鸭CD36基因表达载体构建及其对原代肝细胞和PC3细胞脂质性状的影响

论文摘要

脂肪酸转位酶（CD36）具有广泛的生物学功能,能够促进长链脂肪酸转入脂肪细胞、心肌细胞和骨骼肌细胞,对细胞脂质代谢有重要调控作用。为探究CD36对鸭原代肝细胞和PC3细胞脂质效应,本试验采用Ⅳ型胶原酶消化法成功分离孵化了21日龄鸭胚原代肝细胞并进行培养,RT-PCR法获取鸭CD36基因序列,构建了携带HIS标签的pEGFP-N3-CD36真核表达载体pEGFP-N3-CD36-His,脂质体法转染至鸭胚原代肝细胞和PC3细胞,His标签检测试剂盒测定CD36在2种细胞中的过表达量,探讨鸭CD36基因过表达与原代肝细胞和PC3细胞中脂质性状的关联性。结果显示,pEGFP-N3-CD36-His重组质粒在鸭原代肝细胞和PC3细胞中均能发出绿色荧光,说明构建的载体转染成功;CD36过表达对2种细胞中脂质指标的影响相似,均与细胞中的甘油三酯（TG）呈极显著正相关（P<0.01）,与总胆固醇（TCH）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）呈极显著负相关（P<0.01）;揭示CD36基因过表达可能引起2种细胞中脂质代谢活动的不平衡而引起脂质代谢相关疾病的发生,为进一步研究CD36基因对细胞脂质代谢的调控奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 覃媛钰,罗华伦,吴磊,张依裕

关键词: 基因,原代肝细胞,细胞,脂质性状

来源: 中国兽医学报 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室

基金: 国家自然科学基金资助项目(31760663),贵州省科技人才补助资助项目(黔科合平台人才[2017]5788)

分类号: S834;Q78

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.10.30

页码: 2075-2081

总页数: 7

文件大小: 1312K

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