导读:本文包含了仙台病毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:仙台,病毒,免疫,大鼠,荧光,载体,实时监控。
仙台病毒论文文献综述
孟钰榕,郑龙,祝岩波,王璇,尤红煜[1](2019)在《大鼠冠状病毒和仙台病毒的双重PCR检测方法的建立与应用》一文中研究指出目的建立快速检测实验大鼠冠状病毒和仙台病毒的双重PCR方法。方法根据大鼠冠状病毒N基因、仙台病毒L基因设计特异性引物;经过双重PCR优化,特异性和敏感性的检测,建立双重PCR体系。应用该PCR体系检测人工感染仙台病毒组织DNA样本和实验动物组织样本,并与ELISA方法比对。结果双重PCR扩增出大鼠冠状病毒(168 bp)和仙台病毒(262 bp)目的条带,PCR扩增产物测序结果利用核酸BLAST功能进行同源序列对比,仙台病毒和大鼠冠状病毒同源性分别为100%和99%。仙台病毒和大鼠冠状病毒的检测下限为1.56×10~2 copies/μL。特异性检测对小鼠肝炎病毒扩增,产生片段大小近似大鼠冠状病毒产物。应用建立的双重PCR体系检测人工感染仙台病毒组织DNA样本,30份DNA标本均被检出;检测94份实验动物肺组织样本,结果均阴性。结论建立的双重PCR方法操作简单、快速、特异性强、灵敏度高,能够实现对实验动物仙台病毒和大鼠冠状病毒病原体的快速检测。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2019年02期)
关文竹[2](2018)在《嵌合并复制缺陷的稳定性仙台病毒为载体的呼吸道合胞病毒疫苗可不诱导小鼠疾病的增强》一文中研究指出呼吸道合胞病毒(RSV)是儿童和老年人严重呼吸道感染的主要病原体,且没有市售的疫苗。在此研究中,作者研制和分析了以基因组复制缺陷的新型仙台病毒(Se V)载体为基础的RSV的亚单位疫苗。作者将已知的基因稳定的抗原RSV F蛋白以特定的方式插入其载体中以优化疫苗的特性。通过将RSV F蛋白的胞外域与Se V中它的相对物进行交换,作者构建了一种嵌合载体疫苗,其包含作为必需结构成分的RSV F蛋白。用这种方(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2018年04期)
陈则东,沈晓鹏,穆洪云,张泉[3](2018)在《灭活仙台病毒体内外诱导顺铂耐药性肺腺癌A549/DDP细胞凋亡》一文中研究指出目的顺铂(DDP)被广泛应用于肺癌的化疗。然而,顺铂抵抗性代表着临床有效治疗的最主要障碍。本实验室前期工作证明灭活仙台病毒(HVJ-E)具有诱导黑色素瘤细胞(B16)凋亡,与对照组相比明显减小荷瘤小鼠的肿瘤体积的作用。该研究主要用于探讨HVJ-E对于顺铂抵抗性肺腺癌A549/DDP细胞是否具有诱导凋亡的作用。方法体外实验,将HVJ-E与A549/DDP细胞体外共培养,通过流式细胞术检测HVJ-E对A549/DDP细胞凋亡的影响;体内实验,将HVJ-E注射到肿瘤内,通过组织切片TUNEL法以及测量肿瘤体积大小观察HVJ-E的溶瘤效果。结果体外实验流式细胞术检测在12 h、24 h、36 h,A549/DDP晚期凋亡率分别为7.7%、12.6%、18.9%,且12 h与24 h、24 h与36 h的晚期凋亡率差异均有显着性;体内实验TUNEL法检测显示实验组与对照组相比有较多的肿瘤细胞凋亡;同时瘤内注射实验显示实验组肿瘤体积远小于对照组。结论实验结果表明灭活的HVJ-E在体内外均具有诱导A549/DDP细胞凋亡的作用,同时通过瘤内注射能够显着减小肿瘤体积。(本文来源于《中国比较医学杂志》期刊2018年03期)
张欢欢,余陈欢,戴方伟,马月,郎秋蕾[4](2017)在《仙台病毒核酸测序检测方法的建立》一文中研究指出目的建立仙台病毒(SeV)的核酸测序检测方法。方法根据SeV序列设计覆盖不同毒株的通用引物,然后优化成测序引物并摸索建库条件,进行核酸测序和结果分析。结果获得1对特异性强的通用引物,序列为:上游引物5'-GCTGCAAAACGCTGTGGG-3',下游引物5'-TGGRACYTCAGAAAGAATRGG-3';建库条件优化为:第一轮以cDNA为模板用通用引物扩增,第二轮以第一轮产物为模板用测序引物扩增。测序分析可以有效地将SeV与其他微生物区分开,并且精确到TianJin亚株。结论建立了SeV核酸测序检测方法,为后续SeV感染实验动物的检验检疫提供依据。(本文来源于《实验动物与比较医学》期刊2017年03期)
