导读:本文包含了微束激光论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,激光,马铃薯,载体,芽孢,聚糖,蛋白。
微束激光论文文献综述
郑巨云,陈正华,刘桂珍,苏秀娟,曲延英[1]（2008）在《抗虫双价基因表达载体的构建及微束激光转化植物研究》一文中研究指出将苏云金芽孢杆菌伴孢晶体(Bacillus thuringiensis,Bt)蛋白的基因与反枝苋菜凝集素(Amaranthus ret-roflexusagglutinin,ARA)基因构建成双价基因的表达载体,编码一种既能抗鳞翅目害虫,又能抗同翅目蚜虫的杀虫蛋白。把双价基因(Bt-BA)连接到原核表达载体pET28a和植物表达载体pBI121上,经过限制性酶切分析和PCR鉴定,结果表明:含有双价基因的原核和真核重组表达质粒均已构建成功。将该双价基因转入油菜,获得抗性小植株。(本文来源于《激光生物学报》期刊2008年04期）
张楠,陈正华,刘桂珍,陈凌娜,曲延英[2]（2007）在《抗虫杀菌融合基因表达载体的构建及微束激光转化植物研究》一文中研究指出将苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白的基因(Bacillus thuringiesis,简称Bt)通过甘氨酸接头(Gly4Ser)3与一种人工合成的抗菌肽(antimicrobial peptides,AMP)基因与相融合,编码一种新的杀虫,并具有抗菌的蛋白。把融合基因(NAMP-Bt)连接到原核表达载体pET-28a和植物表达载体pBI-121上,经过限制性酶切分析和PCR鉴定,结果表明含有融合基因的原核和真核重组表达质粒均已构建成功,并将该融合基因转入烟草,已获得抗性小植株。(本文来源于《激光生物学报》期刊2007年02期）
郭志鸿,张金文,陈正华,王兰岚[3]（2006）在《利用RNA干涉技术及微束激光转化法培育抗病毒马铃薯》一文中研究指出针对马铃薯生产中危害严重、分布广泛并且具有强烈协生作用的马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒,开展了抗病毒病的育种研究。采用RT-PCR技术分别克隆了267 bp的编码马铃薯X病毒外壳蛋白(PVX-cp)基因的相对保守区段X和294 bp的编码马铃薯Y病毒外壳蛋白(PVY-cp)基因的相对保守区段Y两个片段,将其按顺序连接,形成融合基因XY,然后分别将融合基因XY正向和反向插入到载体pHANN IBAL中,得到了载体pH IV,再用NoⅠt对pH IV进行酶切,将产生的大片段插入到载体pART27中,得到同时以PVX-cp基因和PVY-cp基因为靶标的XY的RNA i载体pAR IV。采用微束激光穿刺转化技术转化马铃薯品种Favorita的愈伤组织,得到了14株表型正常的转基因植株,转基因植株的southern b lot分析表明,导入的外源融合基因拷贝数介于2~4之间。攻毒实验表明,其中11株转基因植株对PVX、PVYo以及PVX和PVYo混合侵染均表现免疫,而其它3株的病毒浓度也低于对照。这一结果将为利用RNA i干涉技术开展植物抗多种病毒病的育种提供重要依据,验证了所构建的RNA干涉(RNA interference RNA i)载体具有良好的功能,同时又一次证明微束激光穿刺法是一种有效的遗传转化手段。(本文来源于《激光生物学报》期刊2006年05期）
王自强,王浩威,席时权,胡赞民,李银妹[4]（2006）在《微束激光基因转移仪的研制》一文中研究指出为生物转基因工作研制一种新的科研仪器。采用激光穿刺技术实现生物外源基因的导入,实现非接触操作。该仪器特点是采用自动控制平台代替传统的手动平台,具有自动扫描功能,其控制参数可以按照生物样品的特异性进行调节,同时可以减轻实验强度和人为因素对实验的影响。由于激光微束在样品选择性等方面的优点,研制成功的设备将有望在多种植物、动物的生物学研究上获得应用,具有良好的应用前景。(本文来源于《自动化仪表》期刊2006年08期）
