导读:本文包含了期卵母细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,玻璃化,甘氨酸,水貂,半胱氨酸,渗透性,保护剂。
期卵母细胞论文文献综述
曹俊国,李文,韩玉萍,李晓霞,王士勇[1]（2019）在《甘氨酸对水貂GV期卵母细胞冷冻保存效率的影响》一文中研究指出试验旨在探究玻璃化冷冻及培养过程中添加甘氨酸(glycine,Gly)对水貂GV期卵母细胞冷冻解冻后存活率、核发育、线粒体和皮质颗粒分布的影响。试验分为3组:对照组(没有进行冷冻处理)、冷冻组和Gly添加处理组(1 mmol/L Gly)。对玻璃化冷冻解冻后的水貂GV期卵母细胞分别进行平衡恢复3 h和体外成熟培养,采用免疫荧光标记法检测各组GV期卵母细胞线粒体分布的差异及MⅡ期皮质颗粒分布的变化。结果显示,Gly添加处理组卵母细胞在解冻后3 h的存活率与冷冻组相比差异不显着(P>0.05),但显着低于对照组(P<0.05);Gly添加处理组卵母细胞的减数分裂恢复率显着高于冷冻组(P<0.05),但与对照组相比差异不显着(P>0.05)。免疫荧光结果显示,Gly添加处理组的GV期卵母细胞线粒体正常分布率显着高于冷冻组(P<0.05),但Gly添加处理组和冷冻组的GV期卵母细胞线粒体正常分布率均显着低于对照组(P<0.05)。皮质颗粒分布结果显示,水貂GV期卵母细胞在冷冻后体外成熟培养至MⅡ期时,Gly添加处理组皮质颗粒的正常皮质区分布比例显着高于冷冻组(P<0.05),但Gly添加处理组与冷冻组的正常皮质区分布比例均显着低于对照组(P<0.05)。结果表明,添加Gly可以提高冻融后水貂卵母细胞的减数分裂恢复率,降低冷冻对其线粒体及皮质颗粒的损失。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年07期）
王勇杰,周悦,季珂萌,张润祥,白熙[2]（2019）在《玻璃化冷冻对猪GV期卵母细胞及其DNA的影响》一文中研究指出为了探索对猪GV期卵母细胞低毒性以及冷冻效果好的最佳冷冻保护液,并对玻璃化冷冻卵母细胞及其DNA损伤进行评价,本研究以猪GV期卵母细胞作为试验材料,应用玻璃化冷冻方法,就目前应用最多的六种冷冻保护液进行筛选,筛选出最合适的冷冻保护液;透射电镜观察冷冻卵母细胞超微结构的变化;采用彗星电泳技术检测玻璃化冷冻对卵母细胞DNA的影响。结果发现,以二甲基亚砜DMSO和乙二醇EG为主要成分的(HM+7.5%DMSO+7.5%EG)、HM+17%DMSO+17%EG+0.4 mol/L Su)冷冻保护液对猪GV期卵母细胞的损伤最小;玻璃化冷冻后卵母细胞透明带、细胞膜损伤,微绒毛消失,线粒体肿胀、基质不均、嵴不明显,胞质内溶解为絮状,有大量空泡;冷冻保护液处理组(未进行玻璃化冷冻)卵母细胞DNA损伤与对照组差异不显着,玻璃化冷冻组卵母细胞DNA损伤与冷冻保护液处理组和对照组均差异显着。结果表明,以DMSO和EG为主要成分的冷冻保护液适合用于对猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻,同时也证实了DNA的损伤主要是由玻璃化冷冻过程的机械损伤所致。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年08期）
曹俊国[3]（2019）在《甘氨酸/褪黑素对水貂GV期卵母细胞冷冻保存的影响》一文中研究指出水貂是珍贵的毛皮动物,具有很高的经济价值。与其它大家畜相比,先进的繁殖生物技术在水貂繁殖上的应用严重滞后。卵母细胞的冷冻保存技术是最重要且最基本的一项生物技术,目前在脂肪含量低的哺乳动物的卵母细胞上已经比较成熟且广泛应用。但是对脂肪含量高的动物的卵母细胞来说,其冷冻保存效率低下,如何提高其冷冻保存效率是当今生物科学研究的热点之一。甘氨酸(Glycine,Gly)和褪黑素(Melatonin,MT)在提高小鼠等含脂量低的卵母细胞冷冻保存效率方面的研究已经得到充分的验证,然而其能否提高脂肪含量极高的水貂卵母细胞的冷冻保存效率还需深入研究。本试验以水貂生发泡期(Germinal vesicle,GV)卵母细胞为研究对象,进行GV期卵母细胞玻璃化冷冻、解冻后体外成熟,采用免疫荧光、qRT-PCR等方法,探讨玻璃化冷冻、解冻及培养过程添加1mM的Gly或10~(-9)M的MT对水貂卵母细胞质量的影响,包括卵母细胞复苏率、核成熟率、线粒体和皮质颗粒的分布以及卵母细胞周围颗粒细胞的糖酵解相关基因(Ldh1、Pkm2、Pfkp)表达量的变化。