琼胶降解菌论文_谭琳山

导读:本文包含了琼胶降解菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:多相,性质,细菌,弧菌,贝类,染色体,原位。

琼胶降解菌论文文献综述

谭琳山[1](2019)在《具有抗生素耐受性的琼胶降解菌的性质研究》一文中研究指出琼胶是一种海洋生物多糖,其降解产物琼胶寡糖具有多种生物活性,有较好的经济价值和应用前景。筛选出高效和抗逆性好的琼胶降解菌是制备琼胶寡糖的一个重要环节。本文自广西防城港市红树林沉积物中筛选了一株琼胶降解菌,对其进行了 16srRNA鉴定,测定了菌株的部分生理生化性质,测定菌株对部分抗生素的耐受性,确定了不同因素对菌株产琼胶酶的影响,优化了菌株产琼胶酶的条件,测定了琼胶酶的部分性质。论文得到的主要研究结果如下:经16s rRNA鉴定,确定该菌株为寡养单胞菌属Stenotrophomonas的细菌,命名为Stenotrophomonassp.N1,保藏编号为CCTCCNO:M2019073。该菌株为革兰氏阴性菌,好氧,耐盐,不能分解纤维素,不产硫化氢。该菌株有极强的抗生素耐受性,能在分别含有诺氟沙星、磺胺甲恶唑、四环素(浓度均为1000mg/L)的营养琼脂培养基上正常生长。测定了单因素条件温度、起始pH、接种龄、接种量、培养时间等对菌株Stenotrophomonassp.N1产琼胶酶的影响,确定菌株适宜的产酶条件为:培养温度40℃,培养基起始pH值为7.5,接种龄10 h,接种量10%,培养时间48 h。根据单因素实验结果,用正交试验优化了菌株的产琼胶酶条件,优化后的产酶条件为:培养温度40℃、培养基起始pH值为7.5、接种量12%、培养时间48 h。在优化的产酶条件下,低浓度的诺氟沙星、磺胺甲恶唑或四环素对琼胶酶活力的影响较小,单一抗生素浓度为300 mg/L时,琼胶酶活力下降17.47-18.03%,抗生素浓度大于500mg/L时,琼胶酶活力降低的幅度较大。菌株Stenotrophomonassp.N1所产琼胶酶为胞外β琼胶酶,能将琼胶降解为新琼二糖。该琼胶酶的最适催化温度为35℃,在25-45℃的温度范围内具有良好的热稳定性,能保持70%以上的相对酶活力。该琼胶酶最适催化pH值为7.0,在5.0-8.0的pH值范围内具有良好的酸碱稳定性,能保持70%以上的相对酶活力。在琼胶含量为0.3%时,琼胶酶活力最高。该琼胶酶对卡拉胶也具有良好的降解性,难以降解褐藻酸钠、壳聚糖。(本文来源于《广西大学》期刊2019-06-01)

