导读:本文包含了噬菌体展示肽库论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:噬菌体,荧光,免疫,家兔,病毒,靶向,分枝。
噬菌体展示肽库论文文献综述
何海汛,陈威,李丹,孙国鹏,李鹏[1]（2019）在《利用噬菌体展示随机肽库筛选与犬PD-1和PD-L1结合的多肽》一文中研究指出研究目的:癌症是致犬死亡的常见病之一。目前治疗犬肿瘤的方法有手术、化疗和放疗。除此之外现已开发出了一些针对免疫检查点的靶向抗体药物,并在体外和体内进行了测试,如程序性细胞死亡受体1(Programmed cell death protein 1,PD-1),它是一种重要免疫抑制分子。PD-L1(programmed death ligand 1,CD274)是PD-1的天然配体。PD-1/PD-L1结合激活通路后,在癌症、病毒感染、器官移植方面会抑制免疫系统发挥功能。阻断PD-1和PD-L1(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
叶长烂,周霞,谢浩然,马金魁,张宏斌[2]（2019）在《噬菌体展示随机环八肽库的构建》一文中研究指出目的构建表达于噬菌体表面的随机环八肽库。方法通过自行设计,人工合成编码随机环八肽的寡核苷酸片段,通过延伸引物扩增获得编码随机环八肽的基因片段。将编码基因片段和M13KE噬菌体载体经过EagⅠ和KpnⅠ限制性内切酶双酶切后进行连接,重组产物电转入大肠杆菌ER2738感受态细胞获得噬菌体展示随机环八肽库,噬斑及测序检测库容和多样性。结果构建的环八肽库库容超过7.5×109,重组阳性率为92.5%,不同率为97.3%。结论成功构建了库容量与多样性都满足筛选要求的噬菌体展示随机环八肽库。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2019年14期）
左园园,宋艳华,姜平,王芳,胡波[3]（2016）在《家兔出血症病毒VP60基因特异性噬菌体展示肽库的构建及鉴定》一文中研究指出本研究旨在构建家兔出血症病毒VP60基因特异性噬菌体展示肽库,并选用已知表位序列的单克隆抗体对VP60基因特异性肽库进行鉴定,以确定所构建肽库的特异性和丰富性。利用DNA酶Ⅰ随机消化法构建VP60基因噬菌体随机肽库。采用生物淘选和噬菌体原位杂交技术,选用1B8、1D4、5H3和A3C 4株纯化的单克隆抗体对该肽库进行抗原表位的鉴定。结果显示,所构建多肽库的滴度约为2.6×1012 PFU/m L,能够满足鉴定VP60蛋白的抗原表位的要求,同时鉴定到4条与VP60蛋白高度同源的序列,分别为N(326)PISQV(331)、D(338)MSFV(342)、K(562)STLVFNL(569)和G(25)TTTDGMDPGVVAA(38),与已知单抗所对应的表位序列高度同源。本研究成功构建了家兔出血症病毒VP60基因特异性随机肽库,选用已知表位序列的单克隆抗体对构建的肽库进行鉴定,鉴定到的表位与目前已经报道的单抗针对的表位序列高度同源,表明所构建肽库的特异性和丰富性良好,为进一步筛选和丰富VP60抗原表位奠定基础,还可用于VP60与受体结合域的鉴定,对阐述RHDV的感染、致病和免疫保护机制具有重要意义。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2016年12期）
