导读:本文包含了免疫金标论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:免疫,试纸,布鲁,胶体,旋毛虫,引物,弧菌。
免疫金标论文文献综述
吴晓芳,韩建康,徐德顺,朱晓娟,陈莉萍[1]（2017）在《交叉引物恒温扩增结合免疫金标方法检测副溶血性弧菌》一文中研究指出目的用交叉引物恒温扩增技术(CPA)结合免疫金标方法快速检测副溶血性弧菌。方法用加热煮沸方法提取菌株和标本的DNA;对CPA方法进行敏感性和特异性检测,并和荧光定量PCR方法进行比较;并用建立的方法对模拟牡蛎样本进行检测。结果该方法 60℃40 min即可完成反应,且敏感性和特异性高,14株副溶血性弧菌检测结果均阳性;最低检测限为1.8 cfu/ml,模拟样本的检测限达到180 cfu/g。与荧光定量PCR检测结果一致。结论该方法具有检测时间短、扩增效率高、灵敏度高、特异性强、操作简单等特点,特别适合在基层实验室和现场快速检测。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2017年02期）
于海波[2]（2016）在《旋毛虫免疫金标单克隆抗体试纸条的研制》一文中研究指出旋毛虫病是世界许多地区重要的食源性寄生虫人畜共患病。人类感染是由于摄取含有感染性旋毛形线虫幼虫的生或半熟肉。在重度感染下,旋毛虫病可能是致命的。从2004年到2009年,人类旋毛虫病爆发15次包括1 387例,死亡4例。所以,旋毛虫病,不仅通过影响患者危害公众健康,而且带来猪动物生产和食品安全的经济问题。旋毛虫病现阶段临床诊断还是主要依靠肌肉活体检测,但是这种检测方法对前期感染者效果甚微,还有这种方法对晚期感染者也存在活性检测率不高的现象。因此,本研究针对旋毛虫病的血清学诊断方法进行了大量研究,其中尤为突出的是胶体金免疫层析法(colloidal gold immunochr-omatographic assay,GICA),这是一种新的免疫学检测技术,相对于其它检测方法更为简便快速,本试验单克隆抗体复苏技术将本教研室的A11和B13两株单抗单抗成功复苏,并且运用间接ELISA方法检测其效价达到1:50 200,然后利用辛酸-饱和硫酸铵法和亲和层析柱联合法纯化单克隆抗体,可以分别用于检测和标记。对ES抗原蛋白进行纯化,采用Western-blot方法对ES抗原蛋白进行分析,结果显示复苏的单克隆抗体可以有效识别ES抗原蛋白且条带单一。上述结果显示本研究得到的ES抗原蛋白具有良好的免疫原性,可以使感染者产生高效且特异性较高的免疫应答。并且对旋毛虫5日龄小鼠肌幼虫的ES抗原蛋白免疫组织化学方法定位发现,在虫体的体内发现有ES抗原蛋白的分布。采用枸橼酸钠法制备20 nm胶体金,外观呈酒红色,透明均匀。可以应用到标记单克隆抗体方面。然后把二抗喷涂在玻璃纤维素膜上构成检测线(T);将金标单抗A11作为检测试剂,喷涂在玻璃纤维膜上。在加样垫处涂抹旋毛虫ES抗原的样品,抗原和金标单抗A11结合为络合物,上移,在T上,络合物中的抗原与二抗结合,因为过量的沉积于T,导致其变红;如果检测样品没有ES抗原不会有红线出现。本试验研究结果表明,旋毛虫ES抗原蛋白可以诱导机体产生良好的免疫反应。本研究以免疫层析法为基础,并且应用抗原—抗体的特性,应用胶体金标记本试验复苏成功的单克隆抗体A11和B13,将其制成试纸条并进行大量检测,达到预期效果。旋毛虫ES抗原可以作为旋毛虫感染早期诊断的抗原,并且这种抗原可以应用到疫苗研发和药物生产方面。同时,也为旋毛虫入侵宿主相关机制的阐明奠定一定的理论基础。(本文来源于《东北农业大学》期刊2016-06-01）
