导读:本文包含了培养心肌细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:心肌,细胞,利多,内质网,阿霉素,培养液,基因芯片。
培养心肌细胞论文文献综述
邝美丹,陈海霞,廖静,何汶俊,陈奕霖[1]（2019）在《新生大鼠右心室心肌细胞的原代培养及鉴定》一文中研究指出目的:建立一种简便、重复性好的新生大鼠右心室心肌细胞原代培养方法,为右心疾病及肺循环右心相关研究提供可靠的细胞工具。方法:采用出生1～3 d无特定病原体级,SD新生大鼠12只,无菌操作开胸取心脏后,在体视显微镜下分离右心室,用胰蛋白酶与Ⅱ型胶原酶联合消化法消化右心室心肌组织,差速贴壁法纯化右心室心肌细胞。用0.4%台盼蓝染色检测右心室心肌细胞存活率,在倒置显微镜下观察右心室心肌细胞的生长特点并记录细胞搏动频率。利用cTnT对右心室心肌细胞进行免疫荧光染色鉴定细胞纯度。结果:采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶联合消化右心室心肌组织及差速贴壁法分离所得右心室心肌细胞存活率为(94.96±2.13)%。培养的心肌细胞24 h大部分贴壁并伸出伪足,少数细胞出现自发性搏动;48 h后细胞基本全部贴壁,伪足延长,出现局部同步化搏动;72 h后细胞伪足继续延长并形成细胞簇,搏动基本同步化;96 h后细胞连接成片,呈现完全同步化搏动,搏动频率为(121.2±10.7)次/min。用cTnT染色培养的细胞纯度达(96.71±2.66)%。结论:体视显微镜下分离右心室结合复合酶消化法能成功培养出纯度高、功能较好的新生SD大鼠右心室心肌细胞。(本文来源于《心肺血管病杂志》期刊2019年09期）
李攀阳,王凌霄,高丽,赵婷婷,宋爽[2]（2019）在《心肌细胞培养进展》一文中研究指出为进一步提高我国心血管疾病的治疗效果和研究效果,医学界已经加强了对心肌细胞的培养工作,也广泛应用在我国心血管疾病防治研究领域。对于相关科学研究进展来说,成功培养心肌细胞对其具有重要的影响,而且目前经济细胞培养的技术也得到了广泛关注。现如今,国内外对于培养心肌细胞的研究比较多,本文主要针对心肌细胞培养进展进行了分析和探讨。(本文来源于《现代养生》期刊2019年16期）
梁杰玲[3]（2019）在《一种简单高效的原代心肌细胞分离培养方法及毛郁金抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的活性成分研究》一文中研究指出目的:对新生SD大鼠原代心肌细胞(NRCMs)的分离培养方法进行改良,建立简单高效的NRCMs分离技术,为心血管疾病药物活性筛选提供模型和技术新方法;建立心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型,并进行NRCMs对药物的活力反应检测;应用所建立的模型研究毛郁金对H/R损伤心肌细胞起保护作用的活性成分。方法:(1)新生大鼠心室肌先用0.06%胰蛋白酶消化,接着应用不同的消化酶进行消化:0.06%胰蛋白酶消化(I);0.08%胶原酶II(II);0.06%胰蛋白酶和0.08%胶原酶II逐步消化(III);与方法III相同的消化步骤(IV);直至组织块完全消失后,加入完全培养基使消化终止,将细胞悬液过100μm BD塞除去组织絮状物;前叁种消化方法(I,II,III),分别在400 g下离心10 min;方法IV过滤后的细胞悬液直接差速贴壁培养,不经过离心步骤。用台盼蓝染色法检测分离的细胞数量和存活率;倒置显微镜下连续15天观察记录各组细胞形态学和自发性搏动率的变化;共聚焦免疫荧光法评估各组NRCMs的纯度。(2)应用氮气避氧法建立上述方法I~IV的NRCMs和H9c2心肌细胞的H/R损伤模型,平行对照实验测定这些模型心肌细胞对毛郁金乙酸乙酯部位的活力反应,以进一步验证改良分离NRCMs方法(IV)的可靠性。