常亚奇[2](2019)在《海洋琼胶降解菌的分离、琼胶酶研究及叁株新菌的鉴定》一文中研究指出海洋是生命的起源地,其中蕴含着丰富的资源,积极开发海洋资源,大力发展蓝色经济,是推动强国战略的重要方面。海洋生物中含有大量可利用的海洋多糖,琼胶是其中重要的组成成分之一,具有广阔的开发应用前景。琼胶降解菌可产生琼胶酶,为实现琼胶多糖的绿色、高效的生物降解提供了有力的工具,受到了广泛关注。本文以琼胶降解菌为主要研究对象,进行一系列研究工作。首先,以分离琼胶降解细菌为出发点,采集威海及日照沿海样品进行海洋微生物的筛选分离,共得到14株潜在新物种和7株琼胶降解菌。对其中的2株海洋新物种O448T和F02T及1株新型琼胶降解菌RQJ05T进行多相分类。经鉴定,菌株0448T呈革兰氏染色阴性、好氧性、无运动性,氧化酶和过氧化氢酶呈阳性,主要的呼吸醌是Q-10,主要的脂肪酸成为是C18:1ω7c,极性脂组成主要有磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油,结合生理生化特征及遗传学特征分析,菌株0448T确定为红杆菌科中的新属新种,命名为沉积物大洋杆菌(Oceanibium sediminis gen.nov.,sp.nov.);菌株F02T细胞呈革兰氏阴性、严格需氧菌,具有运动性和氧化酶与过氧化氢酶活性,主要的呼吸醌是Q-8,主要的脂肪酸成分是C18:11ω7c、C16:1ω7c、C15:o和C18:1ω9c,主要的极性脂组成有磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺和一种未被鉴定的磷脂,结合生理生化特征及遗传学特征分析,确定为--变形菌纲中的新属新种,命名为沉积物海栖杆菌(Maribactrumsediminisgen.nov.,sp.nov.);菌株RQJ05T革兰氏染色阴性、好氧型细菌,有运动性,氧化酶呈阳性但过氧化氢酶呈阴性,主要的呼吸醌是Q-8,主要的脂肪酸成分是Summed Feature 3(C16:1ω71 and/or C16:1ω6c)、C16:0 和 Summed Feature 8(C18:1 ω7c and/or C18:1ω6c),极性脂种类主要有磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油和磷脂,结合生理生化特征及遗传学特征分析,确定为交替单胞菌科中的新属新种,命名为嗜琼胶藻生菌(Algilactibacter agarilytica gen.nov.sp.nov.)。对琼胶降解菌QM202T和RQJ05.T进行基因组测序,对琼胶酶基因进行预测分析,共预测出28条潜在琼胶酶基因,其中菌株QM202T中有4条,RQJ05T中有24条。对预测得到的所有琼胶酶基因进行外源表达,对表达产物进行酶活检测,结果显示共有11个琼胶酶具有琼胶降解活性,其中菌株QM202T中有4个,RQJ05T中有7个。然后用亲和层析的方式成功纯化出重组琼胶酶QM202-1与RQJ05-21。最后对纯化后的重组琼胶酶的结构与酶学性质进行探究,结果显示,琼胶酶QM202-1属于GH50家族,最适反应温度为30-40℃,最适反应pH为7.0,DTT能大幅度增加酶活,降解产物为新琼四糖,比酶活为34.7U/mg。琼胶酶RQJ05-21属于GH16家族,最适反应温度为50℃,最适反应pH为8.0,Co2+、Fe2+、DTT能大幅度增加酶活,具有琼胶降解能力的同时也有一定程度降解淀粉、卡拉胶、海藻酸钠的能力,降解琼胶时比酶活为66.5 U/mg且产物为新琼四糖与新琼六糖。本研究分离并得到多株琼胶降解菌与多条琼胶酶蛋白,为实现琼胶多糖的绿色、高效的生物降解提供了有力的工具。(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-21)