王瑞龙[3]（2015）在《单克隆免疫金标试纸应用于血液中药物筛选的可靠性研究》一文中研究指出目的:1.通过空白添加、动物实验,探索单克隆试纸对血液中苯二氮?类;巴比妥类;毒品类等药(毒)药物筛选的检测阈值及LC-MS/MS确认方法的研究;2.通过实际案例验证单克隆试纸用于血液中苯二氮?类;巴比妥类;毒品类等药(毒)物筛选的可靠性。方法:1.血液用单克隆免疫金标试纸检测前的处理方法的研究通过血液空白添加实验,分析了不同p H值缓冲液条件、不同离心转速以及不同温度下对血液前处理的影响,得到血液中不同药物的检测阈值。2.动物实验,建立血液筛选的检测阈值及检验方法的研究称重,按大鼠的LD50给动物灌胃,在动物血液药物浓度达到最大值时解剖取血液,按照第二部分的血液前处理,使用单克隆免疫金标试纸检测血液药物浓度,结果呈阳性,则减少1/2灌胃剂量,直至单克隆免疫金标试纸呈阴性。这时,阴性结果的前一次阳性灌胃剂量就是现有单克隆免疫金标试纸检测所能达到的最低血液药物浓度。取1m L的动物血液,加9m L乙酸乙酯,振荡,超声5min,离心,取上清液于蒸发皿中,60℃水浴挥干,加1m L的乙腈复溶,有机膜过滤,LC-MS/MS检测分析,得到血液药物浓度。3.通过实际案例验证单克隆免疫金标试纸应用于血液中药物筛选的可靠性研究实际案例的血液经过上述的前处理,使用单克隆免疫金标试纸检测和LC-MS/MS检测验证,得出结果。结果:1.使用单克隆免疫金标试纸对血液进行药(毒)物筛选时,有必要向血液中加入磷酸盐缓冲液,这样能得到较好的检测结果。另外,V(血液):V(磷酸盐缓冲液)=1:1进行等量添加,效果最好。2.使用Sigma 3-30K高速台式冷冻离心机在12000转、4℃条件下离心处理得到的检测限最低,检测效果最好,在条件允许时最好在筛选时选用高速冷冻离心机离心,能够获得最佳结果。但是这种离心机成本高、普及率低,因此,一般使用低速离心机也是可以的。3.磷酸盐缓冲液的p H值对各类药物检测阈值的影响不一致,其中对氯硝安定和氯胺酮的影响较大。4.实际案例。2012-2013年的38个实际案例的LC-MS/MS检验结果与用单克隆免疫金标试纸检测结果相比较,其中的89.47%结果一致。结论:1、用于尿液筛选的单克隆免疫金标试纸在应用于血液检材的筛选时差别不大。2、使用磷酸盐缓冲液稀释血液,用高速冷冻离心机离心,取上清液用于单克隆免疫金标试纸筛选血液能够获得较好的结果。3、根据空白实验结果,在使用单克隆免疫金标试纸筛选血液中苯二氮?类药物时,应注意分别使用p H6-8及p H11两种缓冲液分别稀释血液后进行筛选,以免漏掉氯硝安定这种需要在碱性条件下才能用单克隆免疫金标试纸较好筛选出的药物。4、使用单克隆免疫金标试纸筛选血液中巴比妥类药物时,使用p H6-8的缓冲液稀释血液可以满足检测需要。5、在使用单克隆免疫金标试纸筛选血液中的毒品时,吗啡类、苯丙胺类使用缓冲液p H6-8,均可满足检测要求,但氯胺酮筛选存在较大问题,在p H6-8时,阈值为4000ng/m L,在p H11时,阈值为2000ng/m L,均与试纸厂家说明书上标注的1000ng/m L相差较大。6、根据本课题研究,目前单克隆免疫金标试纸检测药(毒)物的阈值如表5-1,建议厂家对氯胺酮单克隆免疫金标试纸加以改进,以满足实际案件需要。(本文来源于《山西医科大学》期刊2015-05-30）
李月,代震宇,陈觅[4]（2014）在《免疫金标法与化学法检测胃液隐血方法学评价》一文中研究指出目的:浅析免疫金标法(gold immunochromatography assay,GICA)与化学法检测胃液隐血的方法学评价。方法:以我院2012年1月至2013年1月胃液隐血检测的311例患者为研究对象,对其送检的胃液或呕吐物同时行GICA和化学法检查。结果:GICA、化学法的阳性预测率、阴性预测率、诊断符合率分别为64.73%、100.00%、79.74%,70.00%、53.09%、65.59%;两者联合诊断时诊断符合率可达95.38%。结论:GICA的阳性预测值与化学法并无统计学差异,但阴性预测值、诊断符合率明显优于化学法。可通过两法联合诊断来提高检测结果准确性。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2014年12期）