(3)MTT法检测毛郁金各部位抗心肌细胞H/R损伤的活性,借助试剂盒检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、一氧化氮(NO)的含量以及细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,以说明各部位抗心肌细胞H/R损伤的作用机理。(4)应用MTT法对抗心肌细胞H/R损伤活性最佳部分的化合物进行活性筛选。结果:胰蛋白酶和胶原酶II逐步消化直接培养法(IV)在细胞形态学、自发性搏动率、对药物活性反应结果没有显着性差异,但其细胞存活率、细胞纯度比传统单一胰蛋白酶消化法(I)更具有优势(p<0.05);毛郁金乙酸乙酯部位、正丁醇部位、70%乙醇提取物各浓度均可显着提高NRCMs和H9c2心肌细胞H/R损伤后的存活率并呈现良好的剂量依赖关系,可以显着降低H/R损伤后心肌细胞的LDH、AST、MDA、NO的含量(p<0.05),提高SOD的含量(p<0.05);毛郁金各部位抗心肌细胞H/R损伤活性作用大小排序为:乙酸乙酯部位>正丁醇部位>70%乙醇提取物>石油醚部位>水层部位;前期从乙酸乙酯部位中分离提取得到的化合物CAW-2(Curcumol)、CAW-5(Methylzdoarondiol)、CAL-1(aromaticain A)、CAL-2(aromaticain B)、姜黄素可显着提高心肌细胞H/R损伤后的存活率,并表现出良好的剂量依赖性(p<0.05)。结论:胰蛋白酶和胶原酶II逐步消化直接培养法(IV)得到的细胞形态学变化稳定、自发性搏动率良好、纯度高、反应性好,是一种简单方便、省时高效、稳定分离原代心肌细胞的可靠的方法;毛郁金70%乙醇提取物、乙酸乙酯部分、正丁醇部位对H/R损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,且乙酸乙酯萃取物呈现出强的活性作用并具有良好的剂量依赖性,其主要作用机制可能与清除细胞氧自由基、减少胞内脂质过氧化物产生、稳定细胞膜系统以及抑制NO生成或释放从而抑制细胞凋亡有关;从毛郁金乙酸乙酯部位分离得到的化合物CAW-2、CAW-5、CAL-1、CAL-2、吉马酮以及姜黄素有良好的抗心肌细胞H/R损伤活性。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
唐艳,邓苏辛[4]（2019）在《晚期内皮祖细胞条件培养液对阿霉素诱导的心肌细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的观察晚期内皮祖细胞条件培养液对阿霉素诱导心肌细胞凋亡的影响。方法分离培养并鉴定内皮祖细胞和心肌细胞,制作晚期内皮祖细胞条件培养液以及阿霉素诱导的心肌细胞凋亡模型,实验分3组:对照组、模型组及实验组。Hoechest33342/PI及Annexin-FIFC/PI双染法检测各组心肌细胞凋亡率。MTT法检测心肌细胞存活率。qRT-PCR以及Western Blot法检测心肌细胞中脑钠肽(BNP)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA及蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组的心肌细胞凋亡率升高,与模型组相比,实验组的心肌细胞凋亡率下降,差异均有统计学意义(P <0.05)。与对照组相比,模型组的BNP的mRNA及蛋白的表达均下调,TGF-β1的mRNA及蛋白的表达上调,与模型组相比,实验组的BNP的mRNA及蛋白的表达均上调,TGF-β1的mRNA及蛋白的表达均下调,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论晚期内皮祖细胞条件培养液抑制了阿霉素诱导的心肌细胞凋亡,其可能是通过抑制TGF-β1及上调BNP的表达所实现的。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2019年08期）
