导读:本文包含了抑制血小板聚集论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:血小板,内膜,阿司匹林,抑制,酪氨酸,艾灸,莪术。
抑制血小板聚集论文文献综述
郭玉东,胡宇驰,曹春然,王志斌,左泽平[1]（2019）在《复方丹参片体外抑制血小板聚集的生物活性测定法》一文中研究指出本文建立复方丹参片体外抑制血小板聚集的生物活性测定法,量化复方丹参片的药理作用,补充其质量控制方法。以复方丹参片体外抑制家兔血浆血小板聚集作用为实验体系,通过量效关系考察和效价定义,利用量反应平行线法计算效价,建立复方丹参片体外抑制血小板聚集的生物活性测定方法,并进行方法学验证,考察方法的可行性。通过量效关系考察,发现在浓度0.128～0.205 g·mL~(-1)范围内线性良好,并根据效价定义得出复方丹参片标准品效价为7 659 U·g~(-1),方法学考察表明方法可靠,重现性和适用性良好。复方丹参片抑制血小板聚集的生物活性测定法为体外方法,操作简单、方便,测定结果可靠,并能通过效价测定量化了复方丹参片抑制血小板聚集的活性,评价不同批次质量,可以尝试将该方法推广到其质量控制中,为中药质量控制开辟新的途径。(本文来源于《药学学报》期刊2019年12期）
李玉斌[2]（2019）在《刺芒柄花素对大鼠颈动脉球囊损伤抗血小板聚集、抑制内膜增生及其作用机制的研究》一文中研究指出研究背景经皮血管腔内成形术(Percutaneous transluminal angioplasty,PTA)是临床治疗心血管疾病最常用的手段之一,在临床中挽救了很多冠心病、颈动脉狭窄、下肢动脉硬化闭塞症的患者,但是PTA的主要缺点是术后易出现血管弹性回缩和内膜增生造成血管再狭窄(re-stenosis,RS),严重影响患者的远期疗效和生存质量。刺芒柄花素(Formononetin,FMN)是鸡血藤等很多中药材的主要活性成分之一,且在2010版中国药典中被作为鸡血藤的定性指标,其药理活性包括抗肿瘤,清除氧自由基,减少细胞脂质过氧化物,降低胆固醇等。据文献报道,鸡血藤的主要成分刺芒柄花素可能具有抗血小板血小板聚集、抑制血栓血栓形成和抑制内膜增生的作用。在此研究中,我们旨在研究鸡血藤中刺芒柄花素等主要成分的测定及在大鼠体内的药物代谢动力学情况,并研究刺芒柄花素对大鼠颈动脉球囊损伤模型中颈动脉损伤的作用及对血小板聚集作用,同时研究了体内外对颈动脉球囊损伤引起的新生血管内膜形成及PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和迁移能力的影响,并进一步研究了其潜在的作用机制。试验方法第一部分UPLC-MS/MS同时测定大鼠血清中鸡血藤提取物中刺芒柄花素等四种黄酮类化合物方法的建立及药代动力学研究采用临床常用水煎方法,并脱水浓缩制备冻干鸡血藤提取物。鸡血藤水煎3小时,滤液脱水后制成冻干CSE;标准和质量控制样本的准备,混合母液是含有浓缩的原儿茶酸、儿茶酸、没食子儿茶素0.5mg/ml,刺芒柄花素0.8mg/ml的甲醇溶液,按(1:1:1:1,v/v/v/v)进行混合。内标准(芫花素)母液在甲醇为0.5mg/ml。标本准备,采用乙酸乙酯液液萃取法处理血浆样品,选择芫花素作为内标准,利用超高效液相色谱联合质谱分析(Ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法建立血浆样品中原儿茶酸、儿茶酸、没食子儿茶素、刺芒柄花素的分析方法。验证过程:色谱条件和质谱条件优化,选择性和线性范围,精密度和准确度实验,基质效应和提取回收率及稳定性试验。选择SD大鼠作为实验对象,灌胃给予鸡血藤剂量0.638g/kg(等量于0.64mg/kg原儿茶酸,6.73mg/kg儿茶酸,5.17mg/kg没食子儿茶素,1.06mg/kg刺芒柄花素)。鸡血藤提取物灌胃之前和之后的9个时间点分别采取大鼠眶下静脉收集血液样品于肝素化试管中,离心后,储存于-80℃。运用DAS 2.1套装程序,以非室模型分析血药浓度VS时间数据计算出药物代谢动力学参数。第二部分刺芒柄花素在大鼠颈动脉球囊损伤模型中对血管内膜增生和血小板聚集作用研究构建大鼠颈动脉球囊损伤模型,90只大鼠随机分为分为6组,每组15只,分组情况如下:假手术组,模型组,模型给予低中高叁个剂量刺芒柄花素组(刺芒柄花素低剂量组25 mg/Kg,刺芒柄花素中剂量组50 mg/kg,刺芒柄花素高剂量组100 mg/kg),阿司匹林对照组(10 mg/kg)。手术后第二天起开始给药,持续给药2周。