PAEs可能改变黑土的碳氮循环及其生态系统功能,进而影响黑土的可持续利用。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2018年09期)

吴玉姝,吴敏,刘敏[5](2018)在《连接酶反应介导的荧光策略用于高效检测尿嘧啶-DNA糖基化酶的活性》一文中研究指出目的:灵敏检测尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)活性有利于生物医学研究和疾病预后.这里,构建一种连接酶反应介导的荧光策略用于高效检测UDG活性.方法:在本策略中,两条短寡核苷酸链分别与发夹探针环部序列的一半杂交,形成含缺口的DNA复合物.在UDG作用下,发夹探针环部的单个U碱基被移除,产生无嘌呤/无嘧啶(AP)位点.AP位点能抑制缺口处的连接酶反应,使位于发夹探针末端的立足点和链迁移区域仍彼此邻近,从而引发杂交链式反应(HCR),产生大量G四倍体(G4)结构.最后,G4与N甲基卟啉IX(NMM)结合,产生增强的荧光信号.结果:本策略检测限低至0.000 20U/mL,并能区分UDG与其它DNA糖基化酶.结论:本策略为生物医学研究和疾病预后提供了一种有潜力的工具用于灵敏定量检测UDG活性.(本文来源于《聊城大学学报(自然科学版)》期刊2018年02期)

李书亚[6](2018)在《核酸错配对DNA连接酶反应的单位点核酸变异检测的影响》一文中研究指出基因变异最常见的形式是单核苷酸多态性(single-nucleotide polymorphism,SNP),它与人类疾病、药物效率有密切联系。SNP检测已被认为是早期诊断恶性肿瘤风险评估有前途的工具。全面了解单核苷酸多态性基因分型可以实现有价值的信息,并用来指导临床诊断和个体用药的发展,所以,简单、精准的SNP检测是非常重要的。由于较低的商业成本以及核酸底物识别的灵活性,T4 DNA连接酶被广泛应用于生物分子工程,特别是特定核酸序列的等位特异性连接检测。本论文探究了以T4 DNA连接酶为主的不同连接酶介导的连接反应中引入额外的错配对于目的基因片段上的单碱基变异位点的识别所产生的影响。论文以锁式探针成环反应为模型,系统性地验证了不同DNA连接酶的连接活性,分析了引入额外错配对连接酶特异性的影响。研究结果表明,引入额外的碱基错配,提高了T4 DNA连接酶对单碱基变异的目的核酸的特异性。对单碱基DNA突变检测,分析发现在连接点相邻位置引入额外的错配,可以明显提高T4 DNA连接酶的特异性。其中,最有效的错配碱基对可使T4 DNA连接酶的特异性提高600多倍。对单碱基RNA突变检测,分析发现对不同碱基检测时,额外引入错配的最佳位置不同,且T4 DNA连接酶对于DNA底物的识别灵敏度高于RNA/DNA复合底物的识别。此外,还对Taq DNA连接酶介导的连接反应进行分析,实验结果表明额外引入的错配对于Taq DNA连接酶对底物识别的特异性影响不大。本论文从不同连接酶的连接效率、对不同底物的识别特异性进行研究,确认了额外引入的错配可以提高T4 DNA连接酶对底物识别的特异性,提高了单碱基突变检测的精准度。所得结论对以锁式探针为模型的特异性核酸位点检测技术有指导意义,同时对发展临床诊断技术和个体化用药有推进作用。(本文来源于《天津大学》期刊2018-06-01)

杨正飞,吴坚平,杨立荣[7](2018)在《生物过程酶反应及产品技术研究》一文中研究指出生物过程酶反应技术具有催化效率高、环境友好等优点,发展势头迅猛,得到了越来越广泛的应用。综述了近年来单酶催化、多酶催化、化学酶法耦合催化,以及酶的混沌催化等方面的研究现状、重大突破及其在重要医药化工产品合成方面的应用,并对其发展趋势进行了展望。(本文来源于《生物产业技术》期刊2018年01期)

