导读:本文包含了地中海拟无枝菌酸菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:地中海,霉素,基因,磷酸,放线菌,硝酸盐,柠檬酸。
地中海拟无枝菌酸菌论文文献综述
张巧巧,金哲男,金红星[1]（2018）在《筛选地中海拟无枝酸菌无痕基因敲除菌株的简便方法》一文中研究指出将抗生素抗性基因作为标记筛选无痕基因敲除菌株比较费时,因而建立筛选无痕基因敲除菌株的简便方法。通过敲除茄红素生物合成途径中第一个反应的酶编码基因dxs(1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶基因),获得白色地中海拟无枝酸菌突变菌株,以此菌株为受体菌,对S-丙二酰转移酶基因(mtf)进行无痕敲除。针对菌落本身携带颜色的地中海拟无枝酸菌(橘红色),利用茄红素合成酶基因dxs无痕敲除获得了白色菌株,在此基础上进行mtf的无痕敲除。以茄红素生物合成途径中任意一个反应的酶编码基因作为标记,很容易筛选得到无痕基因敲除的突变菌株。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2018年04期）
何思雨,成文玉,金红星[2]（2017）在《S-丙二酰转移酶基因失活对地中海拟无枝酸菌产利福霉素的影响》一文中研究指出为提高利福霉素的产量,构建了S-丙二酰转移酶基因失活的地中海拟无枝酸菌。利用融合PCR构建S-丙二酰转移酶基因的同源重组载体,通过电击转化导入到地中海拟无枝酸菌中,使之发生同源重组,以安普霉素为标记,筛选了S-丙二酰转移酶基因失活菌株,并对比了突变菌株与原始菌株的利福霉素SV产量。成功构建了S-丙二酰转移酶基因的同源重组载体,获得了地中海拟无枝酸菌突变株A.mediterranei △fab D,失活菌株的利福霉素SV产量为168.08 mg/L,比原始菌提高了9.94%。S-丙二酰转移酶基因的失活,弱化了突变菌株脂肪酸的合成,强化了利福霉素的合成。(本文来源于《生物技术通报》期刊2017年08期）
何思雨[3]（2017）在《fabD和aceA基因失活对地中海拟无枝酸菌产利福霉素的影响》一文中研究指出利福霉素是一类安莎(ansamycins)大环内酯类抗生素,主要应用于治疗由结核分枝杆菌引起的结核病。地中海拟无枝酸菌是利福霉素的产生菌,基因调控策略是提高利福霉素生物合成的有效方法之一。为此,本论文以利福霉素工业生产菌—地中海拟无枝酸菌为研究对象,探究了基因失活菌株的构建方法,为构建工业高产菌株提供可行性依据。S-丙二酰转移酶能够将丙二酰CoA的酰基转移到酰基载体蛋白(ACP),形成丙二酰ACP和游离CoA-SH,是脂肪酸途径中关键的蛋白酶之一。丙二酰CoA是脂肪酸和利福霉素合成的共同前体物质,为探究S-丙二酰转移酶对利福霉素的影响,本论文通过融合PCR技术构建了带有安普霉素抗性的自杀型基因失活同源重组载体,并优化了融合PCR的条件。用电击转化法将失活同源重组载体导入地中海拟无枝酸菌中,经过基因同源重组,获得了S-丙二酰转移酶基因失活的突变菌株,利用高效液相色谱(HPLC)检测发酵液中利福霉素的产量,相比原始菌提高了9.9%。为探究异柠檬酸裂解酶对地中海无枝酸菌产利福霉素的影响,通过融合PCR技术构建了带抗性标记的异柠檬酸裂解酶基因的同源重组载体,利用电转化导入地中海拟无枝酸菌,得到异柠檬酸裂解酶基因失活菌株。利用重迭延伸PCR构建了无抗性的同源重组载体,再进行电转化获得异柠檬酸裂解酶基因敲除菌株。利用HPLC检测发酵液中利福霉素的产量,相比原始菌降低了26.0%。(本文来源于《河北工业大学》期刊2017-05-01）
李浩琰[4]（2016）在《地中海拟无枝酸菌6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因敲除的研究》一文中研究指出目前,利福霉素作为治疗结核病和麻风病的重要抗生素,主要是依赖地中海拟无枝酸菌发酵生产。随着近些年人类社会中结核病的再次爆发,利福霉素类衍生物的需求越来越大。传统依赖诱变育种的方法提高菌株产量已经不能满足当下需求。为此,本文利用基因工程手段,探究了地中海拟无枝酸菌基因失活的构建方法,为构建工业高产菌主奠定基础。为了方便对地中海拟无枝酸菌进行基因改造,本文构建了适用于地中海拟无枝酸菌的叁亲杂交接合转移体系,增加了一种将外源基因导入地中海拟无枝酸菌的基因操作方法。以构建的诱导型接合质粒pULVK1-Am-OriT为研究载体,考察了受体菌生长状况,叁种亲本菌的混合比例以及孵育培养的时间等因素对接合转移频率的影响。结果表明当受体菌OD_(600)为0.7;叁种菌的混合比例,供体菌:辅助菌:受体菌为1:1:1.5;混合菌后孵育时间为20 h。接合转移频率最高,可达到7.3×10~(-7)。本文以不能在地中海拟无枝酸菌中复制的质粒pMD102为基本框架,通过酶切、连接插入了6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因前后同源臂,分别构建了带有抗性标记和没有抗性标记的基因失活载体。利用同源重组的方法,通过电转化将载体导入到地中海拟无枝酸菌中逐步筛选出突变株,并通过PCR验证,最终得到敲除了6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因的地中海拟无枝酸菌突变株XGYY△G6PDH。(本文来源于《河北工业大学》期刊2016-05-01）