Born比浊法测定血小板聚集率;硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(nitric oxide,NO)水平,放射免疫法检测血清中内皮素-1(endothelin l,ET-1)、血栓素A2(Thromboxane A2,TXA2)水平,ELISA检测血清中血小板衍生因子(Platelet derived growth factor,PDGF)、前列环素(Epoprostenol,PGI2)水平;HE观察颈动脉病理变化。第叁部分刺芒柄花素对大鼠颈动脉球囊损伤导致的内膜增生及血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响和机制研究建立大鼠颈动脉球囊损伤模型用于评价刺芒柄花素抑制血管损伤导致的内膜增生的作用。H&E染色进行颈动脉病理学观察。分离培养原代大鼠动脉血管平滑肌细胞SMCs,CCK-8和Transwell实验检测刺芒柄花素对PDGF-BB诱导的SMCs细胞增殖和迁移的作用。免疫组化和免疫细胞化学法分别检测各组动脉组织和原代培养的SMCs细胞中转化生长因子a(Transforming growth factor-a,TGF-a)表达水平。Smad3/p-Smad3表达通过western blotting实验进行分析。实验结果1.UPLC-MS/MS同时测定大鼠血清中鸡血藤提取物中刺芒柄花素等四种黄酮类化合物方法的建立及药代动力学研究UPLC-MS/MS同时测定大鼠血清中鸡血藤四种黄酮类化合物方法的建立及药代动力学数据。在优化色谱分析及质谱分析中,对于阳性和阴性电离模式同时被优化。分析物和内标准的电离,相对给予负离子模式比阳离子模式更多的强烈反应。通过优化,对于所有化合物的测试,0.05%甲酸可以增强离子化的效应,获取得更多比纯蒸馏水。为了获取满意的敏感度和好的峰值形态,我们选取0.05%甲酸和甲醇(35:65,v/v)作为等度洗脱液。原儿茶酸、儿茶酸、没食子儿茶素、刺芒柄花素和内标准的保留时间分别为:1.1,1.1,1.1,2.2和4min。应用乙酸乙酯进行液液萃取最终确定下来,简单和可重复提取并有很好的回收率。在0.5-200ng/ml范围对于原儿茶酸、儿茶酸、没食子儿茶素和0.8-320ng/ml范围刺芒柄花素呈线性。校准曲线的系数(r)对所有的校正曲线>0.99。最低量化下限(LLOQ)定义为信噪比>10,准确度和精确度在±20%范围内。药物代谢动力学研究结果显示AUC0-t价值对于儿茶酸和没食子儿茶素分别为67.52±9.47和63.64±19.37μg h/l。儿茶酸和没食子儿茶素(6.73mg/kg儿茶酸和5.17mg/kg没食子儿茶素)在相同剂量水平时显示有相似的口服吸收率,结果是因为它们具有相似的化学结构。同时也观察到口服没食子儿茶素浓度比刺芒柄花素高5倍时在血清浓度-时间曲线中AUC0-t价值是相似的,表明大鼠对于刺芒柄花素的吸收明显大于没食子儿茶素。本研究结果对于研究鸡血藤提取物的主要成分的作用机制具有重要意义,同时对于中药的药物代谢动力学的研究也提供了有效的工具。2.刺芒柄花素在大鼠颈动脉球囊损伤模型抑制抗血小板聚集和血管内膜增生刺芒柄花素给药显着改善大鼠颈动脉球囊损伤模型中颈动脉血管组织病理学结构改变,缓解内膜增生。与模型组相比,刺芒柄花素显着抑制了血小板聚集,使其PAGmax、IR显着降低,且与模型组存在显着性差异(p<0.05)。与模型组相比,刺芒柄花素剂量组NO、PGI2水平显着升高,且存在显着性差异(p<0.05)。各给药组血清ET-1、TXA2、PDGF水平显着降低,且存在显着性差异(p<0.05)。3.刺芒柄花素通过调节TGF-al/Smad3信号通路抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移保护大鼠颈动脉球囊损伤导致的内膜增生刺芒柄花素显着改善大鼠颈动脉球囊损伤模型血管内膜增生,新生内膜中的平滑肌细胞较模型组明显减少,内皮较完整光滑,内膜增生较轻,抑制新生内膜平滑肌细胞增殖,血管结构变化与模型组相比明显得到改善。刺芒柄花素处理能够抑制PDGF-BB诱导的体外SMCs细胞增殖(p<0.05),降低Transwell迁移试验中穿过小室的细胞数和划痕实验中细胞迁移率(p<0.05)。体内外实验均发现刺芒柄花素能够降低血管平滑肌细胞TGF-a表达水平,并且Smad3表达也能被刺芒柄花素显着抑制。结论1.UPLC-MS/MS测定大鼠血清中鸡血藤四种黄酮类物质的含量,刺芒柄花素大鼠体内吸收率最高,推测刺芒柄花素是鸡血藤抗血小板聚集、抑制内膜增生的主要活性成分。2.刺芒柄花素各剂量组能改善大鼠颈动脉球囊损伤模型血管内膜增生,可显着抑制ADP,胶原、AA诱血小板聚集现象,显着提高血清中NO含量、明显降低ET-1、PDGF水平,纠正TXA2/PGI2失衡,从而达到抗血小板聚集、抑制内膜增生作用。3.体内外实验均证明刺芒柄花素能够显着改善大鼠颈动脉球囊损伤,具体作用机制可能与抑制平滑肌细胞增殖和迁移,调节TGF-al/Smad3信号通路有关,从而缓解球囊损伤诱导的内膜增生。(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-24）
