TGF-β3,HA,PTHrP对人脐带间充质干细胞成软骨分化的影响

TGF-β3,HA,PTHrP对人脐带间充质干细胞成软骨分化的影响

论文摘要

目的探讨TGF-β3、透明质酸(hyaluronic acid, HA)、甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein, PTHrP)对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, HUC-MSCs)成软骨分化的影响,优化培养条件的组合方式。方法体外分离培养人脐带间充质干细胞,形态学观察,流式检测表面抗体及成脂、成骨分化鉴定。取P3代细胞,加入不同组合的细胞因子进行成软骨诱导培养,分为1~21 d TGF-β3(G1)、1~28 d TGF-β3(G2)、1~21 d TGF-β3/1~21 d HA(G3)、1~28 d TGF-β3/1~28 d HA(G4)、1~21 d TGF-β3/1~21 d HA、14~21 d PTHrP(G5)、1~28 d TGF-β3、1~28 d HA、14~28 d PTHrP(G6)、1~28 d TGF-β3、1~28 d HA、21~28 d PTHrP(G7)7组。结果诱导培养28 d和21 d相比较,TGF-β3组和TGFβ3/HA组COL2α1、COL10α1、SOX9、ACAN的表达量上升;TGFβ3/HA/PTHrP组COL2α1、SOX9、ACAN的表达量上升,COL10α1下降。培养相同天数时,TGFβ3/HA组较TGF-β3组COL2α1、SOX9、ACAN的表达量上升;TGFβ3/HA/PTHrP组同TGF-β3/HA组比较,COL2α1、ACAN、SOX9的表达量增加,COL10α1表达量下降,且PTHrP加入2周较1周效果更明显。差异均有统计学意义。HE和阿利新蓝染色结果与实时荧光定量PCR的结果一致。结论 TGF-β3、HA、 PTHrP可以不同程度的促软骨分化,其中联合应用TGF-β3,HA 28 d,在第14天时加入PTHrP一起培养,这种组合方式促进HUC-MSCs成软骨分化效果最好,且能抑制细胞肥大。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 实验材料
  •   1.2 主要试剂与仪器
  •   1.3 实验方法
  •     1.3.1 人脐带间充质干细胞的鉴定
  •     1.3.2 人脐带间充质干细胞成软骨诱导分化
  •     1.3.3 HE染色观察
  •     1.3.4 阿利新蓝染色观察
  •     1.3.5 荧光定量PCR检测
  •   1.4 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 人脐带间充质干细胞的培养及鉴定
  •     2.1.1 人脐带间充质干细胞形态学观察
  •     2.1.2 流式细胞仪检测细胞表面抗原
  •     2.1.3成脂成骨诱导分化能力
  •   2.2 不同细胞因子组合的人脐带间充质干细胞成软骨分化的能力
  •     2.2.1 HE染色
  •     2.2.2 阿利新蓝染色
  •     2.2.3 荧光定量PCR检测基因表达量
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 周晓旭,彭俊,胡海,张映辉,佟明华,顾为望

    关键词: 人脐带间充质干细胞,成软骨分化

    来源: 中国比较医学杂志 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 南方医科大学实验动物中心,南部战区空军医院,五邑大学

    基金: 广东省科技计划项目(2013B060300013,2010A011200003,2016A020208004),国家自然科学基金项目(31271042),国家科技部国际合作项目(2011DFA33290),江门市创新团队项目(2017TD023290),广州市科技计划项目(201704020012),南方医科大学科研启动计划项目(PY2017N032)

    分类号: R329.2

    页码: 26-32

    总页数: 7

    文件大小: 587K

    下载量: 226

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