毒素型论文-王警,张雪寒,郭芸芸,张碧成,吴庆侠

毒素型论文-王警,张雪寒,郭芸芸,张碧成,吴庆侠

导读:本文包含了毒素型论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:猪水肿病,产类志贺毒素大肠杆菌,SLT-Ⅱe,ELISA

毒素型论文文献综述

王警,张雪寒,郭芸芸,张碧成,吴庆侠[1](2019)在《类志贺毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)基因表达及间接ELISA方法的建立》一文中研究指出试验针对产类志贺毒素大肠杆菌SLT-Ⅱe初步建立一种猪水肿病大肠杆菌的血清学检测方法。通过原核表达构建出重组菌pET28a-sumo-SLT-IIe/BL21在IPTG诱导下获得表达,表达产物以包涵体形式产生,使用十二烷基肌氨酸钠(SKL)变性的生化提纯步骤获取有生物学活性的重组蛋白。将提取的SLT-IIe蛋白作为抗原包被ELISA板,初步建立了特异性强的猪水肿病诊断方法,方阵滴定确定抗原最佳包被浓度为2μg/孔,最佳血清稀释浓度是1:25,HRP-羊抗猪二抗的工作浓度1:15 000,5%脱脂奶封闭1h,显色15 min。该方法的建立对猪水肿病流行病学调查以及预防和控制该病的发生有重要意义。(本文来源于《畜牧兽医科学(电子版)》期刊2019年08期)

蔺旭光[2](2018)在《通辽地区犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及产肠毒素型大肠杆菌F41菌毛基因的克隆表达》一文中研究指出通辽是内蒙古自治区的养牛大市,素有“黄牛之乡”的美誉,近些年,随着养牛数量的增加,犊牛腹泻呈现逐年增长的趋势,已严重影响到养牛业的发展。产肠毒素型大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是导致犊牛腹泻的主要致病菌之一,该菌导致犊牛发病且有较高的发病率及死亡率。如何制定有效合理的预防措施及高效安全的疫苗预防犊牛腹泻大肠杆菌病迫在眉睫。本研究通过对通辽市地区从2015年4月年至2017年4月期间的各养殖场及散户进行犊牛腹泻大肠杆菌发病情况调查,并采集样品,对犊牛粪便的致病菌分离纯化。通过生化试验、16S rRNA方法鉴定菌种,并确定其O-抗原血清型。经鉴定共分离致病性大肠杆菌186株,其中O175是通辽本地区优势血清型,因其含有F41菌毛。采用PCR技术扩增分离菌菌毛F41毒力基因,并构建重组质粒pET-28a-F41,转化至BL21中表达F41蛋白,通过Western blotting鉴定该蛋白的反应原性。并通过软件分析菌毛F41生物学特性。结果显示,表达的F41蛋白有较好的反应原性。生物信息学分析可知,F41蛋白为疏水性蛋白,理论等电点为5.02,该蛋白无跨膜螺旋区,处于细胞膜外,亚细胞定位显示分泌信号通路位点占比0.05,为非分泌蛋白,且蛋白具有良好的抗原性及柔韧性。本研究克隆表达的F41蛋白具有良好抗原性,相关生物学分析为今后的疫苗研究提供相应参考依据。(本文来源于《内蒙古民族大学》期刊2018-06-01)

梁娜[3](2018)在《产气荚膜梭菌毒素型菌落多重PCR的应用》一文中研究指出针对产气荚膜梭菌的毒素基因,构建合理的产气荚膜梭菌毒素型菌落模型,并运用多重PCR检测方法,使得产气荚膜梭菌得到更好的扩增,并将产气荚膜梭菌进行有效分型,保证食品更加安全。本文主要分析产气荚膜梭菌毒素型菌落多重PCR的实践应用,希望能够给相关学者起到一定的借鉴作用。(本文来源于《居舍》期刊2018年05期)

张迪,张凯琦,苏维恒,赵元,马馨[4](2017)在《产肠毒素型大肠杆菌腹泻小鼠模型中小肠AQP3和AQP4的表达》一文中研究指出为探讨产肠毒素型大肠杆菌(ETEC)小鼠腹泻模型中小肠水通道蛋白表达量的变化,运用Real time PCR和ELISA分别检测了ETEC腹泻小鼠模型中空肠AQP3和回肠AQP4的基因表达量和蛋白质质量浓度。结果显示,小鼠在感染ETEC产生腹泻后,空肠AQP3和回肠AQP4的基因表达量和蛋白质质量浓度均呈时间依赖性下降。结果提示,ETEC引起腹泻的机制可能与其改变了小肠水通道蛋白的表达有关。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2017年10期)