狄文婕[3](2018)在《红树林沉积物中琼胶降解菌原位富集及琼胶酶基因的挖掘、表达与性质分析》一文中研究指出琼胶寡糖由琼胶降解所得,在食品、药品、化妆品等领域有重要的应用价值。酶解法制备琼胶寡糖具有高效、底物重复性高和环境友好等优势,因而获得酶学性质良好的琼胶酶在琼胶寡糖生产中具有重要意义。本文针对此开展研究,主要研究内容和结果如下:(1)通过龙须菜原位富集红树林沉积物中琼胶降解菌,经16S r RNA基因多样性验证,富集后的结果是样品组Mgv-B富集效果最明显,表明在沉积物中富集得到了高丰度的多糖相关的降解菌。随后,通过高通量测序获得了大量来源于红树林沉积物中未培养微生物的琼胶酶基因资源,对其中30个具有完整开放阅读框琼胶酶基因在大肠杆菌中进行原核表达并验证其粗酶活性,其中21个具有琼胶酶活性。(2)在所获得的具有活性的琼胶酶基因中挑选出一条氨基酸序列比对相似性最低的基因,命名为aga M1。对aga M1基因进行原核表达与纯化,重组Aga M1(r Aga M1)分子量约为70 k Da,最适温度为50°C,最适p H为7.0。r Aga M1具有良好的温度及p H稳定性,在50°C下保温60 h后仍剩余36.53%的相对酶活,在p H 5.0及p H 10.0缓冲液中分别保温60 h后仍分别剩余62.15%和55.97%的相对酶活。Ag+、Cu2+、十二烷基硫酸钠(SDS)、Beta-巯基乙醇(Beta-Me)对酶活有明显的抑制作用;而盐酸胍(guanidine-HCl)、二硫苏糖醇(DTT)对酶活有明显的促进作用。r Aga M1的Km值为1.82 mg/ml,Vm值为357.14 U/mg,与底物亲和力较大。其降解琼脂糖终产物为新琼四糖和新琼六糖。(3)通过基因截短的方法初步探究基因缺失对琼胶酶活性的影响。结果表明,N端截短完全破坏了琼胶酶的活性。而C端截短的两个蛋白r Aga M1-01(从C端截短480bp)和r Aga M1-02(从C端截短960bp)则保留了对琼脂糖的降解活性,但酶活性均降低,且热稳定性、p H稳定性、金属离子和螯合剂的耐受性也均不如原始琼胶酶r Aga M1。进一步的分析发现,二者的最适温度没有发生改变,均为50°C,但最适p H均发生了改变,其中r Aga M1-01和r Aga M1-02分别为9.0和6.0。表明C端的480-960bp之间的序列对酶活作用p H具有重要影响。此外,r Aga M1-01降解琼脂糖终产物为新琼四糖、新琼六糖、新琼八糖、新琼十糖及新琼十二糖,r Aga M1-02降解琼脂糖终产物为新琼八糖、新琼十糖及新琼十二糖。这些结果初步证明截短区域(C0-C960)对琼胶酶的活性、稳定性、离子耐受性及底物亲和力可能存在重要影响。此外,r Aga M1-01及r Aga M1-02可产生新琼八糖、新琼十糖及新琼十二糖高聚合度的新琼寡糖,而目前通过酶解法很难获得高聚合度的新琼寡糖,因而r Aga M1-01及r Aga M1-02和其产生的高聚合度寡糖在工业应用中具有重要的应用价值。(本文来源于《国家海洋局第叁海洋研究所》期刊2018-06-01)

曾鸿俏[4](2017)在《琼胶降解菌的筛选与琼胶酶基因克隆》一文中研究指出浩瀚无垠的海洋环境中拥有着丰富的自然资源,其中海藻和细菌的种类尤其丰富。海藻中富含许多琼胶,而琼胶寡糖可以被琼胶降解菌降解产出,拥有很广的用途。然而制造琼胶寡糖的技术却是一个急需攻克的技术难题。目前主要采用的是酶水解法和化学法,其中酶水解法反应温和,消耗量少,同时具有专一性和高效性,成为制备琼胶寡糖最常用的方法。本实验室从海洋环境中分离筛选的出3株具有降解琼胶功能的海洋琼胶降解菌,分别编号为FG4、FG7和FG8。在显微镜下观察其形态学特征,并进行革兰氏染色和抗生素抗性实验,结果发现:FG7和FG8均为粘稠状橘红色菌落;在对氨辛青霉素(Ampicillin,Amp)、氯霉素(Chloramphenicol,Cm)、羧苄青霉素(Carbenicillin,Cb)和硫酸链霉素(Streptomycin sulfate,Str)的抗性实验中,FG7 对氯霉素(Chloramphenicol,Cm)和硫酸链霉素(Streptomycin sulfate,Str)具有抗性,FG8对氯霉素(Chloramphenicol,Cm)具有抗性。以细菌鉴定的通用引物1492R和968F对细菌进行鉴定,将获得的目的片段经过电泳检测,回收DNA片断,通过连接转化,选出克隆成功上的连到载体上的,再用T载体引物M13R(-48)和M13F(-47)进行菌液PCR扩增检测。对鉴定的16SrDNA目的片段测序,测序序列通过BLAST比对和同源性分析,初步确定FG7为弧菌属(Vibrio sp.),FG8为产微球茎属(Microbulbifer sp.)。为了进一步研究获取琼胶降解菌Vibrio sp.FG4的基因功能,利用染色体步移法对Vibrio sp.FG4的基因序列进行扩增。首先提取Vibriosp.FG4的总DNA,通过公布的琼胶酶基因序列找出与其具有同源性的基因,寻找这些基因的保守区域序列并进行引物的设计,设计出扩增保守区域的特异性引物,克隆出Vibrio sp.FG4基因的中间保守区域片段,然后利用染色体步移试剂盒提供的AP引物以及针对Vibrio sp.FG4基因组设计的特异性SP引物进行染色体步移,扩增Vibrio sp.FG4的基因片段,对克隆获得的片段进行测序。测序结果得到Vibrio sp.FG4基因的基因片段,命名为“agaFG4-B”。根据生物信息学分析表明,“agaFG4-B”基因大小为1830 bp,编码580个氨基酸,5'端的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)共有6个ORF,理论分子量为64.490 kDa,理论等电点pI值为10.86。通过NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中Blastp比对和构建系统发育树比较分析,结果表明“agaFG4-B”与假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.)的CY24 agarB的琼胶酶基因为同一聚簇,具有同源性,因此说明克隆得到的“agaFG4-B”为一种琼胶酶基因片段。结合上文得知通过基因克隆的最新技术,最终得到了 Vibrio sp.FG4的1条琼胶酶基因片断,不仅丰富了琼胶降解菌基因功能的信息,而且为今后琼胶降解菌在工业上的生产应用和全面了解琼胶降解菌的基因功能及后续的表达调控提供了理论依据。同时也促进了琼胶降解菌活性物质的表达调控机制的研究,使得开发利用琼胶降解菌生产功能性寡糖创造了一定的条件,加快了其在工业生产上的应用进程。(本文来源于《海南大学》期刊2017-05-01)

