导读:本文包含了噬菌体裂解基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:噬菌体裂解酶,基因表达,李斯特菌,蛋白纯化
噬菌体裂解基因论文文献综述
刘珊娜,葛怀娜,刘金福[1]（2018）在《李斯特菌噬菌体裂解酶基因在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出单核细胞增生李斯特菌是一种重要的食源性致病菌,存在于多种环境中,造成牛奶、肉类、水产品等的食品安全问题。李斯特菌噬菌体编码的裂解酶能够特异性地裂解宿主细胞,释放胞内的子代噬菌体。本研究旨在构建李斯特菌噬菌体A500裂解酶的细胞壁结合结构域CBD500的异源表达系统,获得重组蛋白。首先通过体外扩增得到CBD500基因,克隆到表达载体p ET32a(+)中,转化表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)。阳性重组菌在30℃,0.1 mmol/L IPTG中诱导4 h后,以可溶形式表达分子质量约35 ku的重组蛋白。利用镍离子亲和层析纯化目的蛋白,纯化产物质量浓度为0.62 mg/mL。间接ELISA试验证实,纯化的重组蛋白具有生物学活性,可用于进一步研究裂解酶的理化性质和作用机制。(本文来源于《中国食品学报》期刊2018年08期）
周少威[2]（2017）在《洱源热泉噬菌体裂解酶基因多样性及裂解酶基因mmplysin的克隆表达》一文中研究指出噬菌体是感染细菌、古菌及真菌等微生物的病毒。由于其基因组小、机构相对简单、便于基因操作等优点,噬菌体自被发现以来,就被作为基因复制及表达调控研究的模型。噬菌体裂解酶为噬菌体感染宿主后表达释放的一类细胞壁水解酶,通过水解细胞壁肽聚糖而使细菌裂解,并释放出子代噬菌体。传统的抗生素治疗会导致耐药性菌株出现,而噬菌体裂解酶能高效、专一地裂解细菌,使其有望取代传统的抗生素治疗。本文以来源于洱源热泉环境的混合样品ya为材料,将噬菌体混合液超速离心后收集噬菌体,提取噬菌体DNA后交由诺禾致源公司完成测序。测序结果通过FastQC进行测序质量分析和IDBA-UD序列拼接。此后对拼接好的序列与NCBI中基因库进行序列检索分析,获得裂解酶共有1006条序列,分别为amidase、endopeptidase、transglycosylase、glucosaminidase,这四种裂解酶对应的contig数分别是422、306、250和28条,其中具有完整ORF数目分别是94、65、66和8条。将其中碱基序列长度为500-1500 bp翻译成氨基酸序列,并对amidase、endopeptidase、transglycosylase、glucosaminidase 这四种裂解酶的保守结构域进行分析,为后续寻找新的更高效的噬菌体裂解酶以及噬菌体裂解酶的裂解机制奠定基础。此外,本文对亚栖热菌噬菌体MMP17的裂解酶基因mmplysin进行克隆表达和活性分析。裂解酶基因mmplysin序列长度为633 bp,保守结构域显示来自M23肽酶家族。mmplysin经过PCR扩增、连接、转化和诱导重组后,与pET28a构建成重组质粒pET28a-mmplysin。经诱导表达后,得到重组蛋白mmplysin。该重组蛋白在28℃,诱导5h后得最大表达量,重组蛋白的分子量23 kDa左右。该重组蛋白mmplysin最适酶活温度为56-65℃,从37℃到75℃均有酶活,高于大部分已报道的噬菌体裂解酶的最适作用温度;其在pH7-8时活性最强;金属离子对酶的影响研究结果显示,Mn2+,Ca2+,K+存在时导致mmplysin酶活性降低,而Zn2+,Cu2+,Mg2+对酶有激活作用。