周北斗,王欣,翁智敏,黄堡城,马泽通[3]（2019）在《氧杂蒽酮的合成和抗肿瘤、抑制酪氨酸酶和抑制血小板聚集活性研究（英文）》一文中研究指出在当前的研究中,5个氟取代和3个氯取代的1,3-二羟基氧杂蒽酮(化合物11–18)被一步合成,它们的产率在48%和72%之间。在这8个化合物中,化合物12和15–18被首次报道。化合物1–19的全部或者部分抗肿瘤、抑制酪氨酸酶和抑制血小板聚集的活性被检测。对于某些特定的肿瘤细胞,化合物1–2、4、6–7、10–15和19显示出较好的抑制活性,特别是7位含有2,4-二氟苯基的化合物10显示出较高的抗肿瘤活性。化合物18对酪氨酸酶的抑制率约为22%。在大鼠中,化合物1–3、6、9、12和18–19明显地抑制由二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集。而且,化合物2和3的作用最为显着。这些结果显示化合物1–4、6–7、9–15和19是有希望的先导化合物,可用于进一步结构修饰。(本文来源于《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》期刊2019年04期）
左静,刘虹,李金涛,王学杰,叶锋[4]（2019）在《艾灸联合阿司匹林对老年冠心病患者血小板聚集功能的影响及抑制率分析》一文中研究指出目的分析艾灸联合阿司匹林对老年冠心病患者血小板聚集功能的影响及其抑制率分析。方法收集2016年9月至2018年4月100例老年冠心病患者,随机数字表法分为观察组和对照组。评估心功能治疗效果,观察心功能指标[左心室射血分数(LVEF)、每分输出量(CO)、血浆脑自然肽氨基端前体蛋白(NT-proBNP)],记录2组患者治疗前后二碳酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)诱导血小板聚集率和GMP-140分子数。结果观察组心功能治疗总有效率(90.00%)较对照组(78.00%)高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组LVEF、CO提高,NT-proBNP降低,差异有统计学意义(P<0.05);心率变化差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后对照组心率、NT-proBNP降低,CO、LVEF升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组上述指标均较对照组优,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前2组AA途径、ADP途径下血小板聚集及GMP-140分子数比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后2组A途径、ADP途径下血小板抑制率及GMP-140分子数均降低,且观察组较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论艾灸联合阿司匹林治疗老年冠心病能改善心功能和血小板聚集功能和抑制率,值得推广。(本文来源于《河北医药》期刊2019年07期）