韩军萍[5](2016)在《琼胶降解菌筛选及琼胶酶分离纯化》一文中研究指出近年来,海藻多糖及寡糖功能食品的研究开发受到青睐,琼胶寡糖是众海洋功能性低聚糖中的一种。琼胶寡糖具有抗氧化、抗炎、抑菌、吸湿保湿美白、抑制黑色素形成、延缓衰老等生物活性。目前,制备琼胶寡糖的方法主要是酸解法和生物降解法,酸解法存在诸多弊端,而生物降解法是目前琼胶寡糖的绿色制备方法,所以其成为研究的热点。但存在的普遍问题是:琼胶酶来源少,活性低,阻碍琼胶寡糖的产业化生产。因此,筛选高产琼胶酶的菌株并对琼胶酶进行放大试验具有重要意义。以筛选降解琼胶生成琼胶寡糖的降解菌为出发点,从紫菜养殖区海水中通过富集培养、初筛、复筛筛选得到一株能降解琼胶的菌株HJPHYXJ~(-1)。该菌为革兰氏阴性菌,16S rDNA序列同源性与需钠弧菌(Vibrio natriegens)的达到了99%;结合形态特征和生理生化实验结果鉴定该菌为需钠弧菌(Vibrio natriegens),Genbank序列号为KR181948,保藏编号为CCTCC M 2015244。通过单因素实验对菌株产酶条件进行优化,该菌株较合适的产酶条件为:接种龄8 h,接种量10%,温度30℃,培养基初始pH=6.5,培养时间42 h,酶解液中还原糖含量可达到714.00 mg×L~(-1),是优化前的4.79倍。采用优化后的培养条件对菌株进行培养,发酵液经冷冻离心、硫酸铵盐析、冷冻干燥得到粗酶粉,粗酶经DEAE Sepharose Fast Flow离子交换、Sephacryl S~(-1)00 HR凝胶层析等柱层析分离纯化,获得电泳纯的琼胶酶;SDS-PAGE电泳分析其分子量约为33.8 kD,纯化倍数为14.36,收率为2.9%。该琼胶酶可将琼胶转化为新琼寡糖,说明该琼胶酶为β-琼胶酶。琼胶酶酶学性质研究表明:该酶的最适反应温度为45℃;最适反应pH为8.5;该酶的动力学参数Km=12.24 mg×mL~(-1),Vmax=0.051 mmol×(L·min)~(-1);该酶的底物专一性良好,对琼胶的水解效果较好,对其他多糖有水解效果差或几乎不水解。酶解液经HPLC检测:酶解产生的寡糖分子量范围在342~(-1)962之间,是以新琼二糖为重复单位的新琼寡糖;随着酶解时间的延长,分子量小的寡糖组分所占比例提高。以Vibrio natriegens HJPHYXJ~(-1)为出发菌株,对其进行了紫外诱变,得到了一株能够稳定遗传的突变株,突变株的酶活可达到151.85 U×mL~(-1),较原始菌株提高了46.30%。(本文来源于《华侨大学》期刊2016-06-06)