李晓波,付瑞,王洪,王吉,卫礼[5](2017)在《实验大鼠仙台病毒抗体检测能力验证结果评价》一文中研究指出目的了解全国实验动物检测相关实验室在大鼠仙台病毒抗体检测项目的技术水平,发现并解决检验中存在的问题,促进各实验室加强质量管理,提高检测水平。方法制备大鼠血清样品,经过标定后分装,按照CNAS的要求进行均一性和稳定性验证,标定好的样品随机编号并随机发放给各参加实验室,每个实验室3个样本,在规定时间内反馈结果,结果以阳性或阴性表示,与预期结果均一致判为满意结果,不完全一致或逾期未反馈结果判为不满意。结果来自18个省市自治区的28家单位报名参加本次比对实验,均在规定时间反馈了结果,其中25家单位获得满意结果,占参加比对实验室的89.3%;结果不满意的3家单位,其中1家有1个样品与预期结果不符,另外2家均有2个样品与结果不符。28家单位中有27家采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,另外1家用免疫荧光法(IFA)检测。反馈的原始记录总体真实可信,个别参加单位存在检测试剂来源不清、操作过程不详及阳性结果未进行复检等问题。结论各实验动物检测机构大鼠仙台病毒总体检测能力较高,本次能力验证计划的实施能够反映实验室的检测水平。(本文来源于《中国药学会第四届药物检测质量管理学术研讨会资料汇编》期刊2017-04-19)
李晓波,付瑞,王洪,王吉,卫礼[6](2017)在《实验大鼠仙台病毒抗体检测能力验证结果评价》一文中研究指出目的了解全国实验动物检测相关实验室在大鼠仙台病毒抗体检测项目上的技术水平,发现并解决检验中存在的问题,促进各实验室加强质量管理,提高检测水平。方法制备标准实验大鼠血清样品,经过标定后分装,按照CNAS的要求进行均一性和稳定性验证,标定好的样品随机编号并随机发放给各参加实验室,每个实验室3个样本,在规定时间内反馈结果,结果以阳性或阴性表示,与预期结果均一致者判为满意结果,不完全一致或逾期未反馈结果者判为不满意。结果来自18个省市自治区的28家单位报名参加本次比对实验,均在规定时间反馈了结果,其中25家单位获得满意结果,占参加比对实验室的89.3%;结果不满意的3家单位,其中1家有1个样品与预期结果不符,另外2家均有2个样品与结果不符。28家单位中有27家采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,另外1家用免疫荧光法(IFA)检测。反馈的原始记录总体真实可信,个别参加单位存在检测试剂来源不清、操作过程不详及阳性结果未进行复检等问题。结论各实验动物检测机构大鼠仙台病毒总体检测能力较高,本次能力验证计划的实施能够反映实验室的检测水平。(本文来源于《实验动物科学》期刊2017年01期)
周洁,赵丽娟,陶凌云,胡建华,高诚[7](2016)在《仙台病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立》一文中研究指出目的建立一种快捷、灵敏的检测方法,即反转录-环介导等温扩增方(RT-LAMP)用于仙台病毒(SeV)的检测。方法根据GenBank公布的SeV序列(DQ219803.1),在其保守区域设计了六套LAMP引物,利用LAMP RealTime Turbidimeter LA-320C仪监测反应进程并筛选最佳引物、反应条件,建立对SeV核酸进行特异性扩增的RT-LAMP检测方法,并可通过加入目测荧光检测试剂肉眼判断结果。对所建立的方法进行了敏感性、特异性评估并对92份样品进行了检测。结果该方法在63C恒温下作用60 min,SeV RNA获得了高效率的特异性扩增,与其余常见小鼠病毒无交叉反应;最低检出量为2.1TCID_(50)SeV,比RT-PCR方法高10~2倍;肉眼判断结果与RealTime Turbidimeter LA-320仪监测结果一致;通过对92份样品的RT-LAMP,RT-PCR和间接ELISA方法的检测比对,叁者符合率为100%。结论本研究建立的SV RTLAMP检测方法具有快速、特异、灵敏,操作简单的特点,具有良好的应用前景。(本文来源于《第十二届中国实验动物科学年会(2016·南宁)论文集》期刊2016-10-08)
