导读:本文包含了结合活性分析论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:夜蛾,活性,基因,蛋白,质粒,内皮,抑制剂。
结合活性分析论文文献综述
韩琪,胡波,李升云,董双林[1](2019)在《斜纹夜蛾气味结合蛋白基因GOBP2转录调控区的克隆及活性分析》一文中研究指出[目的]本文旨在鉴定重要农业害虫斜纹夜蛾(Spodoptera litura)气味结合蛋白基因GOBP2的顺式作用元件,为揭示GOBP2的转录调控机制和开发基于嗅觉干扰的害虫防治技术奠定基础。[方法]利用5′RACE技术克隆GOBP2的5′UTR,确定转录起始位点;利用染色体步移技术(chromosome walking)克隆GOBP2的5′侧翼区,并利用在线网站预测转录因子结合位点;利用PCR克隆GOBP2的5′侧翼区逐步缺失片段,并构建到pGL3-Basic载体上;将各重组载体分别转染Sf9细胞,48 h后收获细胞并利用双荧光素酶报告系统检测转录活性。[结果]获得斜纹夜蛾GOBP2长23 bp的5′UTR,由此确定GOBP2的转录起始位点。通过染色体步移获得斜纹夜蛾GOBP2的5′端调控区2 025 bp的序列,发现启动子的典型TATA框;针对-1 000 bp序列的转录活性分析表明,最强转录活性区域位于-243~-207 bp,具有1个增强子;此外,在-971~-891 bp及-890~-811 bp各有1个增强子,在-244~-315 bp存在1个沉默子。[结论]获得斜纹夜蛾GOBP2的转录起始位点及顺式作用元件,为进一步研究GOBP2的转录调控机制奠定了基础。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2019年06期)
毕华,李永红,范文红,陶磊,裴德宁[2](2019)在《血管内皮生长因子抑制剂结合活性试验两种结果分析方法比较》一文中研究指出目的:对血管内皮生长因子抑制剂(VEGF Trap)结合活性试验两种结果分析方法进行比较,以考察两者的差异。方法:采用固定剂量的VEGF与系列稀释的VEGF Trap处理之后,检测未结合的VEGF的量,分别以未结合的VEGF量对VEGF Trap浓度梯度和未结合的VEGF检测板的OD值对VEGF Trap浓度梯度进行四参数方程拟合,两种方法计算该产品的结合活性。结果:两种方法均满足试验有效性条件,且血管内皮生长因子抑制剂供试品和标准品的半数抑制浓度(IC50)均分别为3.68和3.6pmoL·L-1,供试品的结合活性为102%。结论:证明了两种分析方法得到的结果完全一致。为同类产品结合活性计算方法的选择提供借鉴。(本文来源于《中国药事》期刊2019年07期)
张伟,毕扬,赵丹,宗召莉,郭巍[3](2019)在《甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶SeCDA7的表达与结合活性分析》一文中研究指出几丁质脱乙酰酶(Chitin deacetylase,CDA)是昆虫几丁质代谢酶系中的重要组分,是害虫防治的重要靶标。通过RT-PCR技术克隆得到编码甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶secda7基因(Gen Bank登录号为MG604929),该基因长1 431 bp,包含开放阅读框长1 134 bp,SeCDA7蛋白的预测分子量分别为43.156 k D。结构域分析显示,SeCDA7具有一个多聚糖乙酰基转移酶催化区,属于第Ⅴ类CDA蛋白。分别构建了原核和真核重组表达载体,利用大肠杆菌和Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统转染Sf9昆虫细胞,成功表达了SeCDA7蛋白,纯化SeCDA7蛋白并分析几丁质结合活性,结果表明SeCDA7蛋白具有几丁质结合活性;荧光定量PCR结果显示secda7基因主要在中肠组织表达。本研究实现了甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶基因secda7的外源表达,并鉴定出SeCDA7蛋白具有几丁质结合活性,为深入探究甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶的生理功能提供了理论依据。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年08期)