通过裂解酶mmplysin对不同细菌的抑菌实验发现,重组蛋白mmplysin对噬菌体MMP17宿主菌TG17有明显的抑菌作用,对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都具有一定的抑制作用。在耐药性肺炎克雷伯菌的抑菌实验中,发现其对部分菌株同样具有一定的抑制作用。裂解酶对耐药性肺炎克雷伯菌的抑制作用的原子力显微镜观察表明,酶液作用后会在细胞壁表面形成穿孔从而使得细胞质的流出导致细胞的死亡。本文研究了噬菌体裂解酶的多样性,对裂解酶mmplysin的特征进行研究,为后续高温裂解酶在实际生活中的应用提供了一定的实验依据。(本文来源于《昆明理工大学》期刊2017-05-01）
郑辉[3]（2017）在《屎肠球菌裂解性噬菌体Ec-ZZ2全基因序列的初步分析》一文中研究指出屎肠球菌(Enterococcus faecium)是肠球菌属(Enterococcus)的重要成员,为革兰阳性球菌,常见于人和动物的肠道内,亦存在于自然界的环境中。肠球菌(粪肠球菌和屎肠球菌)为条件致病菌,是引起医院内感染的常见病原菌之一。肠球菌引起的感染对象主要为接受化疗的肿瘤患者、器官移植病人、严重外伤和有慢性病的老年患者。此外,肠球菌对抗生素的耐药已成为重要的公共卫生问题。特别是耐万古霉素肠球菌(Vancomycin-resistant Enterococci,VRE)的出现严重威胁到公众的健康。近年来,利用噬菌体预防和控制细菌感染的噬菌体疗法重新引起有关专业机构和人士的关注。本项研究的目的是通过分离鉴定屎肠球菌噬菌体并对其遗传信息进行初步分析,为今后噬菌体用于肠球菌引起的感染提供依据。采用常规方法从环境的污水中分离一株屎肠球菌裂解性噬菌体,命名为Ec-ZZ2。透射电镜显示,噬菌体Ec-ZZ2的头部呈球形、直径约50 nm,尾部长约180 nm。噬菌体Ec-ZZ2的形态学特征符合有尾病毒目、长尾病毒科噬菌体。提取和纯化的噬菌体Ec-ZZ2基因组提交至华大基因技术服务公司进行测序。结果显示,Ec-ZZ2的基因组为双链DNA、大小41,170 bp,G+C含量34.59%。序列分析表明,Ec-ZZ2基因组有59个编码序列、5个串联的重复序列和2个微卫星DNA,未发现t RNA。在59个编码序列中,29个编码序列可预测其基因功能,其余30个编码序列为未知基因。这些可预测基因功能涵盖结构蛋白模块(衣壳蛋白、尾蛋白、头尾连接蛋白、尾带宽度蛋白和尾丝蛋白)、DNA复制和组装模块(DNA多聚酶、DNA引物酶、DNA解旋酶、HNH内切酶、转录调节蛋白、通道蛋白、末端酶大亚基和末端酶小亚基)、代谢模块(裂解素、穿孔素和谷胱甘肽家族蛋白)和其他模块(金属-β-内酰胺酶蛋白域)。基因比对发现,噬菌体Ec-ZZ2基因组与肠球菌噬菌体IME-EF4(登录号:KF733017)、肠球菌噬菌体IME-EF3(登录号:KF728385)、肠球菌噬菌体Efa CPT1(登录号:JX193904)和肠球菌噬菌体AUEF3(登录号:KJ127304)具有较高的同源性,分别为97%、91%、92%和96%。噬菌体Ec-ZZ2的全基因组序列已提交至Gen Bank,登录号:KR131750。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-05-01）