陈凌娜[5]（2006）在《微束激光介导抗真菌基因转化棉花的研究及抗蚜基因的克隆》一文中研究指出棉花是我国主要的经济作物,在国民经济中具有重要地位。黄萎病是对棉花生产危害最大的世界性病害之一,严重影响了棉花的产量及棉纤维的品质。常规育种方法因抗源缺乏很难培育出抗黄萎病的棉花新品种。本研究用基因工程手段,将激光微束穿刺技术与种质系统转化法结合,成功地将几丁质酶基因和β-1, 3-葡聚糖酶基因导入棉花中,并最终得到了几丁质酶基因整合的转基因植株。转化试验是利用Nd:YAG叁倍频的微束激光,激光波长为0.35μm,输出能量10 mJ,在12.5倍物镜聚焦于欲照射的细胞,光斑直径为4.02μm。进行激光微束穿刺导入几丁质酶基因和β-1, 3-葡聚糖酶基因的双价植物表达载体。分别以棉花感受态萌动种胚和授粉后40-50天的幼胚为受体,将材料预培养48 h后再进行预高渗处理2 h,外源质粒浓度为0.1 mg/ml,转化后进行卡那霉素梯度筛选,将移栽成活的棉花进行总DNA的PCR扩增,有一株同时扩增到了几丁质酶基因和β-1, 3-葡聚糖酶基因的特异片段,另外有四株分别得到了β-1, 3-葡聚糖酶基因和几丁质酶基因的特异片段。对卡那霉素有抗性植株的T1代进行盆栽检测,30株中表现卡那霉素抗性的植株有10株,其中8株在几丁质酶基因的检测中表现出阳性,但相同植株在β-1, 3-葡聚糖酶基因的检测时无目的条带出现。本研究还克隆了植物凝集素基因,以解决棉花蚜虫的危害问题,蚜虫属同翅目昆虫,通过吸取植物韧皮部的汁液造成直接危害,又通过传播植物病害对植物造成间接危害,植物凝集素是一类具有特异糖结合活性的蛋白,在植物基因工程中具有较大的应用潜力。反枝苋(Amaranthus retroflexus L.)生于农田、路边,适应性极强,对高等动物无毒害。苋菜凝集素基因(ARA)全长2453 bp,含有一个1538 bp的内含子和两个分别为212 bp和703 bp的外显子,通过重迭序列设计的引物与聚合酶链反应(PCR)技术,获得了该基因的915 bp编码区克隆片段,避免了通过mRNA反转录合成cDNA而带来的一系列问题,序列分析表明反枝苋凝集素基因与文献报道来自千穗谷苋菜的AHA基因序列有98.8%的同源性。同时设计特异引物,采用PCR扩增的方法,从质粒pBIBGC中克隆到维管束特异表达BSP基因启动子的功能片段,其序列大小为840 bp,其中富含A/T的区域和富含A/T的重复序列,通过序列比对分析与已报道的序列同源性达98.2%。将ARA基因插入到微生物表达载体pET 28a的T7启动子和终止子之间,通过IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳鉴定,得到了36.0 kDa的特异蛋白条带,证明ARA基因的表达产物的分子量与理论推算的相符。构建了具有BSP-ARA-NOS终止子表达单元的植物表达载体pBIBA,采用直接导入法将其导入到农杆菌LBA4404中,得到了含目的质粒的工程菌株。用农杆菌介导法,对烟草叶片进行了遗传转化,并对转基因植株的抗蚜性进行研究。(本文来源于《新疆农业大学》期刊2006-05-01）
陈凌娜,曲延英,王兰岚,张金文,刘桂珍[6]（2006）在《利用微束激光穿刺法将抗真菌基因导入棉花的研究初报》一文中研究指出以棉花感受态萌动种胚作为外源基因转化的受体,用激光微束穿刺法将β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶双价基因导入棉花,所构建的植物表达载体pB IBGC携带有筛选标记npt-Ⅱ(新霉素磷酸转移酶)基因。激光转化处理的种胚经卡那霉素筛选,已经获得抗性小植株。研究了微束激光转化法用于棉花感受态萌动胚转化预培养的时间、高渗液对材料的处理等。研究表明:用微束激光转化处理种胚是一种操作简便、重复性好的转化方法,用该法可将外源基因导入植物感受态萌动胚,避开植株离体再生的困难。(本文来源于《激光生物学报》期刊2006年01期）
傅道林,王兰岚,张海燕,陈正华[7]（2000）在《用微束激光穿刺技术将商陆抗病毒蛋白(PAP)cDNA导入马铃薯的研究》一文中研究指出以马铃薯 (Solanum tuberosum L.)品种“津引 8号”微薯切片作为外植体 ,采用微束激光穿刺技术获得了商陆抗病毒蛋白 (PAP) c DNA的导入、整合与表达 .实验首次利用庆大霉素筛选马铃薯再生苗 ,庆大霉素筛选浓度为 80 mg/ L ,共得到 65株庆大霉素抗性苗 ,全部移栽成活 .PCR扩增和 PCR-Southern杂交分析表明 ,PAP c DNA已经稳定整合到马铃薯基因组 .攻毒实验发现 ,多数转基因植株生长健康 ,对供试病毒 PVX具有高度抗性 .(本文来源于《光子学报》期刊2000年11期）