姜爱侠,冀天基,文德重,石林,李奋[5]（2019）在《Methocult M3534培养基培养小鼠c-kit~+心脏干细胞向心肌细胞和窦房结细胞分化的结果观察》一文中研究指出目的观察Methocult M3534(简写为M3534)培养基培养小鼠c-kit~+心脏干细胞(CSCs)向心肌细胞与窦房结细胞分化的结果。方法首先测定成年小鼠c-kit~+CSCs的自我增殖能力和多向分化潜能,然后置于CSCs常规培养基(对照组)或含1%M3534的培养基(M3534组)中培养。培养2周或3周后分别通过RT-PCR、细胞免疫荧光染色检测心肌细胞特异标记物(Gata4、cTnI、Serca2a和α-SA)和窦房结细胞特异标记物(Hcn2、Hcn4、Gata6、Tbx3、Tbx5和Cx45)的基因和蛋白;应用Western blotting法检测两组中Serca2α、Hcn4、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-Erk)和总细胞外调节蛋白激酶(t-Erk)蛋白(检测Erk信号通路在细胞分化中的作用),并比较。结果分离纯化的c-kit~+ CSCs具有自我增殖和多向分化能力。培养3周时,与对照组比较,M3534组c-kit~+CSCs心肌细胞特异标记物Gata4、cTnI、Serca2a和α-SA基因表达升高,Serca2α、α-SA阳性细胞率升高(P均<0.05);M3534组上述心肌细胞特异标记物培养3周高于培养2周时(P均<0.05)。培养3周时,与对照组比较,M3534组c-kit~+ CSCs窦房结细胞特异标记物Hcn2、Hcn4、Gata6、Tbx3、Tbx5和Cx45基因表达升高,Hcn4阳性细胞率升高(P均<0.05);M3534组上述窦房结细胞特异标记物培养3周高于培养2周时((P均<0.05)。培养3周时,与对照组比较,M3534组Serca2α、HCN4蛋白表达及p-Erk1/2/t-Erk1/2升高(P均<0.05);M3534组培养2周时Serca2α、HCN4蛋白表达及p-Erk1/2/t-Erk1/2高于培养3周时(P均<0.05)。结论与CSCs常规培养基比较,M3534培养基培养的c-kit~+CSCs向心肌细胞和窦房结细胞分化的效能更高,分化过程中可能有Erk通路参与。(本文来源于《山东医药》期刊2019年09期）
李源,夏中元,雷少青,苏娃婷,施思[6]（2019）在《利多卡因预处理通过影响时钟基因BMAL1改善甲基乙二醛培养的H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤》一文中研究指出目的:用甲基乙二醛培养的H9C2心肌细胞进行利多卡因预处理后进行缺氧/复氧(H/R)处理,探究利多卡因预处理是否通过影响时钟基因BMAL1改善甲基乙二醛培养的H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤。方法:将H9C2细胞培养分为4组:即正常对照(N)组、甲基乙二醛(MGO)组、MGO+H/R组、MGO+H/R+LP组(缺氧/复氧前培养液中加入利多卡因20μmol/L)。收集各组细胞,用CCK-8法测定细胞活力;收集细胞培养上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;超声破碎收集细胞匀浆测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性;流式细胞术测定细胞凋亡率;Western Blot测定BMAL1表达。结果:与N组相比,其余各组CCK-8检测细胞活性降低,LDH检测乳酸脱氢酶漏出量增多,SOD活性降低(P<0. 01),凋亡率增高(P<0. 01),BMAL1表达降低,与MGO组比较,MGO+H/R组CCK-8检测细胞活性降低,LDH漏出量增多,SOD活性降低(P<0. 01),凋亡率增高(P<0. 01),BMAL1表达降低(P<0. 01),MGO+H/R+LP组以上指标降低不明显。结论:利多卡因预处理可能通过上调时钟基因BMAL1蛋白表达,以改善甲基乙二醛培养的H9C2心肌细胞缺氧/复氧后的细胞损伤。(本文来源于《武汉大学学报(医学版)》期刊2019年02期）