李德山,郭瑞,李帅,贺奇,尹鹤[5]（2019）在《FGF-21对大鼠血小板聚集和活化的抑制作用》一文中研究指出临床上大部分抗血小板药物存在继发性出血等副作用,亟需寻找一种安全有效的抗血小板药物。二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(AA)是介导血小板聚集的主要物质,文章探讨成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)是否抑制ADP或AA诱导大鼠血小板聚集和活化。将大鼠分为正常对照组、正常鼠血小板活化组、阿司匹林干预后血小板活化组、FGF-21高、中、低剂量干预后血小板活化组。给药干预后提取各组血小板,分别用ADP或AA处理,观察处理后血小板聚集情况以及P选择素和血栓素(TXB2)表达水平。与正常对照组相比,正常鼠血小板经ADP或AA处理活化后,血小板聚集率显着升高,血浆中P选择素和TXB2含量明显上升;与正常鼠血小板经ADP或AA处理活化后相比,经阿司匹林和FGF-21干预后分别经ADP或AA处理活化后的血小板聚集率显着下降,血浆中P选择素和TXB2含量显着下降;FGF-21干预组经ADP或AA活化后,血小板聚集率、P选择素和TXB2含量下降水平呈明显剂量依赖性。目前国内外尚未发现FGF-21对血小板聚集与活化作用的相关报道,研究首次证明FGF-21具有抑制ADP和AA诱导血小板聚集和活化作用及明显的抗血凝作用,填补FGF-21在抗血凝研究领域空白,为开发安全有效的抗血凝药物提供理论依据。(本文来源于《东北农业大学学报》期刊2019年03期）
方卉[6]（2019）在《莪术二酮通过调节AMPK参与vinculin/talin介导的整合素信号通路抑制凝血酶诱导的血小板聚集》一文中研究指出当今社会,血栓性疾病的患病人数日益上涨,逐年增高,越发威胁到了人类的生命健康。血栓的定义是血液中的有形成分在器官内膜或者血管壁附着的凝块或者堆积物,引起血管狭窄或阻塞,导致各种器官和脏器缺血和梗死,其临床表现有心脑血管疾病、冠状动脉粥样硬化、肺血栓栓塞等。目前,临床上治疗血栓的药物有很多,通过调控不同的分子途径发挥抗血栓的作用,主要分为抗血小板聚集的药物、干扰凝血的药物和经纤溶酶溶栓的药物等,分别在凝血过程的不同阶段以及血栓形成的不同阶段起着抑制作用,其中医治血栓疾病最普遍是使用抗血小板的药物。但是随着抗血小板药物的广泛运用,其引发的不良反应以及出血事件等,已受到越来越多的关注。因此,探讨血小板活化的病理机制、寻找防治血小板活化的新靶点和开发安全有效的药物是目前亟待解决的问题,对于解决抗血小板药物所引起的安全性问题和预防和治疗血栓性疾病具有十分重要的意义。现代医学研究发现,从温郁金的莪术油中分离出的莪术二酮,是莪术油的一种主要活性成分和常用的中药质量控制指标。长期以来研究发现,用凝血酶作为诱导剂,莪术二酮能够抑制血小板活化和聚集,在研究其作用靶点和具体作用机制时发现莪术二酮抗血小板聚集作用与vinculin/talin介导的整合素(Integrin)信号传导途径有关。不仅如此,文献报道AMPK能够调控凝血酶诱导的血小板活化。那么,AMPK是否参与vinculin/talin介导的整合素(Integrin)信号通路,进而促进血小板聚集,以及莪术二酮的具体抗凝血的作用机制尚不明确,有待进一步研究。目的:以凝血酶为诱导剂,研究莪术二酮是否影响血小板聚集,分别使用western blot和RT-PCR检测AMPK和整合素αIIbβ3信号通路相关蛋白和mRNA的表达水平,使用免疫共沉淀,荧光双染以及微量热泳(MST)的方法研究了vinculin和talin的结合,得以阐明莪术二酮抗血小板聚集的作用机制。方法:采集身体健康,近期未服用药物的志愿者的静脉血,离心,获得PRP,洗涤血小板后将血小板,分组:NS组,凝血酶组,莪术二酮组和替罗非班组。(1)分离和提取莪术二酮:称20 g莪术油,用石油醚-乙酸乙酯混合液梯度洗脱后,上硅胶色谱柱分离,并在石油醚中重结晶,得到纯度>97%的莪术二酮。(2)莪术二酮的纯度和结构分析:使用高效液相色谱(HPLC)法进行莪术二酮的纯度分析,使用~1H和~(13)C NMR光谱进行结构鉴定。(3)血小板聚集率的检测:将生理盐水,替罗非班,不同浓度抑制剂和不同浓度莪术二酮分别加入洗涤血小板中,37℃孵育后上机,再加入0.02 U/mL凝血酶后进行聚集率检测。(4)Talin和vinculin结合域肽段的表达和纯化:根据talin R3亚结构域片段(TD,氨基酸序列795-911)和VD1亚结构域片段(VD,氨基酸序列1-258)的氨基酸序列,进行大肠杆菌密码子优化基因合成,融合蛋白表达,用Chelating(Ni)SFF亲和层析柱对目的蛋白进行富集。(5)Western blot检测蛋白的表达:分别用生理盐水,莪术二酮和替罗非班处理洗涤血小板后,用凝血酶诱导聚集,检测AMPK,vinculin,talin,整合素αIIbβ3蛋白的表达情况。(6)RT-PCR检测mRNA的表达:分别用生理盐水,莪术二酮和替罗非班处理洗涤血小板后,用凝血酶诱导聚集,检测AMPK,vinculin,talin,整合素αIIbβ3的mRNA表达情况。