付志浩,李永红,高凯,饶春明,王军志[8](2016)在《仙台病毒载体的研究与应用进展》一文中研究指出仙台病毒(Sendai virus,Se V)属于副粘病毒科呼吸道病毒属,基因组为不分节段的单负链RNA,编码NP,P,M,F,HN,L等11个蛋白。应用反向遗传学构建的仙台病毒载体是新兴的RNA病毒载体,由于其宿主范围广、表达量高、胞质表达、安全性好等诸多优点,目前广泛用于基因治疗药物和疫苗研究。本文从仙台病毒的基因组分子结构、致病性和免疫原性、载体的构建和类型以及其应用等方面进行详细论述。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2016年14期)
周洁,赵丽娟,陶凌云,倪丽菊,高诚[9](2016)在《仙台病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立》一文中研究指出目的建立一种快捷、灵敏的检测方法,即反转录-环介导等温扩增方(RT-LAMP)用于仙台病毒(SeV)的检测。方法根据Gen Bank公布的SeV序列(DQ219803.1),在其保守区域设计了六套LAMP引物,利用LAMP Real-Time Turbidimeter LA-320C仪监测反应进程并筛选最佳引物、反应条件,建立对SeV核酸进行特异性扩增的RT-LAMP检测方法,并可通过加入目测荧光检测试剂肉眼判断结果。对所建立的方法进行了敏感性、特异性评估并对92份样品进行了检测。结果该方法在63℃恒温下作用60 min,SeV RNA获得了高效率的特异性扩增,与其余常见小鼠病毒无交叉反应;最低检出量为2.1TCID_(50) SeV,比RT-PCR方法高102倍;肉眼判断结果与RealTime Turbidimeter LA-320仪监测结果一致;通过对92份样品的RT-LAMP,RT-PCR和间接ELISA方法的检测比对,叁者符合率为100%。结论建立的SV RT-LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏,操作简单的特点,具有良好的应用前景。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2016年03期)
王会娟[10](2016)在《小鼠绿脓杆菌和仙台病毒LAMP检测方法的建立及其初步应用》一文中研究指出实验动物是生命科学研究中最基本的四大支撑要素之一,动物实验科学研究的重复性和准确性要有实验动物的质量作保障。在现代医学研究和生命科学研究中,小鼠是最常用的实验动物,其微生物质量将直接影响实验结果的准确性。根据GB14922.2-2011规定,小鼠绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是无特定病原体(specific pathogen free animal,SPF)实验小鼠的必须检测的项目之一;仙台病毒(Sendai virus,SeV)是清洁级实验小鼠的必须检测的项目之一。目前,已经报道的检测小鼠绿脓杆菌和仙台病毒的方法有:分离培养、RT-PCR、酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunoabsorbent Assay,ELISA)等。传统的分离培养方法准确性高,但该方法操作繁琐、费力、耗时,且检出率低,易出现假阴性。RT-PCR和ELISA检测方法灵敏度高,但该方法对仪器要求较高,易出现假阳性。本研究应用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),分别根据小鼠绿脓杆菌和仙台病毒基因组的高度保守序列,采用PrimerExpler V4软件设计LAMP的6条特异性引物,通过优化其反应体系条件,分别建立了小鼠绿脓杆菌LAMP检测方法和小鼠仙台病毒lamp检测方法,并对其方法的特异性、稳定性、重复性、灵敏度依次进行验证,且初步应用于临床检测。本研究主要有两部分组成。第一部分小鼠绿脓杆菌lamp检测方法的建立及其初步应用目的建立一种实验小鼠绿脓杆菌(pa)的环介导等温扩增(lamp)检测方法。方法采用环介导等温扩增(lamp)技术,以小鼠pa的oprl基因的序列为靶基因,采用primerexploerv4软件设计了两套lamp引物,其中每套引物包含6条特异性序列,应用dna提取试剂盒提取padna,通过优化lamp反应体系条件建立小鼠pa特异性的lamp检测方法(pa/lamp)。同时,对该方法的特异性、稳定性、重复性、灵敏度进行验证,并初步应用于临床检测。