王佳南,林建安,杜苗苗[7]（2018）在《乳鼠心肌细胞原代培养方法的再改良》一文中研究指出目的探求优化的原代培养乳鼠心肌细胞方法。方法 2017年6月1日—2017年6月2日选取泉州市医学高等专科学校提供6只出生24 h内Wistar乳鼠,采用2种不同消化心肌组织的方法,对照组予0.125%胰酶+0.05%I型胶原酶+0.1%Ⅱ型胶原酶逐次消化心肌组织;试验组予0.05%I型胶原酶+0.1%Ⅱ型胶原酶消化数次后再单予0.125%胰酶快速消化心肌组织;比较两组取得的心肌细胞数量以及存活率,免疫荧光测肌钙蛋白鉴定纯度。结果 2种方法均得到心肌细胞数量多[对照组(103.3±4.4),试验组(105.8±5.0)],差异无统计学意义(t=-0.911,P=0.384);细胞即刻存活率试验组明显高于对照组,试验组达91.87%,对照组即刻存活率仅68.07%,差异有统计学意义(χ~2=81.0,P=0.025)。试验组存活率明显高于对照组。结论再改良方法提取心肌细胞,可获得存活率高、活力好的心肌细胞。(本文来源于《中外医疗》期刊2018年33期）
朱宁,张征,李良同,李少春,刘莉[8]（2018）在《牛磺酸干预对高糖培养H9c2心肌细胞的保护效应与机制》一文中研究指出为研究与分析牛磺酸干预对高糖培养H9c2心肌细胞的保护效应及其具体机制。通过将复苏的H9c2心肌细胞传至3～4代,分为以下叁组:(1)对照组(CN):葡萄糖浓度为5. 5 mmol/L;(2)高糖组(HG):葡萄糖浓度为25. 5 mmol/L;(3)牛磺酸干预组(TAU):HG组基础上,加终浓度为40 mmol/L的牛磺酸。48 h后收集细胞,采用Annexin-V/碘化丙啶(propidine iodide,PI)结合流式细胞仪检测心肌细胞凋亡发生情况,Western Blot检测丝裂原活化蛋白激酶p38 MAPK的蛋白表达,放射免疫法检测TNF-α表达量,并采用相关试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果显示:与CN组相比较,HG组H9c2心肌细胞经高糖培养48 h后细胞凋亡率增加(P <0. 001),细胞TNF-α、MDA显着水平升高(P <0. 001),SOD水平降低(P <0. 001),胞内磷酸化p38水平亦升高(P <0. 001);加入牛磺酸干预后,与HG组比较,TAU组细胞凋亡率减小(P <0. 01),细胞TNF-α、MDA及磷酸化p38蛋白水平明显降低(P <0. 05),SOD水平升高(P <0. 01)。可见牛磺酸能够减轻高糖刺激下H9c2心肌细胞的凋亡,其机制可能通过上调SOD水平,下调TNF-α、MDA水平,降低胞内p38磷酸化来实现对高糖细胞损伤的保护效应。(本文来源于《科学技术与工程》期刊2018年32期）
许菲,程仙,王秀芝,周芳,张海峰[9]（2018）在《心肌淀粉样变人血清对培养心肌细胞基因表达谱的影响》一文中研究指出目的:利用基因表达谱芯片技术筛选正常人血清和心肌淀粉样变患者血清干预培养心肌细胞的差异表达基因,以探讨淀粉样变心肌病发病的可能机制。方法:通过将分离的血清稀释10倍后干预培养SD乳鼠心肌细胞建立模型,采用CCK-8检测各组细胞活性抑制程度,基因表达谱芯片技术筛选两组大鼠差异表达基因,采用实时定量PCR验证相关基因表达量。结果:CCK-8显示与正常control组相比,阴性对照组细胞存活率略有下降,但无统计学意义。与control组相比,实验组细胞存活率明显下降至约70%(P<0.05)。基因芯片分析显示,患者血清实验组及正常血清对照组两组相比,差异表达的基因有869条,其中上调基因710条,下调基因159条。实验组中胶原形成相关基因Col1a1、Col3a1、Col5a2、Col6a1、Col6a2、Col6a3,促纤维形成相关基因Lama1、Itga4、Vwf、Mmp14的表达均明显上调(P<0.05);影响血管重建相关基因Angptl4、Asb4、Cited1表达下调(P<0.05)。经RT-PCR验证,结果一致。结论:心肌淀粉样变患者血清干预影响培养心肌细胞的活性,促进胶原纤维形成并影响血管重建。淀粉样变心肌病的病理机制涉及多个基因,其中基质纤维化、血管重建受阻对淀粉样变心肌病的发生发展起着至关重要的作用,其具体机制还有待进一步研究。(本文来源于《临床心血管病杂志》期刊2018年06期）