(7)免疫荧光双染检测talin与vinculin结合:免疫荧光双染talin和vinculin,在荧光显微镜下观察,检测talin和vinculin的结合。(8)免疫共沉淀检测talin与vinculin结合:运用双向免疫共沉淀talin和vinculin后,用Western blot进行分析。(9)微量热泳(MST)检测talin与vinculin结合:荧光标记恒定浓度的TD,用不同浓度VD进行滴定,同样的,荧光标记恒定浓度的VD,用不同浓度TD进行滴定,通过观察荧光强度曲线判断蛋白结合情况。结果(1)高效液相的分析结果表明,莪术二酮的纯度>97%。(2)~1H和~(13)C NMR光谱鉴定结构为莪术二醇。(3)血小板聚集率结果表明,莪术二醇处理后的血小板聚集率降低,与阳性药物对照组替罗非班的聚集率结果呈同一趋势。(4)Western blot结果表明,结构域VD和TD片段成功合成。(5)Western blot结果表明,莪术二酮抑制talin和vinculin的蛋白表达,AMPK和整合素αIIbβ3蛋白的磷酸化。(6)RT-PCR结果表明,莪术二酮抑制talin和vinculin的mRNA表达。(7)免疫荧光双染结果表明,在血小板上莪术二酮抑制talin和vinculin的共定位。(8)免疫共沉淀结果表明,莪术二酮抑制了talin和vinculin的结合作用。(9)微量热泳结果表明,莪术二酮抑制了talin和vinculin的结合作用。结论在本研究中我们探寻了凝血酶作为诱导剂,莪术二酮抑制血小板聚集的作用机制,发现莪术二酮通过调节AMPK-vinculin/talin-整合素αIIbβ3信号通路发挥抗血小板聚集的作用,以上结果表明其作为民族药物对于血栓性疾病的防治潜力。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-02-01）
韩正刚[7]（2019）在《安博维联合血小板聚集抑制药治疗慢性肾小球肾炎效果观察》一文中研究指出目的探讨安博维联合血小板聚集抑制药治疗对慢性肾小球肾炎患者的效果,并对联合用药改善血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平的作用机制进行分析。方法选择某院2016年5月至2018年5月收治的慢性肾小球肾炎患者70例。按照治疗方法的不同分为观察组和对照组。对照组口服安博维治疗,观察组给予安博维联合血小板聚集抑制药治疗。观察两组治疗效果。结果观察组总有效率97.1%,对照组总有效率74.3%,观察组高于对照组,P<0.05;两组患者治疗后Scr、BUN水平较治疗前比较明显下降,P<0.05;观察组治疗后Scr、BUN水平低于对照组,组间比较,P <0. 05;两组患者治疗后24 h尿蛋白定量、尿红细胞计数水平较治疗前明显下降,P<0.05;观察组治疗后24 h尿蛋白定量、尿红细胞计数水平低于对照组,组间比较,P<0.05。结论安博维联合血小板聚集抑制药治疗慢性肾小球肾炎能有效改善患者肾功能,降低体内蛋白尿水平,提高治疗效果。(本文来源于《中国疗养医学》期刊2019年02期）
牙甫礼,施译琳,李卿,马百会,王岩[8]（2018）在《辅酶Q_(10)通过调控糖蛋白Ⅵ信号通路抑制血小板聚集和活化》一文中研究指出目的血小板过度活化在血栓以及动脉粥样硬化(AS)的发生发展中发挥重要的作用,糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)是血小板表面重要的受体,在血管损伤处通过与胶原结合介导血小板活化参与血栓以及AS的形成。辅酶Q_(10)(CoQ_(10))作为膳食补充剂通过抗炎、抗氧化等发挥预防心血管疾病的功能,尤其是抗AS作用。但是CoQ_(10)是否影响血小板功能尚未见报道,因此本研究通过体外实验探讨CoQ_(10)对血小板活化的影响及其对GPⅥ信号通路调控作用。方法用不同浓度CoQ_(10)(0、1、10、100μmol/L)与健康人纯化血小板在体外共同孵育50 min,采用血小板聚集仪测定胶原诱导的血小板聚集率;用流式细胞术测定血小板表面CD62P、CD63、α_(Ⅱb)β_3的活化和纤维蛋白原结合率(Fibrinogen binding);用West-ern blot检测胶原诱导的血小板GPⅥ信号通路相关蛋白磷酸化水平。结果 CoQ_(10)可以显着降低胶原诱导的血小板聚集率,抑制血小板表面CD62P和CD63的表达,并能显着抑制αⅡbβ3的活化以及降低Fibrinogen binding百分率。CoQ_(10)下调胶原诱导的GPⅥ信号通路中Syk、LAT、SLP76、PLCγ2以及PKC的磷酸化水平。结论 CoQ_(10)抑制胶原诱导的血小板活化可能是通过下调GPⅥ信号通路来实现。(本文来源于《中国热带医学》期刊2018年12期）