张倩,张湘莉兰,孙耀强,于会举,张培生[4]（2016）在《奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌裂解性噬菌体裂解酶LysIMEP5基因的克隆及序列分析》一文中研究指出为了克隆奶牛乳房炎金黄色(葡萄球菌裂解性噬菌体裂解酶Lys IMEP5基因,分析其生物信息学特性,以本实验室分离的奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌裂解性噬菌体v B_Sau S_IMEP5为材料,根据其全基因组学信息,获取裂解酶基因序列,应用Primer 5.0设计特异性引物。采用PCR方法扩增并克隆Lys IMEP5基因,通过BLAST进行序列比对分析,利用在线软件对蛋白结构进行预测。成功克隆到裂解酶Lys IMEP5基因,测序结果通过DNAMAN比对与原序列完全匹配,无任何基因突变,同源性分析显示,与已报道的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶相似性最高为83.1%;裂解酶Lys IMEP5基因序列全长1371 bp,共编码456个氨基酸,为亲水性蛋白,分子质量为51.717 k Da,理论等电点为9.70;Lys IMEP5同时存在CHAP片段和Amidase-3片段;该蛋白无跨膜区,无信号肽,以无规则卷曲为主。从奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌裂解性噬菌体中成功克隆出Lys IMEP5基因,通过对该蛋白的结构预测分析为后续克隆表达及开发新型绿色抑菌剂奠定了基础。(本文来源于《中国兽药杂志》期刊2016年10期）
查涛,梁俊容,肖玉春,景怀琦[5]（2016）在《噬菌体phiYe-F10的裂解谱的测定以及裂解能力与宿主毒力基因间关系分析》一文中研究指出目的为测定小肠结肠炎耶尔森菌噬菌体phiYe-F10的裂解谱,分析噬菌体phiYe-F10裂解能力与宿主毒力基因间的关系。方法采用双层平板法观察噬菌体phiYe-F10对213株小肠结肠炎耶尔森菌,36株假结核耶尔森菌和1株鼠疫耶尔森菌的裂解能力;同时对不同来源不同地区的小肠耶尔森菌进行黏附侵袭位点基因(ail)、肠毒素基因(ystA、ystB)、黏附素基因A(yadA)、毒力因子基因F(virF)、O∶3血清型特异性基因(rfbc)检测和血清型别鉴定。结果表明213株小肠结肠炎耶尔森菌包括O∶3血清型84株(其中rfbc+78株),O∶5血清型10株,O∶8血清型13株,O∶9血清型34株,其它及未分型的共72株。携带毒力质粒的典型致病性小肠耶尔森菌(ail+,ystA+,ystB-,yadA+,virF+)77株,毒力质粒丢失的致病性小肠结肠炎耶尔森菌(ail+、ystA+、ystB-、yadA-、virF-)15株,其它非致病基因型121株。噬菌体phiYe-F10裂解71株O∶3小肠结肠炎耶尔森氏菌,其中致病性小肠结肠炎耶尔森菌52株,非致病性小肠结肠炎耶尔森菌19株。对O∶5,O∶9血清型和其它菌株均不裂解,对O∶3的裂解率高达84.5%(71/84)。噬菌体phiYe-F10对假结核耶尔森菌和鼠疫耶尔森氏菌均不裂解。结论:phiYe-F10噬菌体是一株小肠结肠炎耶尔森菌的裂性噬菌体,在25℃时表现出一个典型的窄裂解谱,高度专一性裂解O∶3血清型小肠结肠炎耶尔森菌。phiYe-F10对典型致病性小肠结肠炎耶尔森菌的裂解能力明显高于非致病性的小肠结肠炎耶尔森菌(本文来源于《病毒学报》期刊2016年02期）