进而从基因、细胞器和细胞多个水平上研究添加Gly和MT对水貂卵母细胞冷冻保存效率的影响。本试验研究结果如下:1.水貂GV期卵母细胞玻璃化冷冻、解冻及体外成熟过程中添加1mM的Gly(73±1.8%vs55±4.1%)或10~(-9)M的MT(70±2.7%vs 55±4.1%)可以显着提高卵母细胞的GVBD率(P<0.05)。2.水貂GV期卵母细胞玻璃化冷冻及解冻过程中添加1mM的Gly(54±3.2%vs 30±2.3%)可以显着降低冷冻引起的卵母细胞线粒体损伤(P<0.05),提高了活性线粒体的正确分布。3.水貂GV期卵母细胞玻璃化冷冻、解冻及体外成熟过程中添加1mM的Gly(42±4.2%vs34±1.8%)可以显着减少冷冻引起的卵母细胞皮质颗粒的损失(P<0.05),提高了皮质颗粒正确分布。4.水貂GV期卵母细胞玻璃化冷冻及解冻过程中添加1mM的Gly或10~(-9)M的MT可以显着提高水貂GV期卵母细胞周围颗粒细胞糖酵解相关基因(Ldh1、Pkm2、Pfkp)的表达(P<0.05)。5.水貂GV期卵母细胞玻璃化冷冻、解冻及体外成熟过程中添加1mM的Gly或10~(-9)M的MT均可提高卵母细胞的冷冻保存效率。添加1mM的Gly在提高线粒体分布、皮质颗粒分布等方面要显着优于10~(-9)M的MT(P<0.05),但在核成熟上,两者之间差异不显着(P>0.05)。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2019-05-01）
戴建军,吴彩凤,张树山,孙玲伟,陈亚宁[4]（2019）在《猪MII期卵母细胞冷冻前后全基因组表达谱分析》一文中研究指出为探究猪MII期卵母细胞冷冻前后基因表达的变化,采用猪全基因组表达谱芯片对其冷冻前后的基因进行表达谱分析,筛选出2倍以上差异表达基因,并利用生物信息学对这些基因进行GO和KEGG Pathway分析。结果表明:(1)猪卵母细胞玻璃化冷冻前后共获得2倍以上差异表达基因171个,其中冻后上调表达基因103个,下调表达基因68个;选取的6个差异表达基因的RT-PCR验证结果与芯片分析结果一致。(2)损伤应答、细胞凋亡、程序性细胞死亡、细胞坏死及蛋白激酶调节、RNA拼接、核mRNA拼接和mRNA代谢等参与了卵母细胞冻后基因差异表达的生物学过程;(3)胞外区、基底质膜、细胞外间隙、质膜、肌动蛋白细胞骨架、线粒体脊、线粒体、细胞器膜和线粒体包膜等参与了卵母细胞冻后基因差异表达的细胞组分调控;(4)类固醇结合、酶抑制剂的活性、激素结合、核苷酸结合、辅酶结合和ATP酶活等参与了卵母细胞冻后差异表达基因的分子功能调控。(5) KEGG Pathway分析表明,Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路、黏着连接和MAPK信号通路等参与了冻后卵母细胞的基因表达调控。综上所述,冷冻能造成猪MII期卵母细胞多系统的损伤,如线粒体损伤、凋亡、坏死、质膜损伤和RNA拼接与代谢异常等。(本文来源于《上海农业学报》期刊2019年02期）
杜琛,陈秀娟,侯石磊,赵杰[5]（2018）在《多囊卵巢综合征患者与正常排卵妇女GV期卵母细胞转录组的比较》一文中研究指出目的:探讨控制性卵巢刺激(COS)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者和正常排卵妇女GV期卵母细胞中差异表达基因和主要信号转导通路的影响,从而筛选出影响PCOS患者卵母细胞发育的关键基因。方法:选择接受GnRH-a长方案将调的控制性超排卵的PCOS患者3例(PCOS组)和同期因男性不孕因素接受长方案将调的正常排卵妇女3人(对照组),通过酶消化法分离颗粒细胞,收集经过卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)之后废弃的未成熟卵母细胞。构建cDNA文库,在Illumina MiSeq测序平台进行测序,并通过RT-PCR技术对测序数据进行体外验证(每组3个重复)。结果:获得了510 024 82个序列读取片段(reads),包含8G碱基序列信息。