邬兰,杜同信,俞杨,焦杰,王自正[4]（2016）在《定量PCR技术快速分析噬菌体展示肽库的应用》一文中研究指出目的建立无需转染菌株的快速定量方法,用以分析噬菌体展示肽库筛选。方法选取Ph.D.-C7C噬菌体展示肽库,进行梯度稀释并提取基因组,在其载体序列上设计一对通用引物,运用SYBR Green的方法进行荧光定量PCR扩增,通过计算该方法的特异性、精密度和线性范围来确定该检测方法的可行性。结果通过溶解曲线得知该对引物可特异性筛选噬菌体展示七肽库。通过计算每个浓度的Ct值及其偏差可发现,该体系在2×10~4pfu/m L~2×10~(10)pfu/m L的浓度范围内线性关系良好,且在2×10~5pfu/m L~2×10~(10)pfu/m L的浓度范围内批间不精密度小于15%。结论建立的荧光定量PCR体系可以避免转染菌株所带来的繁琐人工劳动,并可以特异、准确、快速的对噬菌体展示肽库进行定量分析。(本文来源于《标记免疫分析与临床》期刊2016年10期）
史云龙,刘永明[5]（2016）在《噬菌体展示随机肽库技术的医学研究应用》一文中研究指出噬菌体展示随机肽库是将编码外源性多肽的DNA序列插入噬菌体外壳蛋白基因,产生由数十亿种随机肽段与噬菌体外壳蛋白以融合形式呈现在噬菌体表面的重组噬菌体库。近年来,噬菌体展示随机肽库已成为筛选蛋白和多肽的重要生物技术,并被广泛应用于医学研究。笔者就其在肿瘤和自身免疫性疾病研究以及疫苗研制中的应用现状进行综述。(本文来源于《华夏医学》期刊2016年03期）
陈浩[6]（2015）在《应用噬菌体展示肽技术筛选尘螨变应原B细胞表位模拟肽及其体内外生物学功能的研究》一文中研究指出尘螨是引起变应性疾病的主要变应原,用尘螨变应原提取物进行临床检测和特异性免疫治疗应用广泛。然而尘螨提取物受原材料和提取技术等因素的影响,在蛋白成分、含量及纯度等方面差异性大,直接影响了临床诊断的准确性以及特异性免疫治疗的疗效和安全性。本研究中,我们抛开对变应原本身的研究,用尘螨变应原阳性患者血清中针对尘螨的特异性IgE抗体为钓饵,进行由果到因的反推。通过噬菌体展示随机肽技术进行阴阳双重筛选,得出与尘螨特异性IgE结合的模拟肽。首先用尘螨变应原IgE阴性的过敏患者血清中IgE进行阴性筛选排除IgE保守的重链结合肽,再用尘螨阳性患者血清中IgE为钓饵,得到和IgE抗体高变区结合的尘螨B细胞线性以及构象表位模拟肽库。为了验证筛选的尘螨B细胞表位模拟肽的体内生物学功能,我们利用户尘螨诱发的变应性鼻炎伴支气管哮喘小鼠模型,观察所筛选的尘螨B细胞表位模拟肽1,2与3对小鼠模型气道炎症的治疗作用,为进一步研制和开发尘螨特异性免疫治疗的B细胞表位疫苗提供实验依据。一、与尘螨IgE结合的噬菌体的筛选1、噬菌体的亲和筛选：以尘螨IgE阴性的过敏患者血清IgE为诱饵进行阴性筛选,获得不能结合的噬菌体,然后再以尘螨阳性患者血清IgE抗体为诱饵进行阳性筛选,选出能够结合的噬菌体。在筛选过程中,通过降低钓饵的浓度、减少钓饵与肽库作用时间、增加洗脱强度,去除不能与尘螨IgE结合和与尘螨IgE结合较弱的噬菌体,经叁轮筛选后得到富集程度较高的分别与尘螨IgE特异性结合的噬菌体克隆。2、挑选与IgE特异性结合的噬菌体克隆：从经过阴性和阳性筛选后的洗脱物中随机挑选出100个噬菌体单克隆,通过ELISA技术进一步鉴定其与尘螨IgE结合的特异性,结果得到84个能与尘螨IgE特异性结合的噬菌体。3、DNA测序与多肽合成：将84个噬菌体克隆进行DNA测序后,除去相同序列以及克隆无效的序列,最后获得44个噬菌体克隆。