刘娟,丁玲,何翠,陈丹,邓素容[9]（2018）在《阿司匹林抑制血小板聚集行为的叁维形态学分析》一文中研究指出目的:发展一种通过叁维形态学参数评价阿司匹林抑制血小板聚集行为的新方法。方法:将采集的12名健康志愿者枸橼酸钠抗凝外周血均分为二份,一份加入200μmol/L乙酰水杨酸(ASA)处理作为实验组,另一份为对照组,分别对两组血小板进行洗涤纯化。将纯化血小板加入Ⅰ型胶原蛋白修饰的反应池中在静态条件下诱导血小板活化聚集,通过形状测量激光显微系统观察分析形成的血小板聚集体叁维形态。同时,通过光透射浊度法(LTA)分析血小板功能。结果:本技术可在无标记情况下获取血小板聚集体的形貌、高度及叁维形态图像数据,并可量化血小板聚集体的体积参数; ASA处理能明显改变血小板聚集体的叁维形态学特征;与对照组相比,实验组血小板聚集体体积显着降低(t=8. 97,P <0. 01),而横截面积改变不显着(t=1. 94,P> 0. 05)。受试者工作特征曲线(ROC)分析结果显示,血小板聚集体体积截断值为1 395μm3时鉴别ASA抑制功效的灵敏度和特异度分别为91. 7%和75%,其准确度和灵敏度均优于LTA方法测试的聚集度参数。结论:本研究建立的ASA抑制血小板聚集行为的叁维形态学分析方法将为后续研究和临床评价ASA抗血小板聚集效应提供新的分析策略。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2018年06期）
方佳琪[10]（2018）在《问号钩端螺旋体vwa基因产物竞争性抑制vWF/GPIbα介导血小板聚集引发出血机制》一文中研究指出背景:致病性钩端螺旋体(Leptospira,以下简称钩体)引起的钩体病(leptospirosis)是全球性流行的人畜共患传染病。出血和黄疸是钩体病典型的病理特征,但钩体病出血机制迄今不明。人血管性假血友病因子(von Willebtand factor,vWF)是重要的凝血因子,该因子与血小板膜糖蛋白-Ib的α亚基(GPIbα)结合后启动血小板聚集过程。致病性问号钩体(L.interrogans)基因种(genospecies)黄疸出血群赖型赖株vwa-Ⅰ与vwa-Ⅱ基因产物被注释为含vWF-A结构域的蛋白,但其在钩体病出血过程的作用及其机制未见研究报道。研究目的:阐明问号钩体黄疸出血群赖型赖株vwa-Ⅰ与vwa-Ⅱ基因重组产物(rLep-vWA-Ⅰ和rLep-vWA-Ⅱ)具有与人血小板和GPIbα的强结合能力,但不能激活血小板聚集信号通路;确定rLep-vWA-Ⅰ或rLep-vWA-Ⅱ能够导致小鼠体内出血;确定钩体vwa-Ⅰ与vwa-Ⅱ基因重组产物与人GPIbα的结合基序。材料和方法:采用流式细胞术、表面等离子共振(SPR)和等温滴定量热法(ITC)分别检测rLep-vWA-Ⅰ和rLep-vWA-Ⅱ与人血小板及其GPIbα的结合能力。采用生物发光血小板凝集测定仪检测rLep-vWA-Ⅰ和rLep-vWA-Ⅱ诱导人血小板聚集情况。采用Western Blot检测rLep-vWA-Ⅰ或rLep-vWA-Ⅱ作用人血小板后血小板聚集相关PI3K/AKT-ERK和PLC-PKC信号通路激酶磷酸化水平。采用定位突变联合SPR或ITC检测rLep-vWA-Ⅰ和rLep-vWA-Ⅱ中与人重组GPIbα(rHu-GPIbα)的结合位点。采用HE染色检测注射rLep-vWA-Ⅰ或rLepvWA-Ⅱ的C3H/HeJ和C57BL/6小鼠肺、肝、肾组织标本中出血情况。结果:rLep-vWA-Ⅰ和rLep-vWA-Ⅱ能与81.7%～94.7%人血小板结合,但该结合可被rLepvWA-I-IgG和rLep-vWA-Ⅱ-IgG阻断。SPR和ITC结果显示,rLep-vWA-Ⅰ和rLep-vWA-Ⅱ能与rHu-GPIbα高亲和力结合,其K_D为3.87×10~(-7)-8.65×10~(-8) M。rLep-vWA-Ⅰ和rLep-vWA-Ⅱ不能诱导人血小板聚集,但可阻断人重组vWF(rHu-vWF)和协同因子瑞斯托霉素(ristocetin)诱导的血小板体外聚集。rLep-vWA-Ⅰ和rLep-vWA-Ⅱ作用后人血小板聚集相关信号通路激酶AKT、ERK、PLC和PKC磷酸化水平无显着改变。Lep-vWA-Ⅰ中G13、G47、R36和LepvWA-Ⅱ中G76、Q126突变后,与rHu-GPIbα结合能力以及抑制Hu-rvWF/ristocetin介导血小板聚集的作用显着下降甚至消失。静脉注射rLep-vWA-Ⅰ或rLep-vWA-Ⅱ后,C3H/HeJ和C57BL/6小鼠肺和肾组织均分别出现严重的弥漫性出血和局灶性出血。结论:问号钩体vwa-Ⅰ和vwa-Ⅱ基因产物能与vWF竞争性结合血小板GPIbα阻断vWF介导的人血小板聚集,从而导致钩体病人出血。(本文来源于《浙江省免疫学会第六次会员代表大会暨第十一次学术大会论文汇编》期刊2018-11-16）