杨仲毅,王兰岚,宋桂英,徐正平,张丽华[8]（1999）在《利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究》一文中研究指出本文以甘蓝型“双低”油菜新品种Ｈ１６５为实验材料，以子叶柄为外植体，研究了微束激光转化系统中的一些关键因素：如取材时间以播种后４—５天为宜；高渗液预处理２０—４０分钟者最佳；外源ＤＮＡ浓度以０．０５—０．１μｇ／μｌ获得转基因植株最有利等等。已建立一种操作简便，重复性好，并能准确定位于靶体细胞的转化体系。并用这个转化体系成功地将菜豆几丁酶基因导入油菜，并获得转基因植株，经ＰＣＲ扩增检测为阳性，实验结果表明外源菜豆几丁酶基因确已整合到油菜基因组中。(本文来源于《激光生物学报》期刊1999年01期）
付道林,王兰岚[9]（1999）在《微束激光转基因技术研究进展》一文中研究指出本文叙述了激光微速穿刺法导入外源ＤＮＡ的基本原理及其有关影响因素等。利用该转化方法，现已成功地获得了多种动植物细胞外源基因的转化。实验证明，激光微束穿刺转化技术简便有效、重复性好、靶体选择性强，对靶体无损伤等优点。随着转化技术自动化水平的提高。光镊技术的渗透和结合，激光微束转化技术将会得到更广泛的应用(本文来源于《激光生物学报》期刊1999年01期）
杨仲毅,王兰岚,刘志岩,张铁汉,刘桂珍[10]（1998）在《利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究》一文中研究指出利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究杨仲毅王兰岚刘志岩张铁汉刘桂珍陈正华（中国科学院遗传研究所，北京，１００１０１）ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＢｅａｎＣｈｉｔｉｎａｓＧｅｎｅｉｎｔｏＢｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓｂｙＬａｓｅｒＭｉｃｒｏｂ...(本文来源于《激光生物学报》期刊1998年01期）
微束激光论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
将苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白的基因(Bacillus thuringiesis,简称Bt)通过甘氨酸接头(Gly4Ser)3与一种人工合成的抗菌肽(antimicrobial peptides,AMP)基因与相融合,编码一种新的杀虫,并具有抗菌的蛋白。把融合基因(NAMP-Bt)连接到原核表达载体pET-28a和植物表达载体pBI-121上,经过限制性酶切分析和PCR鉴定,结果表明含有融合基因的原核和真核重组表达质粒均已构建成功,并将该融合基因转入烟草,已获得抗性小植株。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
微束激光论文参考文献
[1].郑巨云,陈正华,刘桂珍,苏秀娟,曲延英.抗虫双价基因表达载体的构建及微束激光转化植物研究[J].激光生物学报.2008
[2].张楠,陈正华,刘桂珍,陈凌娜,曲延英.抗虫杀菌融合基因表达载体的构建及微束激光转化植物研究[J].激光生物学报.2007
[3].郭志鸿,张金文,陈正华,王兰岚.利用RNA干涉技术及微束激光转化法培育抗病毒马铃薯[J].激光生物学报.2006
[4].王自强,王浩威,席时权,胡赞民,李银妹.微束激光基因转移仪的研制[J].自动化仪表.2006
[5].陈凌娜.微束激光介导抗真菌基因转化棉花的研究及抗蚜基因的克隆[D].新疆农业大学.2006
[6].陈凌娜,曲延英,王兰岚,张金文,刘桂珍.利用微束激光穿刺法将抗真菌基因导入棉花的研究初报[J].激光生物学报.2006
[7].傅道林,王兰岚,张海燕,陈正华.用微束激光穿刺技术将商陆抗病毒蛋白(PAP)cDNA导入马铃薯的研究[J].光子学报.2000
[8].杨仲毅,王兰岚,宋桂英,徐正平,张丽华.利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究[J].激光生物学报.1999
[9].付道林,王兰岚.微束激光转基因技术研究进展[J].激光生物学报.1999
[10].杨仲毅,王兰岚,刘志岩,张铁汉,刘桂珍.利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究[J].激光生物学报.1998
论文知识图