吴斌,张秀云,屈菲,郑勇,苏旺[5]（2014）在《高致病性猪蓝耳病免疫金标试纸条的研制与应用》一文中研究指出本试验利用柠檬酸叁钠还原法制备粒径约为40 nm的胶体金,在玻璃纤维和硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷上胶体金PRRSV多克隆抗体、HP-PRRSV单克隆抗体和羊抗鼠IgG二抗。本试验组装的免疫胶体金诊断试纸条具备良好的敏感性和较高的特异性,最低病毒检测限为100TCID50;只对高致病性猪蓝耳病呈阳性反应,对PRRSV(ATCC VR2332)有弱反应,对猪瘟病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒均无反应。重复性试验表明,所研制的试纸条结果重复性较强,4℃条件下至少可保存半年。应用该试纸条对60份临床样品检测,同时与高致病性蓝耳病RT—PCR诊断试剂盒的方法进行符合性比较验证,结果显示两种方法检测结果的符合率达91%(10/11),证明本研究制备的高致病性猪蓝耳病抗原免疫金标试纸条是快速便捷的检测高致病性猪蓝耳病的新型检测技术。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2014年04期）
张佳,肖啸,蔡秋波,付丽[6]（2014）在《免疫金标试纸检测与PCR试验对昆明地区犬布鲁菌病感染状况调查的对比》一文中研究指出布鲁菌病(brucellosis)是由布鲁菌(Brucella)引起的人畜共患慢性细菌传染病,其特征是生殖器官和胎膜发炎,引起流产、不育和各种组织的局部病灶。本病的易感动物范围很广,但主要是牛、羊、猪[1-3]。在实验室中证实犬也能被感染,但没有病征。患病动物及带菌者(包括野生动物)是主要传染源。最危险的是受感染的妊娠母畜,它们在流产或分娩时将大量布鲁菌随着胎儿、胎水和胎衣排出,流产后的阴道分(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2014年07期）
张佳,杨坚,李正甫,李琳,罗光富[7]（2013）在《免疫金标试纸检测与PCR试验对昆明地区猫布鲁氏杆菌病感染状况调查的对比》一文中研究指出为了解昆明地区猫布鲁氏杆菌病流行的情况,本文采用PCR技术和免疫金标试纸检测布鲁氏杆菌病流行性,以更好地检测和预防布鲁氏杆菌病。本研究主要围绕昆明地区猫的布鲁氏杆菌病的流行分布情况展开实验,采集昆明主城区112只猫的血清作为A组,用免疫金标试纸检测出阳性数有6份,阳性率为5.36%;采集这同一批母猫阴道分泌物或公猫精液作为B组,用PCR检测出阳性数有8份,阳性率为7.14%。按照来源猫的环境进行统计分析可知,流浪猫的感染率远高于家养猫。(本文来源于《上海畜牧兽医通讯》期刊2013年05期）
樊晶,袁玉华[8]（2012）在《ALT免疫金标试纸条研制与应用》一文中研究指出目的应用高特异性的丙氨酸氨基转移酶(ALT)单克隆抗体(已获专利),建立免疫金标法快速检测ALT,为献血员筛查提供快速准确的检测结果.方法采用柠檬酸叁钠还原法制备胶体金,并标记ALT单克隆抗体,按照双抗体夹心法设计试纸条,以ALT多克隆抗体包被硝酸纤维素膜的检测区,在其下端附着胶体金标记的抗ALT单抗,根据胶体金免疫层析原理,用该试纸条建立快速检测人ALT的免疫金标检测法。同时对单抗进行了酶标记,建立了ALT的双抗体夹心ELISA检测方法。再用金标试纸条检测法与ALT生化检测及夹心ELISA法对8份质控标本和50份样品血清进行ALT检测。(本文来源于《中国输血杂志》期刊2012年S1期）
代飞燕,管庆松,项勋,袁雪波,肖啸[9]（2012）在《免疫金标试纸检测与正向间接血凝试验对昆明地区犬弓形虫血清学调查的对比》一文中研究指出为了解昆明地区犬弓形虫的流行情况,采用免疫金标试纸和间接血凝试验(IHA)检测弓形虫的效果差异。实验采集258份血样,离心得到血清,将每1份血清平均分成A、B组,A组用免疫金标试纸检测,B组用正向间接血凝试验检测。结果表明:A组阳性样本血清74份,阳性率为28.68%;B组血清凝集价≥1:64的有68份,阳性率为26.37%。将A组血清样本按照犬来源进行统计分析,结果流浪犬的感染率远高于家养犬。说明昆明地区犬弓形虫普遍存在,免疫金标试纸的敏感性高于正向间接血凝试验的敏感性。(本文来源于《上海畜牧兽医通讯》期刊2012年05期）
李艳[10]（2012）在《免疫金标试纸法与正向间接血凝试验检测猪口蹄疫免疫效果探讨》一文中研究指出当前国内检测猪口蹄疫抗体水平的方法有ELISA法、猪口蹄疫正向间接血凝法和免疫金标试纸法等。前两种方法虽然都具有微量、特异、准确的优点,但需要比较完备的试验仪器和经验丰富的技术人员,且检测时间较长。而免疫金标试纸检测法是新开发的一种全新的猪口蹄疫抗体检测方法,检测一个样品只需8～15min,操作简便、快速、直观,结果容易判定,但其检测结果的准确性尚待验证。鉴于此,为了选择一种切合远安县动物疫病防控实际的(本文来源于《湖北畜牧兽医》期刊2012年09期）
