H5与H7亚型流感流行株嵌合病毒株的拯救及初步鉴定

论文摘要

目的探讨H5与H7亚型流感流行株嵌合病毒的拯救并进行鉴定,为新型流感疫苗的研发奠定基础。方法采用脂质体转染的方法,首先依照A型流感病毒A/PR/8/34 HA嵌合片段的设计对H5 2.3.4.4谱系HA和H7亚型的HA进行改造,利用反向遗传技术拯救A/B型嵌合减毒株,对拯救成功的病毒株进行形态学和分子生物学鉴定,并测定病毒滴度;从中选择H5亚型嵌合减毒株以104EID50/50μl的剂量滴鼻感染BALB/c小鼠,观察、记录小鼠的体重变化及死亡情况,并测定攻毒后第3 d及第6 d小鼠肺脏病毒复制能力。结果成功拯救出2种A/B型嵌合减毒株,分别命名为rA/B-H5-NS110和rA/B-H7-NS110,测序显示两株嵌合减毒株的序列与预期一致,并在电镜下观察到了流感病毒样粒子。rA/B-H5-NS110和rA/B-H7-NS110株在MDCK细胞上的病毒滴度均为104.50TCID50/ml;在鸡胚上的病毒滴度rA/B-H5-NS110为105.25EID50/ml,rA/B-H7-NS110株为105.44EID50/ml。小鼠致病性实验中H5亚型嵌合病毒感染组小鼠与对照组相比体重无明显下降,攻毒后小鼠存活率100%;攻毒后第3 d可在小鼠肺脏内检测到嵌合减毒株rA/B-H5-NS110的轻微复制,第6 d时未检测到病毒复制。结论成功地拯救出2株包含有H5 2.3.4.4谱系HA基因以及H7N9流感病毒HA基因的嵌合减毒株,为B型流感病毒包装机制的研究以及新型流感疫苗的研发提供了新的思路。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵梦琳,孙伟洋,张醒海,宫语晨,毕津豪,张亚敏,李元果,冯娜,王铁成,王化磊,赵永坤,杨松涛,夏咸柱,高玉伟

关键词: 型流感病毒,致病性,反向遗传学

来源: 中国病原生物学杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 军事医学研究院军事兽医研究所,吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,吉林大学动物医学学院,吉林农业大学,河南大学

基金: 国家重点研发计划项目(No.2016YFD0500203,2016YFD0501004)

分类号: R373.13

DOI: 10.13350/j.cjpb.190402

页码: 381-385+393

总页数: 6

文件大小: 1019K

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标签：型流感病毒论文;  致病性论文;  反向遗传学论文;