通过生物信息学软件共找到63个差异表达基因,极显着上调的基因19个,极显着下调基因有44个(Fold Change>4,FDR<0.01)。PCOS组患者血管内皮生长因子(VEGF)和脂肪酸脱氢酶1(FADS1)mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05),Runt相关转录因子2(RUNX2)、趋化因子1(CXCL1)和热体克蛋白27(Hsp27)mRNA表达水平明显低于对照组(P<0.05),与功能验证结果一致。差异基因基于GO功能注释可分为磷酰化、细胞自噬和转录调控等多个分支,利用KEGG数据库作为参考,这些基因主要富集于磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)、转化生长因子β(TGF-β)、Hippo、p53和过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)信号通路中。结论:PCOS患者GV期卵母细胞中差异表达的基因可能影响卵泡发育和卵母细胞成熟,从而导致胚胎质量低下。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2018年03期）
周新丽,杨云,戴建军,张德福,邵文琪[6]（2017）在《微流体装置线性去除猪MII期卵母细胞冷冻保护剂的实验研究》一文中研究指出低温保存后的卵母细胞在使用前必须要去除冷冻保护剂,目前常用的分步法去除步骤繁琐,容易丢失细胞,而且会对细胞造成致命的渗透损伤。为减小细胞渗透损伤,设计制作适合卵母细胞保护剂去除的微流体装置,研究微流控线性法去除猪MII期卵母细胞低温保护剂时在不同时间(6、8、10 min)下卵母细胞的体积变化,以及对卵母细胞存活率与发育率的影响;并与传统的去除方法(一步法和分步法)进行比较。结果表明,采用微流体装置线性去除冷冻保护剂,8 min为实验中的最优去除时间;线性法能够明显减小细胞的渗透损伤,其最大归一化渗透膨胀体积为1.12±0.07,卵母细胞的存活率、卵裂率及囊胚率分别达到83.6%、72.4%、21.5%,均显着高于一步法和分步法(P<0.05)。因此,微流控线性去除冷冻保护剂能够显着减小细胞的渗透损伤,为卵母细胞低温保存技术提供新思路。(本文来源于《中国生物医学工程学报》期刊2017年04期）
吴国权,权国波,相德才,张斌,邵庆勇[7]（2017）在《乙二醇联合丙二醇用于猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究》一文中研究指出本实验以猪GV期卵母细胞为模型,旨在研究乙二醇(EG)联合丙二醇(PROH)作为渗透性冷冻保护剂的冷冻保存方案。将卵母细胞在室温(25℃)和生理温度(39℃)2种冷冻操作条件下,采用2.5%EG+2.5%PROH直接处理10 min(预平衡方式Ⅰ)或分步以3.75%EG+3.75%PROH、7.5%EG+7.5%PROH 2种溶液各处理2.5 min(预平衡方式Ⅱ)进行预平衡,然后Cryotop法玻璃化冷冻保存,解冻后分析其存活、体外成熟及孤雌发育能力。结果表明:在2种温度下,预平衡方式Ⅰ组卵母细胞解冻后2 h的存活率均显着高于预平衡方式Ⅱ组(P<0.05),但存活卵母细胞成熟培养后,在各冷冻组间的存活率无明显差异(P>0.05);冷冻组卵母细胞的核成熟也与新鲜卵母细胞无显着性差异(P>0.05);在相同温度下,预平衡方式Ⅰ组的卵裂率和囊胚发育率均显着高于预平衡方式Ⅱ组(P<0.05);当采用同一预平衡方式时,39℃的冷冻操作条件所获卵裂率和囊胚发育率显着低于25℃(P<0.05);此外,各组间囊胚细胞数均无明显差异(P>0.05)。综上所述,EG联合PROH用于猪GV期卵母细胞的Cryotop法玻璃化冷冻保存时,25℃冷冻操作条件下,采用预平衡方式Ⅰ可获得较高的冷冻存活率及囊胚发育率。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2017年08期）