樊菲,成文玉,金红星[5]（2015）在《产利福霉素地中海拟无枝酸菌的电转化条件优化》一文中研究指出目的为了获得较高的地中海拟无枝酸菌的转化率,进行了电转化条件的优化。方法以大肠埃希菌-拟无枝酸菌穿梭质粒p ULVK1-Am为载体,地中海拟无枝酸菌为受体菌,考察了收集菌体时期、细胞壁弱化方式、电击缓冲液和电击参数等因素对转化率的影响。结果以0.1μg/m L氨苄西林处理细胞,A600为0.7~0.8时收集菌体,用溶菌酶-Li Ac-DTT溶液于37℃孵育30min,去离子水作电击缓冲液,7.5k V/cm、25μF、750W下进行电击,转化率最高可达到9.23×104CFU/μg质粒DNA。结论只有将不同机制的3种细胞壁弱化剂组合起来对拟无枝酸菌进行处理时,才能得到较高的转化率。(本文来源于《中国抗生素杂志》期刊2015年08期）
邵志会,赵维,王颖,丁晓明,王金[6]（2015）在《地中海拟无枝酸菌“硝酸盐效应”的研究进展》一文中研究指出地中海拟无枝酸菌"硝酸盐效应"是指发酵基质中的硝酸盐在一定浓度下大幅度促进该菌合成利福霉素,并对初级代谢产生多种影响的现象。针对该效应,本实验室开展了多年的研究,阐明硝酸盐主要通过两个方面促进利福霉素的生物合成:一方面,硝酸盐增加利福霉素生物合成前体的供给(如UDP-葡萄糖、AHBA、丙二酰Co A以及甲基丙二酰Co A等),尤其是通过抑制体内脂肪酸的合成来保障利福霉素前体丙二酰Co A的供给;另一方面,硝酸盐提升利福霉素生物合成酶基因的表达。因此,在充足的利福霉素前体和合成酶系的协同效应下,菌体生成大量的利福霉素。进一步的工作将围绕"硝酸盐效应"的信号分子、信号转导途径以及相关基因的表达调控和翻译后修饰机制等方面展开。(本文来源于《生物工程学报》期刊2015年06期）
王明艳,何璟[7]（2014）在《地中海拟无枝酸菌S699电转化方法的优化》一文中研究指出地中海拟无枝酸菌S699(Amycolatopsis mediterranei S699)能够产生具有重要经济价值的抗生素———利福霉素B。在该菌株中建立高效的遗传操作系统是研究利福霉素生物合成机制以及构建基因工程高产菌株的基础。研究利用单因素试验探索了供体质粒的构型、甘氨酸溶度、MgCl2浓度及电转化参数对地中海拟无枝酸菌S699电转化效率的影响。结果表明,使用添加了0.05 g/L甘氨酸和2.5 mmol/L MgCl2的34%YEME培养基培养菌丝体,在9 kV/cm、25μF、550Ω的电转化条件下,以双链DNA为供体,转化效率最高可达到3.37×102个转化子/μg DNA。利用优化后的电转化方法,成功地获得了利福霉素生物合成基因簇中细胞色素P450氧化酶基因orf5的同源缺失突变菌株,证实了优化后的电转化方法可以很好地用于后期遗传学及利福霉素生物合成基因的研究。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2014年04期）
邓鹏飞,周峰,李长军,陈雄,黄亚男[8]（2013）在《锌离子影响地中海拟无枝酸菌合成有机酸和利福霉素SV》一文中研究指出在10L发酵罐培养地中海拟无枝酸菌过程中基料添加Zn2+(终浓度0.75mg/L)对利福霉素SV效价和有机酸合成产生了显着影响。72h~141h胞外丙酮酸、丙氨酸浓度分别比对照提高了19.7%~93.72%和降低了37.69%~59.55%;同时,胞外谷氨酸、赖氨酸和苯丙氨酸的浓度分别比对照提高了7.62%~162.59%、1.99%~43.10%和25.84%~92.89%。胞外酪氨酸浓度(72h~120h)与对照差异不大,之后迅速提高,141h时酪氨酸浓度是对照组的2.56倍。利福霉素SV的效价在96h比对照提高了11.72%,120h时效价提高了9.1%;141h时效价仅比对照提高了3.5%。说明锌离子抑制了丙氨酸脱氢酶活性并引起丙酮酸积累,这使得丙酮酸流入叁羧酸循环的碳通量增大,使由草酰乙酸衍生的赖氨酸和由α-酮戊二酸衍生的谷氨酸合成量增大,促进了利福霉素SV的合成。但是,丙酮酸的积累也促进了芳环氨基酸的合成(如酪氨酸、苯丙氨酸),其会协同抑制利福霉素的芳环前体3-氨基-5-羟基-苯甲酸的合成,这可能是效价中后期增长放缓的原因。(本文来源于《中国酿造》期刊2013年08期）