卢国民,张灿,邹玲,刘文华,温建新[6]（2015）在《噬菌体vB_EcoM-Bp7裂解酶基因的密码子使用偏性分析》一文中研究指出通过生物信息学软件对噬菌体vB_EcoM-Bp7裂解酶基因的密码子用法及偏性分析。利用Mobyle中的CodonW 1.4.4及cusp程序计算密码子偏性的各种指标,并对7个噬菌体裂解酶基因序列中的总GC含量、密码子第1、2位GC含量平均值和第3位的GC含量进行分析,利用MegAlign软件对7株噬菌体裂解酶进行氨基酸序列分析,构建系统发育树。结果表明,除噬菌体phi68外,Bp7裂解酶基因与其他5株噬菌体的裂解酶基因密码子使用模式基本一致。偏爱使用以A或U为结尾的密码子;除了AUG(Met)和UGG(Trp)外,还确定了Bp7裂解酶使用的12种高频密码子;偏性比较发现,Bp7裂解酶基因密码子偏性与IME08最相近,与JS98次之;进化分析及聚类分析均表明Bp7裂解酶基因与IME08亲缘关系最近。分析结果将为进一步研究噬菌体Bp7的进化奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2015年09期）
金延秋,庄松娟,林洪,王静雪,孙翌[7]（2015）在《利用生物信息学技术预测副溶血弧菌噬菌体VPp1内溶素基因及其裂解机制》一文中研究指出通过对副溶血弧菌噬菌体VPp1全基因组分析,利用相似性比对数据库BLAST和序列模体数据库,初步推定该基因组的ORF31编码内溶素,预测该开放式阅读框编码一种糖苷水解酶。预测内溶素不含信号肽、跨膜区域。从生物信息学角度推定噬菌体VPp1内溶素的裂解机制可能是联合孔蛋白协同作用裂解细菌肽聚糖。本研究为进一步揭示内溶素生物学特性提供基础数据。(本文来源于《中国渔业质量与标准》期刊2015年05期）
韩峰[8]（2014）在《腐败希瓦氏菌噬菌体Spp001基因序列及其裂解活性研究》一文中研究指出腐败希瓦氏菌被认定为冷藏鲜鱼的特定优势腐败菌，是导致鱼制品的腐败重要因素，因此通过控制腐败希瓦氏菌生长可以延长鱼类食品货架期。内溶素是噬菌体繁殖后期释放子代过程中编码的一类蛋白，能够水解宿主菌细胞壁。内溶素因其高效裂解宿主菌和专一性作用宿主菌已经应用到各个领域中，包括食品保藏。目前传统的保鲜方法中还没有既能专门作用特定腐败菌又能保持产品品质的方法。内溶素有望作为新型生物保鲜剂用于防止细菌感染和控制细菌的生长。前期工作已经证明，噬菌体Spp001用于冷藏牙鲆鱼肉的防腐中可以有效延长鱼类货架期并表现出其应用潜力。为了更深入的认识与噬菌体Spp001裂解性能，本研究在基因水平上，通过对噬菌体Spp001全序列分析，寻找与裂解有关的蛋白，推测其裂解机制，并且建立了共沉法提取含有内溶素的粗酶液的方法及相应的检测方法，分析并验证其裂解活性，测定其酶学性质。本文首次报道了一株新型腐败希瓦氏菌噬菌体Spp001全序列基因信息，噬菌体Spp001的宿主菌为腐败希瓦氏菌Sp225。噬菌体Spp001的基因是双链DNA分子，由54,789-bp组成，一共含有67个开放阅读框，G+C的平均含量为49.42%。通过生物信息学方法分析，对噬菌体Spp001全序列基因进行功能注释。对噬菌体有关裂解基因着重分析，没有找到明确编码穴蛋白的基因，最可能编码内溶素的基因为ORF62。综合分析结果Spp001裂解机制可能是依靠内溶素单独起作用，而不是和孔蛋白共同起作用。为了确定噬菌体Spp001的裂解活性，通过共沉法提取噬菌体Spp001裂解液，并利用浊度法和扩散法分析裂解液的活性。结果表明裂解液中含有内溶素，可使OD590在15min内下降0.160，其底物菌体并未经过任何处理。横向比较裂解液、噬菌体、溶菌酶与死菌、活菌、细胞壁肽聚糖作用15min的裂解效果，结果表明噬菌体Spp001裂解液裂解细胞壁的活性较好，并且能在较短的时间（5min）内发挥作用。通过测定碱性磷酸酶（AKP）含量变化和分析透射电镜图片，得出裂解液可导致菌体细胞壁甚至细胞膜破裂。本研究后期分析噬菌体Spp001裂解液反应最适条件，结果表明：裂解液在pH6-8的范围具有较高的酶活力，最适pH为7。