Shafaq,Sahar,Akif,Zeb,刘亚男,Naseeb,Ullah,徐安武[8](2017)在《Fe_3O_4/g-C_3N_4复合催化剂增强芬顿/光-芬顿和类过氧化酶反应的活性及稳定性(英文)》一文中研究指出石墨相的氮化碳(g-C_3N_4)已被广泛用于光催化、水分解、光子检测器、电池、以及光电阴极.与其他光催化材料相比,g-C_3N_4具有价格低廉,易制备,无毒无污染等优点.此外,C_3N_4具有适宜的带隙(2.7 eV),能有效地吸收可见光.有关C_3N_4的光催化研究很多,但是其降解效率受限于电子空穴对的快速复合.因此,为了提高C_3N_4光催化反应效率,需要对其进行改性.磁铁矿(Fe_3O_4)广泛用于光催化和芬顿/光-芬顿反应.Fe_3O_4晶体具有反式尖晶石结构,其中Fe~(2+)和Fe~(3+)同时存在.研究表明,磁铁矿在酸性条件下催化效果显着,然而,它的比表面积小,随着反应时间的推移,铁离子会溶出,不利于有机物降解反应.因此,近来许多研究着重于磁铁矿复合物的制备,以提高磁铁矿的稳定性及催化性能.本文通过惰性氛围高温焙烧叁聚氰胺制备了g-C_3N_4,再通过氯化铁和乙酸钠在乙醇中于180°C溶剂热反应,制备Fe_3O_4纳米粒子,最后通过静电自组装过程制备出Fe_3O_4/g-C_3N_4纳米复合材料.利用X射线衍射(XRD),扫描电子显微镜(SEM)及X射线光电子光谱(XPS)等手段验证其组成和结构.XRD结果表明,Fe_3O_4/g-C_3N_4复合材料中可以清晰看到Fe_3O_4和g-C_3N_4的衍射峰,说明这两种材料的晶相得以保持.SEM和TEM结果表明,Fe_3O_4纳米颗粒很好地附着在g-C_3N_4薄片上.XPS结果表明,氮化碳中存在典型的叁种N峰;此外还存在铁的两种价态.光-芬顿活性测试中,相同条件下,Fe_3O_4/g-C_3N_4在60 min内将罗丹明B(RhB)几乎降解完全,而单组份的Fe_3O_4或g-C_3N_4对RhB的降解小于50%.可见,复合后的Fe_3O_4/g-C_3N_4光催化性能得到很大提升.单g-C_3N_4本身由于快速的电子空穴复合以及对双氧水的弱亲和力,因而对Rh B降解效果差.单独的Fe_3O_4由于在中性或者碱性条件下反而会抑制光催化芬顿活性.对于制备的Fe_3O_4/g-C_3N_4复合材料,具有以下优点:(1)电子在Fe~(3+)和g-C_3N_4的LUMO轨道上的转移降低了电子-空穴对的复合;(2)Fe_3O_4均匀分布在g-C_3N_4上,对于H_2O_2的吸附提供了有利的高比表面积;(3)Fe_3O_4和g-C_3N_4之间的界面相互作用使得Fe_3O_4的稳定性提高.通过降解RhB的动力学研究,得到反应速率为0.02 min~(–1),属准一级反应.分析检测结果表明,光-芬顿反应后,RhB分子被彻底矿化降解,没有中间产物生成,最终降解为CO_2和水.同时,通过对辣根过氧化物酶(HRP)模拟催化进行测试,以3,3',5,5'-四甲基联苯胺盐酸盐(TMB)作为基质,同时添加双氧水和Fe_3O_4/g-C_3N_4,在pH值为4.5条件下,TMB可以被有效氧化.实验表明,Fe_3O_4/g-C_3N_4添加量为25 mg/ml时,对TMB氧化性能最佳.复合催化剂还用于多巴胺的催化氧化反应.结果表明,多巴胺的氧化反应速率常数为1.21 min~(–1),属一级动力学反应.总之,复合材料提高了Rh B的光催化降解活性和稳定性;对TMB和HRP亲和性好,表现出高的类过氧化酶反应活性;有效的多巴胺氧化反应表明其有望用于生物基氧化反应中.实验结果表明,本文发展的Fe_3O_4/g-C_3N_4复合材料为其他类型复合材料的制备与应用提供了新的思路.(本文来源于《催化学报》期刊2017年12期)

曾庆真,刘艳平,王自豪[9](2017)在《酶反应液中熊去氧胆酸及7-酮基石胆酸的定量研究》一文中研究指出目的建立酶法制取熊去氧胆酸中控质量检测方法。方法采用岛津Inertsil ODS-SP C18色谱柱(4.6mm×25mm,5μm),流动相为乙腈-0.136g/L磷酸二氢钠溶液(4:6,v/v,磷酸调p H至3.0),流速为1.0m L/min,波长210nm。结果熊去氧胆酸、7-酮基石胆酸在一定范围内线性关系良好,相对标准偏差均小于1.0%。结论该方法可简便快速地对酶反应液中熊去氧胆酸、7-酮基石胆酸进行同时定量分析。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2017年A0期)

刘芳[10](2017)在《青霉素G酰化酶反应机理的说明》一文中研究指出对变异的大肠杆菌ATCC 11105中提取的青霉素G酰化酶的反应及其逆反应动力学的研究和其反应常数的确定,结果表明,酶会被过量的青霉素G和两种产物所抑制。在正反应方向的脱酰作用中观察到6-氨基青霉烷酸(6-APA)的非竞争性抑制和苯乙醛酸的竞争性抑制。逆酰化反应的最适pH是5.7。此逆反应的机制被研究,底物抑制的影响也被研究,如6-APA,苯乙酸和产物。结果表明,青霉素G是逆反应的混合型抑制剂。版权为2001Elsevier科学股份有限公司所有。(本文来源于《现代商贸工业》期刊2017年34期)