鲍长磊,付明哲,何亚鹏,白涛,魏拣选[5](2017)在《羊源产气荚膜梭菌不同毒素型多重PCR检测方法的建立及初步应用》一文中研究指出根据GenBank中已发布的产气荚膜梭菌α,β,ε,ι毒素基因序列,设计并合成4对特异性引物,经过优化多重PCR反应条件,建立了检测产气荚膜梭菌不同毒素型多重PCR方法。特异性试验表明,该方法对A,B,C,D,E型产气荚膜梭菌标准菌株均扩增出了相应的目的条带,而对诺维氏梭菌和腐败梭菌扩增为阴性;灵敏性试验表明,该方法对A,B,C,D,E型标准菌株基因组DNA最低检测量分别为9.0,17.8,12.2,13.8,18.5pg;重复性试验表明,该方法有很好的重复性。应用所建立的方法从21份羊临床病料中检测出9株A型和1株C型产气荚膜梭菌。本试验建立的多重PCR方法可以进行产气荚膜梭菌的快速检测及5种毒素型的鉴别。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2017年08期)

孙佳怡,王君玮,王娟,赵建梅,刘鲜鲜[6](2016)在《金黄色葡萄球菌新型肠毒素Ⅰ型蛋白的表达研究》一文中研究指出为了研究金黄色葡萄球菌新型肠毒素Ⅰ型的检测方法,诱导融合表达并纯化金黄色葡萄球菌肠毒素Ⅰ型蛋白,试验根据Gen Bank中SEⅠ的序列设计一对特异性引物,采用PCR技术从金黄色葡萄球菌中扩增出新型肠毒素Ⅰ型基因,亚克隆入p EASY-E1载体中,构建重组质粒p EASY-E1-SEⅠ,以IPTG诱导表达,镍柱纯化表达蛋白,用His标签单克隆抗体进行免疫印迹分析验证融合蛋白的表达。结果表明:成功扩增出SEⅠ基因,片段大小为507 bp,重组质粒高效表达SEⅠ融合蛋白,经SDS-PAGE鉴定成功表达了分子质量约为26 ku的重组蛋白,Western-blot检测表明目的蛋白具有良好的免疫原性。说明表达系统p EASY-E1/BL21能高效表达金黄色葡萄球菌新型肠毒素Ⅰ蛋白。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2016年19期)

滕萍,胡桓嘉,李月体,番玉买,李宏刚[7](2016)在《产肠毒素型大肠杆菌致死白眉长臂猿的病例分析》一文中研究指出1发病情况2014年7月初,德宏州野生动物收容救护中心饲养的4只白眉长臂猿先后出现以腹泻为主的传染病症,自第一例发病开始到最后一例康复,共经历了10d,白眉长臂猿发病率为100%,经过诊治1只死亡,3只痊愈,经对患病白眉长臂猿病症进行分析,发现产肠毒素型大肠杆菌是导致白眉长臂猿死亡的主要原因。在白眉长臂猿发病后,我中心对圈舍进行大规模消毒,中心内其他灵长类未出现类似病症。具体情况如表1所示:(本文来源于《中国畜牧兽医文摘》期刊2016年10期)

马增晖,阚秋霞[8](2016)在《貉产肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定》一文中研究指出大肠埃希菌(E.coli),俗称大肠杆菌,存在于人和动物肠道内。某些血清型可导致腹泻,称为致病性大肠杆菌,产肠毒素型大肠杆菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC)便是其中一种。据报道,ETEC在腹泻病例中的检出率为20%~70%。ETEC是导致人畜腹泻的主要致病菌。病原性大肠杆菌一般以O抗原进行分型。到目前为止,国内外学者已经从不同种类的动物中分离出几十种血清型(本文来源于《当代畜禽养殖业》期刊2016年10期)

宋路,曾晓燕,史凤娟,黄明明,宋小凯[9](2016)在《产志贺毒素大肠杆菌志贺毒素Ⅰ型双抗体夹心ELISA检测方法的建立》一文中研究指出为建立双抗体夹心ELISA法检测产志贺毒素大肠杆菌(STEC)Ⅰ型志贺毒素(Stx1),利用重组Ⅰ型志贺毒素A亚单位(Stx1A)免疫小鼠,制备单克隆抗体,从中筛选出非竞争性的2株单抗,构建双抗体夹心法ELISA检测方法,并对试验样品中的志贺毒素进行检测。结果显示:共获得4株针对Stx1A的单克隆抗体,分别为1H2-G7、2H1-C12、8E7-E6和2F6-F8。当8E7-E6作为包被抗体,而2F6-F8作为检测抗体时,其检测毒素的OD值最高。对样品中的Stx进行检测,表明该方法只有效识别Stx1,对Stx2不识别。结论:成功建立了用于检测Stx1的双抗体夹心ELISA法,为临床上快速诊断STEC感染奠定了基础。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2016年08期)