徐刚领,郭莎,张峰,于传飞,王文波[4](2019)在《电化学发光免疫分析法在评价治疗性单抗与FcγRⅠ结合活性中的应用》一文中研究指出目的:建立电化学发光免疫分析(electrochemiluminescence immunoassay,ECLI)测定贝伐珠单抗与免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ)结合活性的方法,并评价贝伐珠单抗生物类似药(similar biotherapeutic products,SBP)候选物和其原研药(reference biotherapeutic product,RBP)与FcγRⅠ结合活性的相似性。方法:先使用封闭液对链霉亲和素(streptavidin,SA)预包被的96孔MSD板进行封闭,再将生物素(biotin)标记的FcγRⅠ与之结合,之后加入不同稀释倍数的贝伐珠单抗,最后加入SULFO-TAG(Ru(bpy)_3~(2+))标记的羊抗人检测抗体上机读数。按照试验设计分别对FcγRⅠ浓度、单抗样品初始浓度、倍比稀释倍数、检测抗体浓度等试验参数进行优化,并对优化后方法的准确性和精密性进行初步验证,还将建立的方法用于评价贝伐珠单抗SBP候选药和RBP与FcγRⅠ结合活性的相似性。结果:采用优化后的方法检测,贝伐珠单抗与FcγRⅠ的结合呈现良好的剂量效应曲线,R~2>0.99。该方法具有较好的准确性和精密性,靶值为50%~150%样品的回收率在95.2%~103.7%之间;RSD均小于10%。贝伐珠单抗SBP候选药与FcγRⅠ的相对结合活性均在为RBP相对结合活性均值±3SD之间。结论:电化学发光免疫分析法能够用于评价抗体与FcγRⅠ的结合活性,并可应用于对SBP候选药和RBP与FcγRⅠ结合活性的相似性分析。该方法的灵敏度和准确性较好,为评价抗体与FcγRⅠ的结合提供了新的技术手段。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2019年01期)
张祥云,赵思语,温潇,王宁,郭彦[5](2018)在《小麦TaUBC基因泛素结合酶活性分析》一文中研究指出已报道的RNA水平研究表明TaUBC可能是小麦产量相关基因,生物信息学分析显示该基因属于泛素结合酶家族.荧光定量PCR显示TaUBC在小麦根茎叶中均有表达.为了验证TaUBC蛋白是否具有泛素结合酶活性,本文利用原核系统表达野生型TaUBC及叁种点突变TaUBC~(C21S)、TaUBC~(C85S)、TaUBC~(C107S)蛋白,并对这些蛋白进行体外泛素化活性分析.结果证实TaUBC是一个有活性的泛素结合酶.另外,点突变C85S使得TaUBC丧失E2活性,C21S和C107S则对活性没有影响,证明其UBC结构域中第85位Cys是结合泛素的关键作用位点.(本文来源于《聊城大学学报(自然科学版)》期刊2018年03期)
周玥莹,龙莎,方美娟,王立强[6](2018)在《重组人组织激肽释放酶结合蛋白抗氧化活性及抗凝活性分析》一文中研究指出探究Kallistatin蛋白在体外3种细胞模型中的抗氧化活性及其体外抗凝、溶栓活性.首先,在体外构建HBZY-1,HaCaT,HTR8-s/Vneo细胞的H2O2,Fe-HQ氧化应激模型,并将Kallistatin蛋白应用于构建的氧化应激模型中.然后,采用多浓度梯度法筛选最佳氧化剂浓度,利用细胞活性实验检测以上3种细胞的活性,并进行体外抗凝、溶栓实验考察.结果表明:在H2O2模型中,当Kallistatin蛋白浓度为0.6μmol·L-1时,3种细胞活力与对照组(LD-Hanks缓冲液)相近,低剂量蛋白组(0.06μmol·L-1)的细胞活力明显低于高剂量蛋白组细胞;在Fe-HQ模型中,不同细胞中Kallistatin蛋白剂量的作用不同,Kallistatin蛋白具有体外抗氧化活性,不同应激条件下不同细胞对蛋白剂量的依赖性不同;体外抗凝、溶栓实验表明此蛋白具有相关活性.(本文来源于《华侨大学学报(自然科学版)》期刊2018年05期)