在20-30°C下，有较高的酶活力，最适反应温度为30°C。对浊度法测定酶活条件优化后，可使酶活从160U/mL提高到380U/mL。同时得出裂解液不需要金属离子保持活力并且有一定的耐盐性和耐热，50°C温育24h仍可以测到酶活。另外利用外膜通透剂（0.1%Triton-X-100）处理的菌体基底，辅助裂解液更好的发挥裂解效果，酶活进一步提高至404U/mL。裂解液在4°C下保存9天后失活，-80°C下则损失73.3%。本研究证明Spp001是一株新型腐败希瓦氏菌噬菌体，能够高效表达强裂解活性的内溶素。同时为噬菌体Spp001内溶素的纯化提供理论基础，为扩大Spp001应用范围提供可能性。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2014-05-23）
王太武[9]（2014）在《大肠杆菌噬菌体LSB-1裂解酶基因gp17的表达、抗菌效应分析及优化设计预测》一文中研究指出自噬菌体被发现以来便广发被用于抗菌相关研究。但是自弗莱明于1928年意外发现青霉素作为抗菌药物以后，由于抗生素治疗效果显着，且噬菌体研究不够成熟，利用噬菌体进行抗菌一直处于搁置状态。2001年Nelson等通过重组表达获得了纯化的噬菌体裂解酶并将其作为抗菌物质进行研究。近年来，随着耐药菌的广泛产生以及环境保护面临严峻压力，以及抗生素的研发周期远长于细菌对该物质产生耐药的周期，对噬菌体抗菌功能的探索及应用产品的开发逐渐成为医学研究热点之一。噬菌体的天然抗菌效应和通过分子生物学技术人工修饰的改良产物表现特色给环境净化、水体净化、食物安全及临床抗菌应用开辟了新的发展方向。2013年欧洲还成立了PhagoBurn项目专门用于研究噬菌体治疗烧伤后大肠杆菌和绿脓杆菌感染问题。噬菌体作为细菌病毒，能够特异性识别和裂解细菌，其灭菌效应被越来越多的研究者关注。噬菌体裂解酶作为噬菌体在进入细菌之前溶解细胞壁以及在宿主体内繁殖之后裂解细菌、释放子代噬菌体的关键酶，现正受到越来越多的研究者的重视并对其进行进一步研究。本教研室在医院的污水池中分离到一株大肠杆菌噬菌体并将其命名为LSB-1，初步研究发现了该噬菌体裂解细菌的相关酶基因gp17，并对其进行测序后提交至GenBank（GenBank序列号: KC425724.1）。本研究通过原核表达技术将唾液酸酶基因克隆到质粒pET300构建重组质粒pET300-gp17，然后再将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达，并对表达的蛋白进行纯化，最终获得了gp17基因表达的纯化蛋白。采用KB纸片法对纯化重组蛋白的有效菌谱进行测定，并将测定结果与通过噬菌体展示技术将gp17基因重组到T7噬菌体得到的T7-LSB-gp17重组噬菌体的有效菌谱进行比较，并对其结果进行分析。为了进一步提高酶活性，拟对gp17唾液酸酶的关键氨基酸进行突变以增强其活性，并用AutoDock分子对接软件对替换后的蛋白和唾液酸进行对接以查看替换后蛋白和唾液酸的结合效果。研究内容和结果如下：1．唾液酸酶基因的克隆、表达和纯化：利用基因重组技术将EIEC8401噬菌体LSB-1裂解酶基因gp17构建到表达载体质粒pET300中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达及纯化，最终获得了gp17基因通过重组成功表达出分子量为78kDa的溶解蛋白；利用BCA法测定纯化重组蛋白的含量，纯化后浓度为2.38mg/ml。2．