酶反应论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

以修饰的非天然核苷作为主体结构所衍生出来的核苷类药物已经在抗病毒、抗肿瘤治疗中发挥着积极的作用。但是,由于正常生命体需要的天然核苷与非天然核苷结构相似,从而导致DNA聚合酶的选择性松懈可能会将修饰核苷引入到正常DNA链中,进而造成体内正常DNA的化学损伤。非天然核苷酸及其衍生物的掺入可能会引起的基因变异,甚至会影响或完全阻碍正常核酸的生物功能,引起生物体系统紊乱的毒副作用。本论文旨在从核苷的化学和立体修饰角度,深入研究一种核苷药物分子(异核苷)掺入DNA链之后,异核苷在体内的代谢及毒副作用。本论文还研究了生物体内各种聚合酶对药理活性明确或具有潜在活性的异核苷的识别能力;在此基础上,本论文进一步深入研究了异核苷损伤的核酸在这些酶的作用下是如何进行复制的。特别地,研究了异核苷类药物分子置于核酸链中后,其在正常细胞的复制过程中的跨损伤修复或变异。目前B家族DNA聚合酶可以识别D-异核苷叁磷酸结构,而L-核苷损伤的DNA在体外B家族DNA聚合酶的作用下,具有很强的自我修复能力。为了研究在不同家族DNA聚合酶的指导下,异核苷损伤的核酸的复制和跨损伤修复能力。本论文通过酶聚合反应动力学分析和保真度测定等实验,研究了异核苷对人体生物功能的抑制问题。通过研究异核苷掺入到DNA链中对遗传信息的复制与传递产生的影响,揭示了潜在异核苷类药物分子的具体毒副作用。本论文进行了以下实验:1.分别以D-/L-异核苷-胸苷为起始原料,合成了相应的D-/L-iso-T亚磷酰胺单体。采用固相的亚磷酰胺化学法,合成了异核苷修饰的核苷酸链。2.利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了以含D-/L-iso-T修饰的核苷酸链为模板的引物的延伸性质;在此基础上进行了动力学分析。结果表明单个或连续两个D-iso-Ts位点修饰的核苷链均可以被Taq和Vent(exo-)DNA聚合酶识别并扩展到模板全长。而含L-iso-T位点修饰的核苷链均不能被这两种DNA聚合酶识别。随着D-iso-T掺入量的增加,脱氧核糖核苷酸叁磷酸(dNTP)掺入的速率逐渐降低。这证明了 DNA聚合酶对异核苷具有抑制作用。3.通过PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究了含D-iso-T修饰的DNA模板指导的测序、保真度分析和热力学稳定性。结果表明D-iso-T与A/G配对时热力学稳定性比其他两个碱基对高。D-iso-T修饰位置除了存在正常TA配对外,还存在单个碱基中的滑动突变。这种滑动突变在生理学上具有重要意义:它不仅揭示了 D-iso-T损伤对人类生物学功能的抑制作用机制,还为聚合酶作用下含有D-iso-T损伤的DNA的遗传变异提供理论依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

酶反应论文参考文献

[1].李辰,刘晓雷,白雪,刘明远.基于时间分辨光谱技术揭示牛心细胞色素c氧化酶反应机制[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019

[2].吴翔宇.DNA聚合酶反应绕过D-/L-异核苷-胸苷产生的潜在致突变性研究[D].北京交通大学.2019

[3].赵圆圆.利用流平衡分析方法研究聚球藻代谢酶反应之间的协同性[D].贵州师范大学.2019

[4].陈文晶,王志刚,徐伟慧,刘泽平,吕智航.邻苯二甲酸酯污染对黑土转化酶与脲酶反应动力学的影响[J].浙江农业学报.2018

[5].吴玉姝,吴敏,刘敏.连接酶反应介导的荧光策略用于高效检测尿嘧啶-DNA糖基化酶的活性[J].聊城大学学报(自然科学版).2018

[6].李书亚.核酸错配对DNA连接酶反应的单位点核酸变异检测的影响[D].天津大学.2018

[7].杨正飞,吴坚平,杨立荣.生物过程酶反应及产品技术研究[J].生物产业技术.2018

[8].Shafaq,Sahar,Akif,Zeb,刘亚男,Naseeb,Ullah,徐安武.Fe_3O_4/g-C_3N_4复合催化剂增强芬顿/光-芬顿和类过氧化酶反应的活性及稳定性(英文)[J].催化学报.2017

[9].曾庆真,刘艳平,王自豪.酶反应液中熊去氧胆酸及7-酮基石胆酸的定量研究[J].世界最新医学信息文摘.2017

[10].刘芳.青霉素G酰化酶反应机理的说明[J].现代商贸工业.2017

论文知识图

酶催化酸解反应的填充床反应器的结构...锰过氧化物酶的催化循环反应机制Fig....自行试制的鼓泡式反应器Fig.5-2Trial...接种菌根对文冠果菌根侵染率的影响重组质粒GRzL的构建Fig2-1BTheconst...结果

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