朱磊[6](2016)在《产琼胶酶降解菌的筛选及酶的固定化研究》一文中研究指出琼胶主要由琼脂糖和琼脂胶构成,是目前应用最为普遍的海洋多糖之一。琼脂糖可被琼胶酶降解为琼胶寡糖,具有较强的抗氧化、抗炎等生理活性,是一种非常有开发潜力的低聚糖。本文通过从大连海域海藻中筛选琼胶降解菌,研究其产酶条件以及游离与固定化后琼胶酶酶学性质,为琼胶酶的应用提供一定的依据。其结果如下:(1)利用卢戈氏碘液染色从石花菜等中筛选一琼胶降解菌株,酶活力为2.89U/m L。经16S r DNA鉴定为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.),暂命名为Pseudoalteromonas sp.Z。(2)对琼胶降解菌产酶条件进行了优化及游离琼胶酶酶学性质研究。在转速为140r/min、碳源为琼脂粉、氮源为蛋白胨、接种量为1%、琼脂浓度为0.2%时Pseudoalteromonas sp.Z产琼胶酶酶活力最好;Pseudoalteromonas sp.Z所产琼胶酶酶促反应最适温度为35℃,且酶活在30-40℃范围内稳定性较好;Pseudoalteromonas sp.Z所产琼胶酶酶促反应最适p H为8.0,且酶活在7.5-8.5内稳定性较好;同时Fe2+、Mg2+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、SDS、K+、NH4+对琼胶酶酶促反应均有不同程度的抑制作用。(3)对所产琼胶酶进行了固定化研究。海藻酸钠浓度为40g/L时,固定化酶酶活力为1.39 U/m L;琼胶酶酶液与海藻酸钠溶液体积比为1:3时,酶活力为1.57 U/m L;固定化时间为2h时,酶活力为2.09 U/m L;Ca Cl2浓度为4%时,酶活力为1.92 U/m L;硬化时间为1h时,酶活力为1.88 U/m L;p H为7.5时,固定化酶酶活力为1.95 U/m L。在单因素试验的基础上利用正交实验确定了固定化条件的最优组合为海藻酸钠浓度40g/L、Ca Cl2浓度为4%、琼胶酶酶液与海藻酸钠溶液体积比为1:3,此条件下的酶活力为2.1U/m L,酶活力较单因素时得到了优化。(4)比较了固定化琼胶酶与游离酶的酶学性质。固定化琼胶酶最适反应温度为40℃,且在35-50℃范围内温度稳定性较好,较游离琼胶酶的最适作用温度提高了5℃,优于游离琼胶酶;固定化琼胶酶最适反应p H为8.5,较游离琼胶酶最适作用p H向碱性移动了0.5个单位,且在7.0-9.0范围内p H稳定性较好,p H适应范围较游离琼胶酶广。目前操作稳定性稍差些,重复使用4次后,酶活力从1.92U/m L降至0.58U/m L。(本文来源于《大连工业大学》期刊2016-06-01)

张林林,江玉姬,张龙涛,郑宝东,张怡[7](2016)在《一株海洋贝类肠道琼胶降解菌的筛选与鉴定》一文中研究指出以琼胶为唯一碳源,从海洋贝类肠道微生物共筛选出44株降解琼胶的海洋细菌,通过初筛和DNS法测定酶活得到一株产酶最高的菌株A-001,酶活力可达到13.01 U·m L-1.菌落形态为乳白色,革兰氏阴性菌,呈弯曲短杆状,通过微生物动力学实验,细菌A-001具有运动性.据生理生化特征和16Sr DNA序列可鉴定A-001为溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus).(本文来源于《福建农林大学学报(自然科学版)》期刊2016年01期)

林伯坤,喻玉立,邵军丽,郭莲仙,戴娟秀[8](2015)在《琼胶降解菌在卫生检验专业综合实验教学中的应用》一文中研究指出卫生检验专业是个涉及多学科知识的专业,卫生检验专业综合实验要求培养学生多学科的实验技能。琼胶降解菌的相关研究(筛选、鉴定和酶活测定等)涉及多个学科的实验技能,包括微生物学、生物化学和分子生物学等,有利于提高学生的综合实验技能,具有适合用于开展卫生检验专业综合实验的特点。(本文来源于《亚太教育》期刊2015年25期)