免疫金标论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
旋毛虫病是世界许多地区重要的食源性寄生虫人畜共患病。人类感染是由于摄取含有感染性旋毛形线虫幼虫的生或半熟肉。在重度感染下,旋毛虫病可能是致命的。从2004年到2009年,人类旋毛虫病爆发15次包括1 387例,死亡4例。所以,旋毛虫病,不仅通过影响患者危害公众健康,而且带来猪动物生产和食品安全的经济问题。旋毛虫病现阶段临床诊断还是主要依靠肌肉活体检测,但是这种检测方法对前期感染者效果甚微,还有这种方法对晚期感染者也存在活性检测率不高的现象。因此,本研究针对旋毛虫病的血清学诊断方法进行了大量研究,其中尤为突出的是胶体金免疫层析法(colloidal gold immunochr-omatographic assay,GICA),这是一种新的免疫学检测技术,相对于其它检测方法更为简便快速,本试验单克隆抗体复苏技术将本教研室的A11和B13两株单抗单抗成功复苏,并且运用间接ELISA方法检测其效价达到1:50 200,然后利用辛酸-饱和硫酸铵法和亲和层析柱联合法纯化单克隆抗体,可以分别用于检测和标记。对ES抗原蛋白进行纯化,采用Western-blot方法对ES抗原蛋白进行分析,结果显示复苏的单克隆抗体可以有效识别ES抗原蛋白且条带单一。上述结果显示本研究得到的ES抗原蛋白具有良好的免疫原性,可以使感染者产生高效且特异性较高的免疫应答。并且对旋毛虫5日龄小鼠肌幼虫的ES抗原蛋白免疫组织化学方法定位发现,在虫体的体内发现有ES抗原蛋白的分布。采用枸橼酸钠法制备20 nm胶体金,外观呈酒红色,透明均匀。可以应用到标记单克隆抗体方面。然后把二抗喷涂在玻璃纤维素膜上构成检测线(T);将金标单抗A11作为检测试剂,喷涂在玻璃纤维膜上。在加样垫处涂抹旋毛虫ES抗原的样品,抗原和金标单抗A11结合为络合物,上移,在T上,络合物中的抗原与二抗结合,因为过量的沉积于T,导致其变红;如果检测样品没有ES抗原不会有红线出现。本试验研究结果表明,旋毛虫ES抗原蛋白可以诱导机体产生良好的免疫反应。本研究以免疫层析法为基础,并且应用抗原—抗体的特性,应用胶体金标记本试验复苏成功的单克隆抗体A11和B13,将其制成试纸条并进行大量检测,达到预期效果。旋毛虫ES抗原可以作为旋毛虫感染早期诊断的抗原,并且这种抗原可以应用到疫苗研发和药物生产方面。同时,也为旋毛虫入侵宿主相关机制的阐明奠定一定的理论基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫金标论文参考文献
[1].吴晓芳,韩建康,徐德顺,朱晓娟,陈莉萍.交叉引物恒温扩增结合免疫金标方法检测副溶血性弧菌[J].中国卫生检验杂志.2017
[2].于海波.旋毛虫免疫金标单克隆抗体试纸条的研制[D].东北农业大学.2016
[3].王瑞龙.单克隆免疫金标试纸应用于血液中药物筛选的可靠性研究[D].山西医科大学.2015
[4].李月,代震宇,陈觅.免疫金标法与化学法检测胃液隐血方法学评价[J].重庆医科大学学报.2014
[5].吴斌,张秀云,屈菲,郑勇,苏旺.高致病性猪蓝耳病免疫金标试纸条的研制与应用[J].中国动物检疫.2014
[6].张佳,肖啸,蔡秋波,付丽.免疫金标试纸检测与PCR试验对昆明地区犬布鲁菌病感染状况调查的对比[J].黑龙江畜牧兽医.2014
[7].张佳,杨坚,李正甫,李琳,罗光富.免疫金标试纸检测与PCR试验对昆明地区猫布鲁氏杆菌病感染状况调查的对比[J].上海畜牧兽医通讯.2013
[8].樊晶,袁玉华.ALT免疫金标试纸条研制与应用[J].中国输血杂志.2012
[9].代飞燕,管庆松,项勋,袁雪波,肖啸.免疫金标试纸检测与正向间接血凝试验对昆明地区犬弓形虫血清学调查的对比[J].上海畜牧兽医通讯.2012
[10].李艳.免疫金标试纸法与正向间接血凝试验检测猪口蹄疫免疫效果探讨[J].湖北畜牧兽医.2012
论文知识图