利用抑菌实验检测重组蛋白的抑菌活性：以大肠杆菌、葡萄球菌等多种细菌等为试验菌采用Kirby-Bauer纸片法对重组噬菌体唾液酸酶的有效作用菌谱进行测定，发现重组噬菌体酶对噬菌体宿主菌EIEC8401有良好的抑菌作用，经过5小时的培养能够见到直径约为2cm、明显的抑菌圈，对其他种类的细菌无明显抑菌作用，显示该噬菌体酶具有高度特异性，这种特异性与T7噬菌体展示技术产物（重组噬菌体T7-LSB-gp17较宽的宿主谱）不同。3．采用结构域单独表达法与非保守位点突变法为理论依据设计突变体，通过AutoDock软件分析，结果发现将结构域直接进行表达(突变体2)以及非保守位点124位(突变体6)和167位(突变体7)的天冬酰胺改变为丝氨酸获得的突变体进行表达获得突变体具有结合能更低、与底物结合能力更强。用信息技术对突变体进行显示了生物信息学差异。综上所述，本研究将噬菌体裂解细菌的唾液酸酶进行克隆、表达和纯化获得目的蛋白，进行体外活性检测发现其对EIEC8401有较好的特异性，其结果与通过噬菌体展示技术获得的重组噬菌体T7-LSB-gp17有较大的差异；通过对酶的相关位点进行突变，获得了一系列突变株，采用AutoDock进行对接，预测显示将结构域直接进行表达(突变体2)以及非保守位点124位(突变体6)和167位(突变体7)的天冬酰胺改变为丝氨酸获得的突变体具有较原蛋白更好的结合能力，通过分析认为其活性增加是由于其结构改变引起的，可以进行下一步实验进行验证。本研究的结果为进一步研究该唾液酸酶的功能、机制等方面奠定了一定的基础。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2014-05-01）
张劫,周丽蓉,罗永艾[10]（2013）在《鲍曼不动杆菌噬菌体AB3裂解酶基因的表达及其抗菌活性分析》一文中研究指出目的构建噬菌体AB3裂解酶LysAB3原核表达载体,测定LysAB3对鲍曼不动杆菌的抗菌活性。方法PCR扩增LysAB3基因,以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达LysAB3,金属离子螯合亲和层析法纯化重组蛋白。检测LysAB3的抗菌力、裂解谱、作用的最佳pH和温度,以及对细胞壁肽聚糖的降解力。结果扩散法表明LysAB3对40株鲍曼不动杆菌均有抗菌作用,并可降解其肽聚糖。LysAB3作用的最佳pH为7,最佳温度为25℃。经LysAB3作用后的鲍曼不动杆菌,在(本文来源于《中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编》期刊2013-09-18）
噬菌体裂解基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
噬菌体是感染细菌、古菌及真菌等微生物的病毒。由于其基因组小、机构相对简单、便于基因操作等优点,噬菌体自被发现以来,就被作为基因复制及表达调控研究的模型。噬菌体裂解酶为噬菌体感染宿主后表达释放的一类细胞壁水解酶,通过水解细胞壁肽聚糖而使细菌裂解,并释放出子代噬菌体。传统的抗生素治疗会导致耐药性菌株出现,而噬菌体裂解酶能高效、专一地裂解细菌,使其有望取代传统的抗生素治疗。本文以来源于洱源热泉环境的混合样品ya为材料,将噬菌体混合液超速离心后收集噬菌体,提取噬菌体DNA后交由诺禾致源公司完成测序。测序结果通过FastQC进行测序质量分析和IDBA-UD序列拼接。此后对拼接好的序列与NCBI中基因库进行序列检索分析,获得裂解酶共有1006条序列,分别为amidase、endopeptidase、transglycosylase、glucosaminidase,这四种裂解酶对应的contig数分别是422、306、250和28条,其中具有完整ORF数目分别是94、65、66和8条。