将这44个噬菌体单克隆的DNA序列与尘螨主要变应原分子Der p1, Der p2, Der p5与Der p7的叁维结构通过软件比对,将3个特异性强且氨基酸序列与尘螨主要变应原比对性高的噬菌体单克隆合成模拟肽。二、 户尘螨模拟环肽对实验性变应性鼻炎伴支气管哮喘模型的作用以户尘螨诱导的变应性鼻炎伴哮喘的小鼠为模型,观察3个合成模拟肽在体内对变应性鼻炎伴支气管哮喘的干预作用,设正常对照组,变应性鼻炎伴哮喘模型组以及模拟肽干预组1/2/3。100μ1户尘螨提取液滴鼻致敏后,正常对照组以生理盐水滴鼻激发,模型组与模拟肽干预组以100μ1户尘螨提取液激发。模拟肽干预组采用合成肽(500μg合成肽+200μ1 PBS)溶液皮下注射连续给药干预(1次／天)4天。再次激发后处死小鼠,进行一系列观察与检测,结果如下：1、模拟肽干预组小鼠的抓鼻、流清涕、打喷嚏的症状明显改善,无口唇发绀、喘气以及呼吸频率加快等症状。2、模拟肽干预组气道阻力较模型组明显降低。3、模拟肽干预组鼻黏膜上皮细胞完整,无柱状和杯状细胞增生,黏膜下层无腺体增生、无中性粒细胞、淋巴细胞浸润,仅有少量嗜酸性粒细胞；模拟肽干预组肺组织血管与支气管炎症浸润明显减少、气道上皮结构好转。4、模拟肽干预组1、2、3鼻黏膜上皮IL-25mRNA、IL-33mRNA水平明显低于模型组；模拟肽干预组肺组织中IL-25mRNA、IL-33mRNA水平明显低于模型组。5、模拟肽干预组鼻腔与支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞均显着低于模型组。6、鼻腔灌洗液：模拟肽干预组IL-4水平明显低于模型组,干预组2、3 IL-10水平明显高于模型组,干预组3中IL-25水平明显低于模型组,干预组IFN-γ水平明显高于模型组；肺泡灌洗液：模拟肽干预组IL-4水平明显低于模型组,干预组1、3 IL-10水平明显高于模型组,干预组IL-25水平明显低于模型组,干预组1、2中IL-33水平明显低于模型组,干预组1、3中IFN-γ水平明显高于模型组。7、模拟肽干预组血清户尘螨特异性IgE抗体水平明显低于模型组,而IgG1抗体水平则明显高于模型组。综上所述,应用噬菌体展示技术成功筛选到尘螨B细胞表位模拟肽,且筛选到的模拟肽能显着减轻尘螨诱导小鼠变应性气道炎症的病理损伤,改善症状,有效抑制鼻腔与肺组织中炎性细胞的浸润,减少促炎细胞因子的分泌,降低尘螨特异性IgE水平,提高保护性抗体IgG1水平。本研究为进一步研制和开发尘螨特异性免疫治疗的表位疫苗提供实验依据。(本文来源于《华中科技大学》期刊2015-10-20）
杨华,王洁,刘忠华,沙巍,秦莲花[7]（2015）在《结核病血清学检测用噬菌体展示肽的筛选及应用研究》一文中研究指出目的借助噬菌体展示随机肽库技术筛选结核抗体靶向肽,对噬菌体展示肽在结核病血清学检测中的应用价值进行评估。方法采用两种策略,以分离纯化后的结核病人特异性抗体IgG为靶分子,对噬菌体展示随机肽库进行亲和筛选,通过ELISA和血清样本检测鉴定获得结核特异性抗体IgG结合肽。在获得MTB关键抗原模拟表位肽和血清抗体IgG结合肽的基础上,同步检测不同多肽与结核病人血清抗体的亲合性差异,评估不同多肽的灵敏度和特异性,获得最佳检测多肽组合。结果以结核特异性抗体IgG为靶分子,进行两种策略筛选后,共获得20种展示不同序列的单噬菌体。间接ELISA检测结果表明单噬菌体H12、TB6、TB15和TB18均与结核病人IgG具有较高的亲和力(S/N≥2.1),确定为阳性克隆。