抑制血小板聚集论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景经皮血管腔内成形术(Percutaneous transluminal angioplasty,PTA)是临床治疗心血管疾病最常用的手段之一,在临床中挽救了很多冠心病、颈动脉狭窄、下肢动脉硬化闭塞症的患者,但是PTA的主要缺点是术后易出现血管弹性回缩和内膜增生造成血管再狭窄(re-stenosis,RS),严重影响患者的远期疗效和生存质量。刺芒柄花素(Formononetin,FMN)是鸡血藤等很多中药材的主要活性成分之一,且在2010版中国药典中被作为鸡血藤的定性指标,其药理活性包括抗肿瘤,清除氧自由基,减少细胞脂质过氧化物,降低胆固醇等。据文献报道,鸡血藤的主要成分刺芒柄花素可能具有抗血小板血小板聚集、抑制血栓血栓形成和抑制内膜增生的作用。在此研究中,我们旨在研究鸡血藤中刺芒柄花素等主要成分的测定及在大鼠体内的药物代谢动力学情况,并研究刺芒柄花素对大鼠颈动脉球囊损伤模型中颈动脉损伤的作用及对血小板聚集作用,同时研究了体内外对颈动脉球囊损伤引起的新生血管内膜形成及PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和迁移能力的影响,并进一步研究了其潜在的作用机制。试验方法第一部分UPLC-MS/MS同时测定大鼠血清中鸡血藤提取物中刺芒柄花素等四种黄酮类化合物方法的建立及药代动力学研究采用临床常用水煎方法,并脱水浓缩制备冻干鸡血藤提取物。鸡血藤水煎3小时,滤液脱水后制成冻干CSE;标准和质量控制样本的准备,混合母液是含有浓缩的原儿茶酸、儿茶酸、没食子儿茶素0.5mg/ml,刺芒柄花素0.8mg/ml的甲醇溶液,按(1:1:1:1,v/v/v/v)进行混合。内标准(芫花素)母液在甲醇为0.5mg/ml。标本准备,采用乙酸乙酯液液萃取法处理血浆样品,选择芫花素作为内标准,利用超高效液相色谱联合质谱分析(Ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法建立血浆样品中原儿茶酸、儿茶酸、没食子儿茶素、刺芒柄花素的分析方法。验证过程:色谱条件和质谱条件优化,选择性和线性范围,精密度和准确度实验,基质效应和提取回收率及稳定性试验。选择SD大鼠作为实验对象,灌胃给予鸡血藤剂量0.638g/kg(等量于0.64mg/kg原儿茶酸,6.73mg/kg儿茶酸,5.17mg/kg没食子儿茶素,1.06mg/kg刺芒柄花素)。鸡血藤提取物灌胃之前和之后的9个时间点分别采取大鼠眶下静脉收集血液样品于肝素化试管中,离心后,储存于-80℃。运用DAS 2.1套装程序,以非室模型分析血药浓度VS时间数据计算出药物代谢动力学参数。第二部分刺芒柄花素在大鼠颈动脉球囊损伤模型中对血管内膜增生和血小板聚集作用研究构建大鼠颈动脉球囊损伤模型,90只大鼠随机分为分为6组,每组15只,分组情况如下:假手术组,模型组,模型给予低中高叁个剂量刺芒柄花素组(刺芒柄花素低剂量组25 mg/Kg,刺芒柄花素中剂量组50 mg/kg,刺芒柄花素高剂量组100 mg/kg),阿司匹林对照组(10 mg/kg)。手术后第二天起开始给药,持续给药2周。Born比浊法测定血小板聚集率;硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(nitric oxide,NO)水平,放射免疫法检测血清中内皮素-1(endothelin l,ET-1)、血栓素A2(Thromboxane A2,TXA2)水平,ELISA检测血清中血小板衍生因子(Platelet derived growth factor,PDGF)、前列环素(Epoprostenol,PGI2)水平;HE观察颈动脉病理变化。第叁部分刺芒柄花素对大鼠颈动脉球囊损伤导致的内膜增生及血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响和机制研究建立大鼠颈动脉球囊损伤模型用于评价刺芒柄花素抑制血管损伤导致的内膜增生的作用。