毛拓华,刘丹,李竞,高凌,张庆[10]（2018）在《利拉鲁肽对高糖培养的H9c2心肌细胞氧化应激和内质网应激的影响》一文中研究指出目的:探讨利拉鲁肽对高糖培养的H9c2心肌细胞氧化应激和内质网应激的影响。方法:在H9c2细胞的高糖培养液中加入利拉鲁肽(LIRA)、活性氧簇分子(ROS)清除药N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理24 h,用流式细胞术检测细胞的ROS水平,用Western blot的方法检测H9c2细胞内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达水平。结果:与正常糖对照组比较,高糖组细胞内的ROS含量、GRP78和CHOP的蛋白表达水平显着上升(P<0.01)。与高糖组比较,利拉鲁肽显着抑制了细胞内的ROS产生(P<0.01),降低了GRP78和CHOP的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:利拉鲁肽能抑制高糖培养的H9c2细胞的氧化应激和内质网应激水平。(本文来源于《中国药师》期刊2018年06期）
培养心肌细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为进一步提高我国心血管疾病的治疗效果和研究效果,医学界已经加强了对心肌细胞的培养工作,也广泛应用在我国心血管疾病防治研究领域。对于相关科学研究进展来说,成功培养心肌细胞对其具有重要的影响,而且目前经济细胞培养的技术也得到了广泛关注。现如今,国内外对于培养心肌细胞的研究比较多,本文主要针对心肌细胞培养进展进行了分析和探讨。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
培养心肌细胞论文参考文献
[1].邝美丹,陈海霞,廖静,何汶俊,陈奕霖.新生大鼠右心室心肌细胞的原代培养及鉴定[J].心肺血管病杂志.2019
[2].李攀阳,王凌霄,高丽,赵婷婷,宋爽.心肌细胞培养进展[J].现代养生.2019
[3].梁杰玲.一种简单高效的原代心肌细胞分离培养方法及毛郁金抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的活性成分研究[D].广西医科大学.2019
[4].唐艳,邓苏辛.晚期内皮祖细胞条件培养液对阿霉素诱导的心肌细胞凋亡的影响[J].实用医学杂志.2019
[5].姜爱侠,冀天基,文德重,石林,李奋.MethocultM3534培养基培养小鼠c-kit~+心脏干细胞向心肌细胞和窦房结细胞分化的结果观察[J].山东医药.2019
[6].李源,夏中元,雷少青,苏娃婷,施思.利多卡因预处理通过影响时钟基因BMAL1改善甲基乙二醛培养的H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤[J].武汉大学学报(医学版).2019
[7].王佳南,林建安,杜苗苗.乳鼠心肌细胞原代培养方法的再改良[J].中外医疗.2018
[8].朱宁,张征,李良同,李少春,刘莉.牛磺酸干预对高糖培养H9c2心肌细胞的保护效应与机制[J].科学技术与工程.2018
[9].许菲,程仙,王秀芝,周芳,张海峰.心肌淀粉样变人血清对培养心肌细胞基因表达谱的影响[J].临床心血管病杂志.2018
[10].毛拓华,刘丹,李竞,高凌,张庆.利拉鲁肽对高糖培养的H9c2心肌细胞氧化应激和内质网应激的影响[J].中国药师.2018
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