具杀菌活性的磷脂酶A2mRNA在大鼠体内的分布以及它们的基因和氨基酸顺序的分析

具杀菌活性的磷脂酶A2mRNA在大鼠体内的分布以及它们的基因和氨基酸顺序的分析

苏启表[1]2003年在《具杀菌活性的磷脂酶A_2 mRNA在大鼠体内的分布以及它们的基因和氨基酸顺序的分析》文中认为目的 全面探讨血小板型磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2) mRNA在正常大鼠体内的分布情况,增加对血小板型PLA2的认识。方法 从大鼠不同器官和组织的匀浆中提取总RNA,合成cDNA第一链,利用PCR扩增大鼠血小板型PLA2 DNA,再经2%琼脂糖凝胶电泳检测。结果 在30种器官和组织中,除唾液腺和胰腺之外,都能检测到血小板型PLA2 mRNA,其中,在肺、腹主动脉、下腔腹静脉、血液、肠道、胸腺、骨髓、膀胱和子宫中含量尤为丰富。结论 血小板型PLA2 mRNA广泛分布在大鼠的各个器官和组织中,它可以广泛参与抗菌活动,在防御细菌感染的过程中起重要作用。

李艳[2]2004年在《人基因重组血小板型磷脂酶A_2体外杀菌活性及作用机制的研究》文中进行了进一步梳理[目的]:探讨人基因重组血小板型磷脂酶A_2(Phospholipase A_2,PLA_2)的体外杀菌活性及作用机制,为开发新型抗菌药物提供重要信息。 [方法]:我们从体外杀菌活性、影响杀菌活性的因素、与抗生素相互作用,杀菌机制等几个方面探讨。1、杀菌活性测定:将不同浓度的血小板型PLA_2与细菌在37℃共同孵育2h,然后加入营养琼脂平皿中,37℃培养18-20h,计每一琼脂板上的菌落形成数(CFU),计算出血小板型PLA_2杀菌率;根据耐药性诱导实验,用PLA_2诱导金黄色葡萄球菌(简称金葡菌),观察细菌耐药性。2、对血小板型PLA_2杀菌活性的影响因素(pH,血清白蛋白、细菌浓度、ca~(2+)、Mg~(2+)、肝素)进行测定。3、将血小板型PLA_2和抗菌药分别单独以及联合作用于金黄色葡萄球菌,通过测定细菌菌落数来评价杀菌效果。4、应用电子显微镜观察金葡菌经PLA_2作用后的形态变化;观察不同生长时期金葡菌的对血小板型PLA_2杀菌作用的敏感性;通过菌落计数法测定血小板型PLA_2对金葡菌的抗生素后效应(PAE)。 [结果]:1.血小板型PLA_2对金葡菌、枯草杆菌、炭疽杆菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌等革兰氏阳性(G~+)菌有较强杀菌作用,作用2h的PLA_2最低杀菌浓度(MBC)范围在6~200ng/ml之间。对大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌等革兰氏阴性(G~-)则需要较高浓度的血小 广西医科大学2001级硕士研究生学位论文3板型PLAZ,作用2h的MBC为20一55p留ml。血小板型PLA:对耐甲氧西林金葡菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌、粪肠球菌耐药菌株等G+耐药菌株的杀菌作用也较强,Zh的MBC为1 00一3 00ng/ml。2.血小板型pLA:杀菌活性受培养液pH值影响,当pH为5.0、7.4及9.0时,80n留ml血小板型PLAZ杀菌率分别为44.4%、9 9.8%和99.5%。PLA:易与血清白蛋白结合,杀菌活性受其影响。PLA:的杀菌浓度随着细菌浓度的增加而增高。1一sm五江c扩+适于PLA:发挥杀菌活性。EGTA、肝素、MgCI:可明显抑制血小板型PLAZ杀菌作用,smM EGTA、IOmM MgCI:及0.03U/ml肝素的杀菌抑制率达100%。3.青霉素、头抱拉定、磷霉素、万古霉素增强血小板型PLA:杀菌活性;红霉素、克林霉素减弱血小板型PLA:杀菌活性;氧氟沙星、阿米卡星对血小板型PLA:杀菌作用无影响。4.电镜下观察金葡菌经血小板型PLA:作用30一6Omin,细菌细胞壁和细胞膜出现裂口和分离,120min能见到有部份细菌完全破裂。对数生长期的细菌对PLA:较敏感。血小板型PLAZ有着明显的pAE,160ng/mlpLA:作用金葡菌lh的pAE为6h,32Ong/mlpLAZ的PAE>24h。I结论】:1.血小板型PLA:对G+菌及其耐药菌均有较强的杀菌作用。2.血小板型PLA:杀菌活性受pH值、血清白蛋白、细菌浓度的影响。3.血小板型PLA:与具破坏细胞壁功能的杀菌类药物有协同作用,与抑菌类药物合用受到拮抗。4.C扩+、正电荷性、细菌细胞壁的结构及其生长状态是血小板 型PLA:发挥杀菌活性的重要因素。5.血小板型PLA:对金葡菌有着明显的 PA玉;。

参考文献:

[1]. 具杀菌活性的磷脂酶A_2 mRNA在大鼠体内的分布以及它们的基因和氨基酸顺序的分析[D]. 苏启表. 广西医科大学. 2003

[2]. 人基因重组血小板型磷脂酶A_2体外杀菌活性及作用机制的研究[D]. 李艳. 广西医科大学. 2004

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具杀菌活性的磷脂酶A2mRNA在大鼠体内的分布以及它们的基因和氨基酸顺序的分析
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