唐鸿倩,钟名其,陈洋,杜虹[9](2015)在《琼胶降解菌的筛选及其在龙须菜乙醇发酵中的初步应用》一文中研究指出文章以龙须菜为原料,开展发酵产乙醇的基础研究,主要进行了高效琼胶降解菌的筛选和酶解条件的优化。利用琼胶为唯一碳源筛选出2株琼胶降解能力强的菌株QJ14和Hhjh,通过形态学观察和16s r DNA序列分析,对这两株菌株进行了鉴定,经NCBI数据库比对,确定QJ14为假单胞菌属,Hhjh为白色噬琼胶菌属。用QJ14和Hhjh产生的粗酶液酶解龙须菜酸解糊化液,并对影响酶解效果的因素,如起始p H值、酶解时间、震荡处理、混合酶液比例等进行了优化,结果还原糖产量最高可达29.33 mg/g。通过比较酵母单菌发酵、混合菌发酵与分步酶解发酵,利用顶空气相色谱法(HS-GC法)检测发酵液中乙醇产量,结果表明,酵母单菌发酵和混合菌发酵几乎没有乙醇产生,分步酶解发酵的乙醇产量约为2.36m L/L。(本文来源于《可再生能源》期刊2015年05期)

尹群健,陈潇骁,杨宏胜,林明师,毛欣琪[10](2014)在《琼胶降解菌产酶条件优化、酶学性质和糖代谢途径》一文中研究指出为确定热带海洋环境中琼胶降解菌的最佳产酶条件和最适培养条件,提高其产酶能力,采用3,5-二硝基水杨酸(3,5-Dinitrosalicylic acid,DNS)比色法测酶活,研究其酶学性质并利用高通量测序获得其参加糖代谢的酶。单因素和多因素研究结果表明:FG12的最佳产酶条件为1%蛋白胨、0.8%琼脂、0.02%K2HPO4、pH 7.5、28℃;最适培养条件为0.8%琼脂粉、0.5%蛋白胨、pH 6.8。优化后的酶活达到739.58 U/mL,比优化前提高了273.49%。琼胶酶的最适温度为36℃,在36~55℃之间的热稳定性很好;最适pH值为7.5,在pH为6.5~7.5时,酸碱稳定性较好。高通量测序的代谢图中,FG12中含有多种不同数量的酶参与糖代谢,能通过基因改造提高酶产量。因此,FG12是一株高效琼胶降解菌,为潜在的工程菌。(本文来源于《广东农业科学》期刊2014年09期)