H&E染色进行颈动脉病理学观察。分离培养原代大鼠动脉血管平滑肌细胞SMCs,CCK-8和Transwell实验检测刺芒柄花素对PDGF-BB诱导的SMCs细胞增殖和迁移的作用。免疫组化和免疫细胞化学法分别检测各组动脉组织和原代培养的SMCs细胞中转化生长因子a(Transforming growth factor-a,TGF-a)表达水平。Smad3/p-Smad3表达通过western blotting实验进行分析。实验结果1.UPLC-MS/MS同时测定大鼠血清中鸡血藤提取物中刺芒柄花素等四种黄酮类化合物方法的建立及药代动力学研究UPLC-MS/MS同时测定大鼠血清中鸡血藤四种黄酮类化合物方法的建立及药代动力学数据。在优化色谱分析及质谱分析中,对于阳性和阴性电离模式同时被优化。分析物和内标准的电离,相对给予负离子模式比阳离子模式更多的强烈反应。通过优化,对于所有化合物的测试,0.05%甲酸可以增强离子化的效应,获取得更多比纯蒸馏水。为了获取满意的敏感度和好的峰值形态,我们选取0.05%甲酸和甲醇(35:65,v/v)作为等度洗脱液。原儿茶酸、儿茶酸、没食子儿茶素、刺芒柄花素和内标准的保留时间分别为:1.1,1.1,1.1,2.2和4min。应用乙酸乙酯进行液液萃取最终确定下来,简单和可重复提取并有很好的回收率。在0.5-200ng/ml范围对于原儿茶酸、儿茶酸、没食子儿茶素和0.8-320ng/ml范围刺芒柄花素呈线性。校准曲线的系数(r)对所有的校正曲线>0.99。最低量化下限(LLOQ)定义为信噪比>10,准确度和精确度在±20%范围内。药物代谢动力学研究结果显示AUC0-t价值对于儿茶酸和没食子儿茶素分别为67.52±9.47和63.64±19.37μg h/l。儿茶酸和没食子儿茶素(6.73mg/kg儿茶酸和5.17mg/kg没食子儿茶素)在相同剂量水平时显示有相似的口服吸收率,结果是因为它们具有相似的化学结构。同时也观察到口服没食子儿茶素浓度比刺芒柄花素高5倍时在血清浓度-时间曲线中AUC0-t价值是相似的,表明大鼠对于刺芒柄花素的吸收明显大于没食子儿茶素。本研究结果对于研究鸡血藤提取物的主要成分的作用机制具有重要意义,同时对于中药的药物代谢动力学的研究也提供了有效的工具。2.刺芒柄花素在大鼠颈动脉球囊损伤模型抑制抗血小板聚集和血管内膜增生刺芒柄花素给药显着改善大鼠颈动脉球囊损伤模型中颈动脉血管组织病理学结构改变,缓解内膜增生。与模型组相比,刺芒柄花素显着抑制了血小板聚集,使其PAGmax、IR显着降低,且与模型组存在显着性差异(p<0.05)。与模型组相比,刺芒柄花素剂量组NO、PGI2水平显着升高,且存在显着性差异(p<0.05)。各给药组血清ET-1、TXA2、PDGF水平显着降低,且存在显着性差异(p<0.05)。3.刺芒柄花素通过调节TGF-al/Smad3信号通路抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移保护大鼠颈动脉球囊损伤导致的内膜增生刺芒柄花素显着改善大鼠颈动脉球囊损伤模型血管内膜增生,新生内膜中的平滑肌细胞较模型组明显减少,内皮较完整光滑,内膜增生较轻,抑制新生内膜平滑肌细胞增殖,血管结构变化与模型组相比明显得到改善。刺芒柄花素处理能够抑制PDGF-BB诱导的体外SMCs细胞增殖(p<0.05),降低Transwell迁移试验中穿过小室的细胞数和划痕实验中细胞迁移率(p<0.05)。体内外实验均发现刺芒柄花素能够降低血管平滑肌细胞TGF-a表达水平,并且Smad3表达也能被刺芒柄花素显着抑制。结论1.UPLC-MS/MS测定大鼠血清中鸡血藤四种黄酮类物质的含量,刺芒柄花素大鼠体内吸收率最高,推测刺芒柄花素是鸡血藤抗血小板聚集、抑制内膜增生的主要活性成分。2.刺芒柄花素各剂量组能改善大鼠颈动脉球囊损伤模型血管内膜增生,可显着抑制ADP,胶原、AA诱血小板聚集现象,显着提高血清中NO含量、明显降低ET-1、PDGF水平,纠正TXA2/PGI2失衡,从而达到抗血小板聚集、抑制内膜增生作用。3.体内外实验均证明刺芒柄花素能够显着改善大鼠颈动脉球囊损伤,具体作用机制可能与抑制平滑肌细胞增殖和迁移,调节TGF-al/Smad3信号通路有关,从而缓解球囊损伤诱导的内膜增生。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抑制血小板聚集论文参考文献
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