李伟杰,于建慧,魏财文,蒋桃珍[10](2016)在《产气荚膜梭菌毒素型菌落多重PCR方法的建立及应用》一文中研究指出根据产气荚膜梭菌α、β、ε和ι毒素基因cpa、cpb、etx、iA设计并合成4对特异性引物,建立快速鉴定产气荚膜梭菌毒素型的多重PCR方法。结果显示:产气荚膜梭菌A、B、C、D和E型参考菌株均扩增出相应的片段,而肉毒梭菌、气肿疽梭菌、腐败梭菌、诺维梭菌的扩增均为阴性;将产气荚膜菌株单个菌落稀释100倍,仍能扩增出相应的目的片段。利用此多重PCR方法对16株不同动物来源的产气荚膜梭菌进行分型鉴定,并与毒素中和试验鉴定结果进行比较,结果显示2种方法具有较高的符合率。该方法可有效进行产气荚膜梭菌的快速检测和分型,对产气荚膜梭菌感染与食品安全问题的研究具有参考价值。(本文来源于《西北农业学报》期刊2016年06期)

毒素型论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

通辽是内蒙古自治区的养牛大市,素有“黄牛之乡”的美誉,近些年,随着养牛数量的增加,犊牛腹泻呈现逐年增长的趋势,已严重影响到养牛业的发展。产肠毒素型大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是导致犊牛腹泻的主要致病菌之一,该菌导致犊牛发病且有较高的发病率及死亡率。如何制定有效合理的预防措施及高效安全的疫苗预防犊牛腹泻大肠杆菌病迫在眉睫。本研究通过对通辽市地区从2015年4月年至2017年4月期间的各养殖场及散户进行犊牛腹泻大肠杆菌发病情况调查,并采集样品,对犊牛粪便的致病菌分离纯化。通过生化试验、16S rRNA方法鉴定菌种,并确定其O-抗原血清型。经鉴定共分离致病性大肠杆菌186株,其中O175是通辽本地区优势血清型,因其含有F41菌毛。采用PCR技术扩增分离菌菌毛F41毒力基因,并构建重组质粒pET-28a-F41,转化至BL21中表达F41蛋白,通过Western blotting鉴定该蛋白的反应原性。并通过软件分析菌毛F41生物学特性。结果显示,表达的F41蛋白有较好的反应原性。生物信息学分析可知,F41蛋白为疏水性蛋白,理论等电点为5.02,该蛋白无跨膜螺旋区,处于细胞膜外,亚细胞定位显示分泌信号通路位点占比0.05,为非分泌蛋白,且蛋白具有良好的抗原性及柔韧性。本研究克隆表达的F41蛋白具有良好抗原性,相关生物学分析为今后的疫苗研究提供相应参考依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

毒素型论文参考文献

[1].王警,张雪寒,郭芸芸,张碧成,吴庆侠.类志贺毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)基因表达及间接ELISA方法的建立[J].畜牧兽医科学(电子版).2019

[2].蔺旭光.通辽地区犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及产肠毒素型大肠杆菌F41菌毛基因的克隆表达[D].内蒙古民族大学.2018

[3].梁娜.产气荚膜梭菌毒素型菌落多重PCR的应用[J].居舍.2018

[4].张迪,张凯琦,苏维恒,赵元,马馨.产肠毒素型大肠杆菌腹泻小鼠模型中小肠AQP3和AQP4的表达[J].中国兽医科学.2017

[5].鲍长磊,付明哲,何亚鹏,白涛,魏拣选.羊源产气荚膜梭菌不同毒素型多重PCR检测方法的建立及初步应用[J].中国兽医学报.2017

[6].孙佳怡,王君玮,王娟,赵建梅,刘鲜鲜.金黄色葡萄球菌新型肠毒素Ⅰ型蛋白的表达研究[J].黑龙江畜牧兽医.2016

[7].滕萍,胡桓嘉,李月体,番玉买,李宏刚.产肠毒素型大肠杆菌致死白眉长臂猿的病例分析[J].中国畜牧兽医文摘.2016

[8].马增晖,阚秋霞.貉产肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定[J].当代畜禽养殖业.2016

[9].宋路,曾晓燕,史凤娟,黄明明,宋小凯.产志贺毒素大肠杆菌志贺毒素Ⅰ型双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J].畜牧与兽医.2016

[10].李伟杰,于建慧,魏财文,蒋桃珍.产气荚膜梭菌毒素型菌落多重PCR方法的建立及应用[J].西北农业学报.2016

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