乏氧环境下益气养精方对肺癌细胞apelin分子表达的影响

乏氧环境下益气养精方对肺癌细胞apelin分子表达的影响

论文摘要

目的观察益气养精方对乏氧微环境下肺癌细胞中具有促进细胞增殖侵袭及血管形成的apelin/APJ信号通路的影响。方法 CoCl2加入培养基模拟乏氧微环境,实验分组为乏氧组、常氧益气养精方组、乏氧益气养精方组及空白对照组,分别作用于人肺癌细胞株A549和H1975。采用CCK-8法和Transwell实验观察各组细胞的增殖、侵袭能力,RT-qPCR、Western Blot方法观察apelin/APJ信号通路相关因子VEGF、HIF-1α、PI3K等在各组干预细胞中的mRNA和蛋白表达。结果 CCK-8实验测得,缺氧环境能促进肺癌细胞增殖,益气养精方作用于A549、H1975的IC50分别为为1 mg·mL-1和0.5 mg·mL-1,且在常氧和缺氧微环境中均能抑制肺癌细胞增殖。Transwell实验结果显示,益气养精方组下室面细胞数量明显少于对照组(P <0.01),乏氧微环境中下室面细胞数明显多于对照组(P <0.01),加入益气养精方后亦可见减少。RT-qPCR结果显示,益气养精方在乏氧微环境中能不同程度下调血管生成相关因子HIF-1α、VEGF、APJ及Apelin的表达(P <0.05)。Western Blot检测发现,益气养精方在乏氧环境中能使相关因子(VEGF、PI3K、APJ)的表达量明显下调,具有统计学意义。结论益气养精方在乏氧微环境中能抑制肺癌细胞的增殖和侵袭,同时能通过Apelin/APJ通路对血管生成相关因子VEGF、HIF-1a、PI3K等起到一定的下调作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料
  •     1.1.1 细胞株
  •     1.1.2 益气养精方
  •     1.1.3 试剂
  •     1.1.4 抗体
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 细胞增殖试验
  •     1.2.2 细胞侵袭实验
  •     1.2.3 RT-PCR检测各组的相关基因表达
  •     1.2.4 Western blot实验检测各组相关蛋白的表达
  •   1.3 统计学方法
  • 2 试验结果
  •   2.1 药物浓度试验结果
  •   2.2 细胞侵袭试验结果
  •   2.3 RT-qPCR检测结果
  •   2.4 Western blot检测
  •     2.4.1 A549细胞株相关表达可见
  •     2.4.2 H1975细胞株相关表达可见
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 卢文峰,杨茜雯,董昀,崔清,蔡霄月,汪宇涵,张铭,邓海滨,徐振晔

    关键词: 中医药,非小细胞肺癌,血管生成

    来源: 世界科学技术-中医药现代化 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 上海交通大学附属胸科医院中西医结合科,上海中医药大学附属龙华医院肿瘤科

    基金: 国家自然科学基金委员会面上项目(81573893):从apelin,APJ系统探讨益气养精方抑制肺癌血管生成及侵袭转移的机制,负责人:张铭,上海市教育委员会科研创新计划重大项目(2017-01-07-00-10-E00064):源于精气理论的肺岩宁方抗肿瘤生长与转移作用机制的研究,负责人:邓海滨

    分类号: R285

    页码: 2532-2539

    总页数: 8

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