将其中碱基序列长度为500-1500 bp翻译成氨基酸序列,并对amidase、endopeptidase、transglycosylase、glucosaminidase 这四种裂解酶的保守结构域进行分析,为后续寻找新的更高效的噬菌体裂解酶以及噬菌体裂解酶的裂解机制奠定基础。此外,本文对亚栖热菌噬菌体MMP17的裂解酶基因mmplysin进行克隆表达和活性分析。裂解酶基因mmplysin序列长度为633 bp,保守结构域显示来自M23肽酶家族。mmplysin经过PCR扩增、连接、转化和诱导重组后,与pET28a构建成重组质粒pET28a-mmplysin。经诱导表达后,得到重组蛋白mmplysin。该重组蛋白在28℃,诱导5h后得最大表达量,重组蛋白的分子量23 kDa左右。该重组蛋白mmplysin最适酶活温度为56-65℃,从37℃到75℃均有酶活,高于大部分已报道的噬菌体裂解酶的最适作用温度;其在pH7-8时活性最强;金属离子对酶的影响研究结果显示,Mn2+,Ca2+,K+存在时导致mmplysin酶活性降低,而Zn2+,Cu2+,Mg2+对酶有激活作用。通过裂解酶mmplysin对不同细菌的抑菌实验发现,重组蛋白mmplysin对噬菌体MMP17宿主菌TG17有明显的抑菌作用,对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都具有一定的抑制作用。在耐药性肺炎克雷伯菌的抑菌实验中,发现其对部分菌株同样具有一定的抑制作用。裂解酶对耐药性肺炎克雷伯菌的抑制作用的原子力显微镜观察表明,酶液作用后会在细胞壁表面形成穿孔从而使得细胞质的流出导致细胞的死亡。本文研究了噬菌体裂解酶的多样性,对裂解酶mmplysin的特征进行研究,为后续高温裂解酶在实际生活中的应用提供了一定的实验依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
噬菌体裂解基因论文参考文献
[1].刘珊娜,葛怀娜,刘金福.李斯特菌噬菌体裂解酶基因在大肠杆菌中的表达[J].中国食品学报.2018
[2].周少威.洱源热泉噬菌体裂解酶基因多样性及裂解酶基因mmplysin的克隆表达[D].昆明理工大学.2017
[3].郑辉.屎肠球菌裂解性噬菌体Ec-ZZ2全基因序列的初步分析[D].吉林大学.2017
[4].张倩,张湘莉兰,孙耀强,于会举,张培生.奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌裂解性噬菌体裂解酶LysIMEP5基因的克隆及序列分析[J].中国兽药杂志.2016
[5].查涛,梁俊容,肖玉春,景怀琦.噬菌体phiYe-F10的裂解谱的测定以及裂解能力与宿主毒力基因间关系分析[J].病毒学报.2016
[6].卢国民,张灿,邹玲,刘文华,温建新.噬菌体vB_EcoM-Bp7裂解酶基因的密码子使用偏性分析[J].中国畜牧兽医.2015
[7].金延秋,庄松娟,林洪,王静雪,孙翌.利用生物信息学技术预测副溶血弧菌噬菌体VPp1内溶素基因及其裂解机制[J].中国渔业质量与标准.2015
[8].韩峰.腐败希瓦氏菌噬菌体Spp001基因序列及其裂解活性研究[D].中国海洋大学.2014
[9].王太武.大肠杆菌噬菌体LSB-1裂解酶基因gp17的表达、抗菌效应分析及优化设计预测[D].第叁军医大学.2014
[10].张劫,周丽蓉,罗永艾.鲍曼不动杆菌噬菌体AB3裂解酶基因的表达及其抗菌活性分析[C].中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编.2013