结果所建立的pa/lamp方法可特异性的检测出pa/dna,对其它常见病原体均为阴性;pa/lamp能检测出不同批次同一时间或同一批次不同时间的pa/dna;pa/lamp检测pa/dna的最低检测含量为0.29pg,与pcr检测方法相比较,其灵敏度高约105倍;临床检测,pa的阳性率为27.7%(10/36);全部反应可在1h内完成;通过添加荧光染料sybrgreeni可直观目测实验结果。结论建立的pa/lamp方法,具有特异、准确、灵敏、快速、简便的特点,可用于实验小鼠pa的快速检测。第二部分小鼠仙台病毒lamp检测方法的目的建立一种实验小鼠仙台病毒(sev)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法采用环介导等温扩增(LAMP)技术,以小鼠SeV(gi:9627219)F蛋白的基因序列为目标基因,采用PrimerExploer V4软件设计LAMP的6条特异性引物,应用病毒RNA提取试剂盒提取SeV RNA,通过优化LAMP反应体系条件,建立小鼠SeV的LAMP检测方法(SeV/LAMP)。同时,对该方法的特异性、稳定性、重复性、灵敏度进行验证,并初步应用于临床检测。结果所建立的SeV/LAMP方法可检测出SeV RNA,对其它常见病原体均判为阴性;SeV/LAMP能检测出不同批次同一时间或同一批次不同时间的SeV RNA;SeV/LAMP检测SeV RNA的最低检测含量为0.33 pg,与ELISA检测方法相比较,其检出率高(分别为5/30和2/30);临床检测,SeV的阳性率为27.5%(11/40);全部反应可在1 h内完成;通过添加荧光染料SYBR Green I可直观目测实验结果。结论建立的LAMP方法,具有特异、准确、灵敏、快速、简便的特点,可用于实验小鼠SeV的快速检测。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2016-05-01)
仙台病毒论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
呼吸道合胞病毒(RSV)是儿童和老年人严重呼吸道感染的主要病原体,且没有市售的疫苗。在此研究中,作者研制和分析了以基因组复制缺陷的新型仙台病毒(Se V)载体为基础的RSV的亚单位疫苗。作者将已知的基因稳定的抗原RSV F蛋白以特定的方式插入其载体中以优化疫苗的特性。通过将RSV F蛋白的胞外域与Se V中它的相对物进行交换,作者构建了一种嵌合载体疫苗,其包含作为必需结构成分的RSV F蛋白。用这种方
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
仙台病毒论文参考文献
[1].孟钰榕,郑龙,祝岩波,王璇,尤红煜.大鼠冠状病毒和仙台病毒的双重PCR检测方法的建立与应用[J].中国实验动物学报.2019
[2].关文竹.嵌合并复制缺陷的稳定性仙台病毒为载体的呼吸道合胞病毒疫苗可不诱导小鼠疾病的增强[J].微生物学免疫学进展.2018
[3].陈则东,沈晓鹏,穆洪云,张泉.灭活仙台病毒体内外诱导顺铂耐药性肺腺癌A549/DDP细胞凋亡[J].中国比较医学杂志.2018
[4].张欢欢,余陈欢,戴方伟,马月,郎秋蕾.仙台病毒核酸测序检测方法的建立[J].实验动物与比较医学.2017
[5].李晓波,付瑞,王洪,王吉,卫礼.实验大鼠仙台病毒抗体检测能力验证结果评价[C].中国药学会第四届药物检测质量管理学术研讨会资料汇编.2017
[6].李晓波,付瑞,王洪,王吉,卫礼.实验大鼠仙台病毒抗体检测能力验证结果评价[J].实验动物科学.2017
[7].周洁,赵丽娟,陶凌云,胡建华,高诚.仙台病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立[C].第十二届中国实验动物科学年会(2016·南宁)论文集.2016
[8].付志浩,李永红,高凯,饶春明,王军志.仙台病毒载体的研究与应用进展[J].中国新药杂志.2016
[9].周洁,赵丽娟,陶凌云,倪丽菊,高诚.仙台病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立[J].中国实验动物学报.2016
[10].王会娟.小鼠绿脓杆菌和仙台病毒LAMP检测方法的建立及其初步应用[D].重庆医科大学.2016