应用抗体结合肽H12、TB6、TB15和TB18,分别建立间接ELISA检测方法,对147份结核病人血清、157份对照血清的检测敏感性分别为59.9%,49.7%,45.6%,59.2%;特异性分别为95.5%、96.8%,96.2%和94.9%。对7种噬菌体展示肽E5,M2,M6,H12,TB6,TB15,TB18进行血清学检测评估,E5(敏感性54.5%,特异性91.8%),M6(敏感性13.6%,特异性93.9%),TB6(敏感性22.7%,特异性93.9%)表现出相对较高的检测价值。放大样本评估后确定E6,TB6的检测效果最好,若以E6,TB6任一种检测阳性进行统计,则敏感性可达59.8%,特异性达到89.4%。结论利用噬菌体展示随机肽库淘选获得了4个结核特异性抗体IgG结合肽,通过血清样本评估检测,显示出较好的敏感性和特异性,为以多肽为基础探索新的结核病血清学诊断方法提供了依据。(本文来源于《第六届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文汇编》期刊2015-09-03）
惠晓丽,梁树辉,刘洋,刘惊涛,吴开春[8]（2015）在《体内示踪技术评价噬菌体展示肽GX1特异靶向胃癌新生血管》一文中研究指出目的:评价噬菌体展示肽GX1与胃癌新生血管结合的特异性及体内靶向性。方法:化学合成BioGX1展示肽;构建人胃癌移植瘤裸鼠模型,A组将Bio-GX1展示肽经尾静脉注入荷瘤小鼠体内,分别于体内循环8h、12h、18h、24h时处死裸鼠,B组将GX1噬菌体经尾静脉注入荷瘤小鼠体内,于体内循环8min时处死裸鼠,免疫荧光方法检测GX1噬菌体及展示肽与胃癌血管体内结合特异性及靶向性;构建小鼠肾包膜下胃癌移植瘤模型,分别于移植瘤术后第5天、第10天经尾静脉注入Bio-GX1展示肽,体内循环8h处死小鼠,免疫荧光方法检测GX1与胃癌血管体内结合的特异性及靶向性。结果:GX1展示肽体内循环8-24h,GX1噬菌体体内循环8min,可特异靶向人胃癌移植瘤裸鼠胃癌组织血管,而与肝、心、脾、肾(脑)、肺、肌肉组织等对照组织血管未见明显结合;GX1展示肽体内循环8h,可特异靶向小鼠肾包膜下胃癌移植瘤模型肿瘤血管,与对照组织血管未见明显结合。结论:GX1噬菌体及展示肽均可在体内特异靶向胃癌血管,具有体内胃癌血管靶向性,可作为胃癌血管靶向治疗及诊断的有效候选分子。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2015年14期）
刘思雪,胡梅,叶小研,黄花荣,钟英强[9]（2015）在《应用噬菌体展示肽库技术淘选大鼠CCR5膜外第一、二胞外环特异性结合的活性拮抗肽与初步鉴定》一文中研究指出目的:利用噬菌体展示肽库技术淘选与大鼠CC趋化因子受体5(CCR5)膜外第一、二胞外环特异性结合的短肽,并鉴定其与CCR5的结合能力。方法:在蛋白质数据库中查得大鼠CCR5第一、二胞外环的氨基酸序列,合成相应的线性短肽作为淘选的靶分子,利用噬菌体展示7肽文库进行3~4轮淘选,用ELISA法鉴定所选肽与靶分子的结合,并测定其与浓度的关系。结果:与CCR5第一、二胞外环特异性结合的噬菌体展示的短肽序列分别为GHWKVWL和HYIDFRW,ELISA鉴定呈阳性反应,且短肽与靶分子的结合具有浓度依赖性和可饱和性。结论:利用噬菌体展示技术成功获得了2条CCR5特异性结合的短肽,并在体外证明其可与CCR5第一、二胞外环具有结合能力。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2015年07期）