琼胶降解菌论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

海洋是生命的起源地,其中蕴含着丰富的资源,积极开发海洋资源,大力发展蓝色经济,是推动强国战略的重要方面。海洋生物中含有大量可利用的海洋多糖,琼胶是其中重要的组成成分之一,具有广阔的开发应用前景。琼胶降解菌可产生琼胶酶,为实现琼胶多糖的绿色、高效的生物降解提供了有力的工具,受到了广泛关注。本文以琼胶降解菌为主要研究对象,进行一系列研究工作。首先,以分离琼胶降解细菌为出发点,采集威海及日照沿海样品进行海洋微生物的筛选分离,共得到14株潜在新物种和7株琼胶降解菌。对其中的2株海洋新物种O448T和F02T及1株新型琼胶降解菌RQJ05T进行多相分类。经鉴定,菌株0448T呈革兰氏染色阴性、好氧性、无运动性,氧化酶和过氧化氢酶呈阳性,主要的呼吸醌是Q-10,主要的脂肪酸成为是C18:1ω7c,极性脂组成主要有磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油,结合生理生化特征及遗传学特征分析,菌株0448T确定为红杆菌科中的新属新种,命名为沉积物大洋杆菌(Oceanibium sediminis gen.nov.,sp.nov.);菌株F02T细胞呈革兰氏阴性、严格需氧菌,具有运动性和氧化酶与过氧化氢酶活性,主要的呼吸醌是Q-8,主要的脂肪酸成分是C18:11ω7c、C16:1ω7c、C15:o和C18:1ω9c,主要的极性脂组成有磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺和一种未被鉴定的磷脂,结合生理生化特征及遗传学特征分析,确定为--变形菌纲中的新属新种,命名为沉积物海栖杆菌(Maribactrumsediminisgen.nov.,sp.nov.);菌株RQJ05T革兰氏染色阴性、好氧型细菌,有运动性,氧化酶呈阳性但过氧化氢酶呈阴性,主要的呼吸醌是Q-8,主要的脂肪酸成分是Summed Feature 3(C16:1ω71 and/or C16:1ω6c)、C16:0 和 Summed Feature 8(C18:1 ω7c and/or C18:1ω6c),极性脂种类主要有磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油和磷脂,结合生理生化特征及遗传学特征分析,确定为交替单胞菌科中的新属新种,命名为嗜琼胶藻生菌(Algilactibacter agarilytica gen.nov.sp.nov.)。对琼胶降解菌QM202T和RQJ05.T进行基因组测序,对琼胶酶基因进行预测分析,共预测出28条潜在琼胶酶基因,其中菌株QM202T中有4条,RQJ05T中有24条。对预测得到的所有琼胶酶基因进行外源表达,对表达产物进行酶活检测,结果显示共有11个琼胶酶具有琼胶降解活性,其中菌株QM202T中有4个,RQJ05T中有7个。然后用亲和层析的方式成功纯化出重组琼胶酶QM202-1与RQJ05-21。最后对纯化后的重组琼胶酶的结构与酶学性质进行探究,结果显示,琼胶酶QM202-1属于GH50家族,最适反应温度为30-40℃,最适反应pH为7.0,DTT能大幅度增加酶活,降解产物为新琼四糖,比酶活为34.7U/mg。琼胶酶RQJ05-21属于GH16家族,最适反应温度为50℃,最适反应pH为8.0,Co2+、Fe2+、DTT能大幅度增加酶活,具有琼胶降解能力的同时也有一定程度降解淀粉、卡拉胶、海藻酸钠的能力,降解琼胶时比酶活为66.5 U/mg且产物为新琼四糖与新琼六糖。本研究分离并得到多株琼胶降解菌与多条琼胶酶蛋白,为实现琼胶多糖的绿色、高效的生物降解提供了有力的工具。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

琼胶降解菌论文参考文献

[1].谭琳山.具有抗生素耐受性的琼胶降解菌的性质研究[D].广西大学.2019

[2].常亚奇.海洋琼胶降解菌的分离、琼胶酶研究及叁株新菌的鉴定[D].山东大学.2019

[3].狄文婕.红树林沉积物中琼胶降解菌原位富集及琼胶酶基因的挖掘、表达与性质分析[D].国家海洋局第叁海洋研究所.2018

[4].曾鸿俏.琼胶降解菌的筛选与琼胶酶基因克隆[D].海南大学.2017

[5].韩军萍.琼胶降解菌筛选及琼胶酶分离纯化[D].华侨大学.2016

[6].朱磊.产琼胶酶降解菌的筛选及酶的固定化研究[D].大连工业大学.2016

[7].张林林,江玉姬,张龙涛,郑宝东,张怡.一株海洋贝类肠道琼胶降解菌的筛选与鉴定[J].福建农林大学学报(自然科学版).2016

[8].林伯坤,喻玉立,邵军丽,郭莲仙,戴娟秀.琼胶降解菌在卫生检验专业综合实验教学中的应用[J].亚太教育.2015

[9].唐鸿倩,钟名其,陈洋,杜虹.琼胶降解菌的筛选及其在龙须菜乙醇发酵中的初步应用[J].可再生能源.2015

[10].尹群健,陈潇骁,杨宏胜,林明师,毛欣琪.琼胶降解菌产酶条件优化、酶学性质和糖代谢途径[J].广东农业科学.2014

论文知识图

琼胶降解菌的系统发育树分析琼胶降解菌在3种培养基的相对酶活...基因5端序列的染色体步移结果细菌在不同温度、pH、底物浓度培养36h的...株菌胞内外酶活的比较琼胶酶基因的系统发育树分析

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

琼胶降解菌论文_谭琳山
下载Doc文档

猜你喜欢