牛梦涵[8]（2017）在《绵羊GV期和MⅡ期卵母细胞差异mRNA和lncRNA的筛选》一文中研究指出绵羊卵母细胞成熟过程,从GV期至MⅡ中期经历两次阻滞,分别是GVBD前期和MⅡ期中期,一旦通过两次阻滞,即可认定卵母细胞具备受精并发育成个体的能力。显然,两个时期的卵母细胞所受调控基因存在很大差异,但目前所研究的依然较少。因此本试验采用高通量RNA-Seq测序技术针对绵羊GV期和MⅡ中期卵母细胞进行检测,以探究更多未知调控基因以及其参与通路,深入了解差异表达mRNAs/lncRNAs对减数分裂的影响。本试验主要通过收集绵羊GV期裸卵以及体外成熟培养至MⅡ中期卵母细胞,利用免疫荧光反应检测纺锤体变化,并送样进行高通量测序和最终差异表达基因分析。根据实际情况,本研究分为以下四个部分:(1)采集GV期绵羊卵母细胞,共计1292枚,体外成熟培养24h,统计其成熟率为72.14±5.96%。且染色体凝集免疫荧光检测显示GV期卵母细胞核内,染色质呈丝状圆形分布,但并未观察到微管的特异性着色;而MⅡ期卵母细胞染色体和纺锤体均排列在赤道板位置,并有Pb1被排出。(2)测序结果发现:GV期及MⅡ期绵羊卵母细胞RNA文库经质量分析后分别得到81852546、81810992、83912840和83721438、81604688、88526912条clean reads;GV期及MⅡ期绵羊卵母细胞分别有80.52%、80.46%、80.47%和78.64%、80.99%、80.59%的reads匹配到已知基因组。对reads已知类型分析可知:GV期编码蛋白基因约占67.13%,其他功能基因约占31.66%;而MⅡ期编码蛋白基因约占71.20%,其他功能基因约占27.58%。(3)利用GO富集和KEGG富集分析已筛选的mRNA和lncRNA靶基因。结果显示:MⅡ期卵母细胞与GV期卵母细胞相比上调转录本4148条,下调转录本3091条,其中新转录本(Novel isoform)总数444条,MⅡ期细胞与生发泡期细胞相比,绝对上调转录本4条,绝对下调转录本20条;差异表达mRNA的分析结果显示差异表达数5310条,其中绝对上调数16条和上调数1570条,绝对下调数14条和下调数3710条;差异表达lncRNA的分析结果显示差异表达数1485条,其中绝对上调数和上调数分别为42条和913条,绝对下调和下调数为289条和241条。通过cis方式预测差异表达lncRNA的靶基因,在lncRNA基因上下游10K和100K范围内分别预测到7113个和43581个靶基因。差异表达lncRNA靶基因并未出现极显着富集的GO模块;KEGG通路富集分析中有核糖体、内吞作用、泛素介导的蛋白水解、抗利尿激素调节水的重吸收通路显着富集(P<0.05)。差异mRNA出现众多显着富集的GO模块;KEGG通路富集显示剪接体和RNA转运,此外代谢途径通路等通路存在差异(P<0.05)。(4)随机选取差异表达mRNAs和lncRNAs靶基因,运用免疫荧光RT-PCR进行定量分析,结果显示:差异基因定量结果与高通量测斜结果基本一致。总之,本试验首次探讨了存在于绵羊GV期以及MⅡ期两时期大量特异以及差异性表达的mRNA/lncRNAs。这些mRNA/lncRNAs在代谢途径、RNA转运、剪接体、卵母细胞减数分裂、泛素介导的蛋白水解、RNA降解、真核生物核糖体合成、嘧啶代谢、蛋白酶体、氧化磷酸化、代谢途径、同源重组、柠檬酸循序、细胞循环、碳代谢、氨基糖与核苷酸糖代谢通路上的富集程度存在差异性,启示卵母细胞中lncRNAs/mRNAs可能通过参与这些细胞信号通路或生物学过程来调控绵羊卵母细胞减数分裂过程。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2017-05-01）
周佳勃,张宇霆,岳巍,邢月超,汪顺伟[9]（2017）在《N-乙酰半胱氨酸对玻璃化冻存小鼠GV期卵母细胞成熟和后续胚胎发育能力影响》一文中研究指出冷冻保存后的GV期卵母细胞内大量积累ROS,影响胚胎发育。NAC作为一种抗氧化剂,可缓解氧应激造成的损伤。但NAC对冷冻GV期卵母细胞是否存在维持作用尚待研究。为探究NAC在冷冻、解冻后小鼠GV期卵母细胞发育中作用,检测冷冻保存后小鼠GV期卵母细胞在添加不同浓度NAC成熟培养液后成熟情况,观察其卵裂率与囊胚率、线粒体分布、ROS水平和受精后胚胎发育等。结果表明,添加1.5 mmol·L~(-1)NAC,冷冻保存后,小鼠GV期卵母细胞,线粒体排布均匀,卵母细胞比例显着提高,ROS水平降低。NAC可改善小鼠GV期卵母细胞经冷冻保存后复苏和体外成熟水平,提高其发育能力。(本文来源于《东北农业大学学报》期刊2017年02期）