林明申[7](2018)在《微量热技术用于生物药物稳定性与结合活性分析》一文中研究指出应用热分析技术评价小分子药物已经非常纯熟,例如无定形成分含量鉴别、冻干工艺评价等等。而在生物制药领域,微量热分析技术也日益受到重视,尤其是利用差示扫描量热仪(DSC)在稳定性评价以及制剂筛选:等温滴定量热仪(ITC)在候选药物优化以及结合活性评价。本报告主要是介绍此两种微量热分析技术原理以及相关案例介绍。(本文来源于《第六届生物技术药物理化特性分析与质量研究技术研讨会资料汇编》期刊2018-07-22)
刘娟,闫志凤,叶棋浓,刘文鹏,朱祥[8](2018)在《von Hippel-Lindau(VHL)的表达、纯化及结合活性分析》一文中研究指出目的纯化人von Hippel-Lindau(VHL)基因重组蛋白并进行功能鉴定。方法采用PCR从人乳腺c DNA中获得VHL基因序列,该序列被插入到原核表达载体p GEX-KG中,得到谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-VHL重组质粒,将其转化至BL21(DE3)感受态细菌,经小量诱导后,采用SDS-PAGE和Western blot法检测该蛋白表达情况,使用GST微珠纯化该重组蛋白,利用GST pull-down技术验证其功能。结果获得的重组质粒可成功双酶切,基因测序表明VHL序列正确且无突变;将其转化至BL21(DE3)感受态细菌并小量诱导,纯化得到相对分子质量(Mr)约56 000的重组蛋白; GST pull-down技术证明GST-VHL重组蛋白在体外具有结合缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的功能。结论纯化出GST-VHL重组蛋白并可与HIF-1α蛋白在体外结合。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2018年06期)
南文斌[9](2018)在《BmNPV膜融合蛋白GP64中胆固醇结合位点活性分析》一文中研究指出杆状病毒(Baculovirus)是一类基因组大小为80-180kb,主要感染鳞翅目类昆虫的DNA病毒。因为其对人和环境无害,因此被广泛应用于生产生活中。近年来,家蚕核型多角体病毒(BmNPV)和苜蓿银纹核型多角体病毒(AcMNPV)研究的较为深入,而两者在农业上的应用的差异引起了人们的广泛关注。两者虽都对环境无害,但家蚕核型多角体病毒宿主域窄却易获得,而苜蓿银纹核型多角体病毒宿主域广但宿主却难饲养。如果将两者彼此优势相结合,则会给农业生产带来极大的经济效益。一般情况下,囊膜病毒在入侵细胞时,起始于病毒囊膜糖蛋白与细胞表面受体的特异性结合,而受体则决定了病毒的宿主域。核型多角体病毒主要以GP64作为出芽型病毒。因此,GP64膜融合蛋白的研究对探究病毒的入侵机制有着深远的意义。BmNPV gp64与AcMNPV gp64同源性在95%以上,BmNPV囊膜蛋白GP64介导病毒以巨胞饮的内吞方式进入细胞。同时本实验室前期研究证实,胆固醇也为BmNPV入侵所必需,而且呈剂量依赖性。因此由胆固醇介导BmNPV入侵机制尚不清楚。本文主要从以下3个方面探究BmNPV gp64胆固醇识别位点与病毒入侵宿主细胞间关系:1.构建BmNPV gp64缺失病毒:设计带有同源臂的缺失引物,通过同源重组的方式将BmNPV gp64基因缺失;2.BmNPV gp64 CRACs感染性验证:BmNPV gp64上有四个胆固醇识别位点,分别将其关键氨基酸Y突变,回复至BmNPV gp64缺失Bacmids,探究四个胆固醇识别位点与病毒感染性的关系;3.BmNPV GP64蛋白表达及生物学活性测定:通过Western-Blot、病毒拯救以及免疫荧光来分析点突变对GP64蛋白的表达定位的影响;通过绘制生长曲线、半数致死时间来测定点突变gp64对病毒生物学活性的影响;通过研究,我们初步揭示了BmNPV入侵宿主细胞的主要机制。BmNPV胆固醇识别序列CRAC2、CRAC3参与病毒的扩增。(本文来源于《江苏科技大学》期刊2018-04-25)