王金,邵志会,赵国屏,焦瑞身[9]（2008）在《地中海拟无枝菌酸菌(Amycolatopsis mediterranei)U32氮代谢调控的研究进展》一文中研究指出为探索A.mediterranei U32中硝酸盐全局性效应的分子机制,本实验室相继克隆了氮同化相关的基因,如同化型硝酸还原酶基因簇(nas)、谷氨酰胺合酶基因(glnA)和丙氨酸脱氢酶基因(ald),以及编码全局性氮代谢调控蛋白GlnR的结构基因。研究发现,GlnR不仅正调控glnA的转录,也负调控ald的转录。通过比较glnA和ald基因启动子被保护的顺式DNA序列,证明了GlnR是通过结合16bp的GlnR Box进行正调控或者负调控:在glnA的(本文来源于《2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集》期刊2008-11-07）
王颖,王金,俞浩,赵国屏,焦瑞身[10]（2008）在《地中海拟无枝菌酸菌(Aycolatopsis mediterranei)U32磷酸转移系统(PstS)功能的鉴定》一文中研究指出地中海拟无枝菌酸菌U32编码磷酸转移系统(Pst,phosphate-specific transporter)的基因依次为pstS、pstC、pstA、pstB,位于glnR基因下游。转录分析表明,从glnR基因起始的转录能通读到pstB基因,而pstS基因前有约500 bp的非蛋白编码区,含有pst操纵子(operon)的启动子。因pstS编码周质空间磷酸盐结合蛋白,不仅是Pst系统中磷酸盐转运的第一步,更重要的是参与对外界无机磷浓度的感知及对PhoR活性的调控,在整个Pst系统中起到重要(本文来源于《2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集》期刊2008-11-07）
地中海拟无枝菌酸菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为提高利福霉素的产量,构建了S-丙二酰转移酶基因失活的地中海拟无枝酸菌。利用融合PCR构建S-丙二酰转移酶基因的同源重组载体,通过电击转化导入到地中海拟无枝酸菌中,使之发生同源重组,以安普霉素为标记,筛选了S-丙二酰转移酶基因失活菌株,并对比了突变菌株与原始菌株的利福霉素SV产量。成功构建了S-丙二酰转移酶基因的同源重组载体,获得了地中海拟无枝酸菌突变株A.mediterranei △fab D,失活菌株的利福霉素SV产量为168.08 mg/L,比原始菌提高了9.94%。S-丙二酰转移酶基因的失活,弱化了突变菌株脂肪酸的合成,强化了利福霉素的合成。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
地中海拟无枝菌酸菌论文参考文献
[1].张巧巧,金哲男,金红星.筛选地中海拟无枝酸菌无痕基因敲除菌株的简便方法[J].微生物学杂志.2018
[2].何思雨,成文玉,金红星.S-丙二酰转移酶基因失活对地中海拟无枝酸菌产利福霉素的影响[J].生物技术通报.2017
[3].何思雨.fabD和aceA基因失活对地中海拟无枝酸菌产利福霉素的影响[D].河北工业大学.2017
[4].李浩琰.地中海拟无枝酸菌6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因敲除的研究[D].河北工业大学.2016
[5].樊菲,成文玉,金红星.产利福霉素地中海拟无枝酸菌的电转化条件优化[J].中国抗生素杂志.2015
[6].邵志会,赵维,王颖,丁晓明,王金.地中海拟无枝酸菌“硝酸盐效应”的研究进展[J].生物工程学报.2015
[7].王明艳,何璟.地中海拟无枝酸菌S699电转化方法的优化[J].湖北农业科学.2014
[8].邓鹏飞,周峰,李长军,陈雄,黄亚男.锌离子影响地中海拟无枝酸菌合成有机酸和利福霉素SV[J].中国酿造.2013
[9].王金,邵志会,赵国屏,焦瑞身.地中海拟无枝菌酸菌(Amycolatopsismediterranei)U32氮代谢调控的研究进展[C].2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集.2008
[10].王颖,王金,俞浩,赵国屏,焦瑞身.地中海拟无枝菌酸菌(Aycolatopsismediterranei)U32磷酸转移系统(PstS)功能的鉴定[C].2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集.2008
论文知识图