华修德,施海燕,王鸣华[10]（2014）在《噬菌体展示肽库技术及其在农药残留免疫分析中的研究进展》一文中研究指出噬菌体展示技术是一种特殊的基因工程重组表达技术,已经作为一种强大的工具运用在不同的研究中,包括筛选抗体和酶的配体、筛选小分子的受体、基因工程抗体等。免疫分析作为农药残留快速筛查技术被广泛研究,利用抗体从噬菌体展示肽库中淘选竞争物,可以加快异源免疫分析方法的建立;利用抗原抗体复合物从噬菌体展示肽库中淘选抗免疫复合体多肽,可建立非竞争免疫分析方法,丰富农药的免疫分析模式。本文从噬菌体展示技术的原理、噬菌体展示肽库的构建和噬菌体展示肽库的筛选方面概述了噬菌体展示肽库技术;从模拟表位筛选、抗免疫复合体筛选和新免疫分析方法方面阐述了噬菌体展示肽库技术在农药等小分子免疫分析中的应用;并对噬菌体展示肽库技术的研究和应用前景进行了展望。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2014年12期）
噬菌体展示肽库论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建表达于噬菌体表面的随机环八肽库。方法通过自行设计,人工合成编码随机环八肽的寡核苷酸片段,通过延伸引物扩增获得编码随机环八肽的基因片段。将编码基因片段和M13KE噬菌体载体经过EagⅠ和KpnⅠ限制性内切酶双酶切后进行连接,重组产物电转入大肠杆菌ER2738感受态细胞获得噬菌体展示随机环八肽库,噬斑及测序检测库容和多样性。结果构建的环八肽库库容超过7.5×109,重组阳性率为92.5%,不同率为97.3%。结论成功构建了库容量与多样性都满足筛选要求的噬菌体展示随机环八肽库。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
噬菌体展示肽库论文参考文献
[1].何海汛,陈威,李丹,孙国鹏,李鹏.利用噬菌体展示随机肽库筛选与犬PD-1和PD-L1结合的多肽[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
[2].叶长烂,周霞,谢浩然,马金魁,张宏斌.噬菌体展示随机环八肽库的构建[J].国际检验医学杂志.2019
[3].左园园,宋艳华,姜平,王芳,胡波.家兔出血症病毒VP60基因特异性噬菌体展示肽库的构建及鉴定[J].中国兽医科学.2016
[4].邬兰,杜同信,俞杨,焦杰,王自正.定量PCR技术快速分析噬菌体展示肽库的应用[J].标记免疫分析与临床.2016
[5].史云龙,刘永明.噬菌体展示随机肽库技术的医学研究应用[J].华夏医学.2016
[6].陈浩.应用噬菌体展示肽技术筛选尘螨变应原B细胞表位模拟肽及其体内外生物学功能的研究[D].华中科技大学.2015
[7].杨华,王洁,刘忠华,沙巍,秦莲花.结核病血清学检测用噬菌体展示肽的筛选及应用研究[C].第六届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文汇编.2015
[8].惠晓丽,梁树辉,刘洋,刘惊涛,吴开春.体内示踪技术评价噬菌体展示肽GX1特异靶向胃癌新生血管[J].现代肿瘤医学.2015
[9].刘思雪,胡梅,叶小研,黄花荣,钟英强.应用噬菌体展示肽库技术淘选大鼠CCR5膜外第一、二胞外环特异性结合的活性拮抗肽与初步鉴定[J].中国病理生理杂志.2015
[10].华修德,施海燕,王鸣华.噬菌体展示肽库技术及其在农药残留免疫分析中的研究进展[J].食品安全质量检测学报.2014
论文知识图