苏晨,史祥,付汉江,郑晓飞[10](2018)在《m~6A修饰RNA结合蛋白YTHDF2的克隆、表达及其活性分析》一文中研究指出目的构建YTH结构域m~6A结合蛋白2(YTHDF2)重组表达载体,获得具有结合m~6A修饰RNA活性的YTHDF2重组蛋白。方法以mRNA为模板采用RT-PCR方法扩增YTHDF2基因编码区序列,构建p ET-28aYTHDF2重组表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达YTHDF2融合蛋白,利用Ni2+-NTA亲和胶纯化融合蛋白,Ni2+-NTA磁球分析融合蛋白活性。结果与结论成功构建了p ET-28a-YTHDF2重组表达载体,纯化获得了YTHDF2融合蛋白,该融合蛋白具有结合m~6A修饰RNA活性。重组YTHDF2融合蛋白的获得为研究m~6A修饰RNA的生物学功能提供了重要工具分子。(本文来源于《军事医学》期刊2018年01期)
结合活性分析论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的:对血管内皮生长因子抑制剂(VEGF Trap)结合活性试验两种结果分析方法进行比较,以考察两者的差异。方法:采用固定剂量的VEGF与系列稀释的VEGF Trap处理之后,检测未结合的VEGF的量,分别以未结合的VEGF量对VEGF Trap浓度梯度和未结合的VEGF检测板的OD值对VEGF Trap浓度梯度进行四参数方程拟合,两种方法计算该产品的结合活性。结果:两种方法均满足试验有效性条件,且血管内皮生长因子抑制剂供试品和标准品的半数抑制浓度(IC50)均分别为3.68和3.6pmoL·L-1,供试品的结合活性为102%。结论:证明了两种分析方法得到的结果完全一致。为同类产品结合活性计算方法的选择提供借鉴。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
结合活性分析论文参考文献
[1].韩琪,胡波,李升云,董双林.斜纹夜蛾气味结合蛋白基因GOBP2转录调控区的克隆及活性分析[J].南京农业大学学报.2019
[2].毕华,李永红,范文红,陶磊,裴德宁.血管内皮生长因子抑制剂结合活性试验两种结果分析方法比较[J].中国药事.2019
[3].张伟,毕扬,赵丹,宗召莉,郭巍.甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶SeCDA7的表达与结合活性分析[J].生物技术通报.2019
[4].徐刚领,郭莎,张峰,于传飞,王文波.电化学发光免疫分析法在评价治疗性单抗与FcγRⅠ结合活性中的应用[J].药物分析杂志.2019
[5].张祥云,赵思语,温潇,王宁,郭彦.小麦TaUBC基因泛素结合酶活性分析[J].聊城大学学报(自然科学版).2018
[6].周玥莹,龙莎,方美娟,王立强.重组人组织激肽释放酶结合蛋白抗氧化活性及抗凝活性分析[J].华侨大学学报(自然科学版).2018
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[8].刘娟,闫志凤,叶棋浓,刘文鹏,朱祥.vonHippel-Lindau(VHL)的表达、纯化及结合活性分析[J].细胞与分子免疫学杂志.2018
[9].南文斌.BmNPV膜融合蛋白GP64中胆固醇结合位点活性分析[D].江苏科技大学.2018
[10].苏晨,史祥,付汉江,郑晓飞.m~6A修饰RNA结合蛋白YTHDF2的克隆、表达及其活性分析[J].军事医学.2018