吴彩凤,戴建军,钮莹芳,张树山,陈亚宁[10]（2017）在《猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后的凋亡途径研究》一文中研究指出为阐明猪卵母细胞玻璃化冷冻后的细胞凋亡模式,本试验利用原位荧光染色技术对冻后卵母细胞死亡受体介导的外源性凋亡途径和线粒体介导的内源性凋亡途径中的Caspase 3、Caspase 8、Caspase 9和总Caspase活性进行检测,用RT-PCR技术对不同途径中关键基因进行mRNA表达检测。结果显示:猪MII期卵母细胞冷冻后,死亡受体外源性凋亡途径的Caspase 8荧光强度值(32.03)和线粒体内源性凋亡途径的Caspase 9荧光强度值(16.56),以及两者共同途径中的Caspase 3和总Caspase荧光强度值(16.70和8.43)均显着高于新鲜卵母细胞对照组所对应的荧光强度值(分别为4.02、4.83、4.23和3.08)。死亡受体外源性凋亡途径TNFα、FasL、CASP8和CASP3基因表达量也均有一定水平的提高,线粒体介导的内源性凋亡途径中CASP9、CASP3和P53基因表达水平呈上升趋势,而Bcl2、BAX、SOD1和survivin的基因表达水平显着下降。综上所述,死亡受体介导的外源性凋亡和线粒体介导的内源性凋亡共同参与了猪MII期卵母细胞冻后的凋亡过程。(本文来源于《上海农业学报》期刊2017年01期）
期卵母细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了探索对猪GV期卵母细胞低毒性以及冷冻效果好的最佳冷冻保护液,并对玻璃化冷冻卵母细胞及其DNA损伤进行评价,本研究以猪GV期卵母细胞作为试验材料,应用玻璃化冷冻方法,就目前应用最多的六种冷冻保护液进行筛选,筛选出最合适的冷冻保护液;透射电镜观察冷冻卵母细胞超微结构的变化;采用彗星电泳技术检测玻璃化冷冻对卵母细胞DNA的影响。结果发现,以二甲基亚砜DMSO和乙二醇EG为主要成分的(HM+7.5%DMSO+7.5%EG)、HM+17%DMSO+17%EG+0.4 mol/L Su)冷冻保护液对猪GV期卵母细胞的损伤最小;玻璃化冷冻后卵母细胞透明带、细胞膜损伤,微绒毛消失,线粒体肿胀、基质不均、嵴不明显,胞质内溶解为絮状,有大量空泡;冷冻保护液处理组(未进行玻璃化冷冻)卵母细胞DNA损伤与对照组差异不显着,玻璃化冷冻组卵母细胞DNA损伤与冷冻保护液处理组和对照组均差异显着。结果表明,以DMSO和EG为主要成分的冷冻保护液适合用于对猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻,同时也证实了DNA的损伤主要是由玻璃化冷冻过程的机械损伤所致。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
期卵母细胞论文参考文献
[1].曹俊国,李文,韩玉萍,李晓霞,王士勇.甘氨酸对水貂GV期卵母细胞冷冻保存效率的影响[J].中国畜牧兽医.2019
[2].王勇杰,周悦,季珂萌,张润祥,白熙.玻璃化冷冻对猪GV期卵母细胞及其DNA的影响[J].中国兽医科学.2019
[3].曹俊国.甘氨酸/褪黑素对水貂GV期卵母细胞冷冻保存的影响[D].中国农业科学院.2019
[4].戴建军,吴彩凤,张树山,孙玲伟,陈亚宁.猪MII期卵母细胞冷冻前后全基因组表达谱分析[J].上海农业学报.2019
[5].杜琛,陈秀娟,侯石磊,赵杰.多囊卵巢综合征患者与正常排卵妇女GV期卵母细胞转录组的比较[J].吉林大学学报(医学版).2018
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[9].周佳勃,张宇霆,岳巍,邢月超,汪顺伟.N-乙酰半胱氨酸对玻璃化冻存小鼠GV期卵母细胞成熟和后续胚胎发育能力影响[J].东北农业大学学报.2017
[10].吴彩凤,戴建军,钮莹芳,张树山,陈亚宁.猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后的凋亡途径研究[J].上海农业学报.2017
论文知识图
