2A肽介导的割手密ScNAC1、ScDREB融合基因表达载体构建

论文摘要

【目的】本研究旨在构建适合甘蔗遗传转化的双基因表达载体,用于提高甘蔗栽培品种的抗旱能力,并探讨基因表达规律及互作效应。【方法】本研究以前期课题组在割手密中克隆到的具有抗旱功能ScNAC1和ScDREB为目的基因,以对单子叶植物高效、专一的Ubiquitin为启动子,以适于单子叶植物遗传转化的表达载体pCAMBIA1300-nu为基础载体,利用改造后的FMDV2A多肽进行连接,采用重叠延伸PCR（简称SOE PCR）将ScNAC1和ScDREB基因相融合,利用同源重组的方法连接表达载体。【结果】经PCR验证获得约2000 bp的目的条带,利用BamH I与Sac I双酶切,切出了载体的1条大片段和连接目的基因的3条小片段,测序结果验证扩增产物的正确性,融合基因在扩增过程中无突变发生。【结论】本研究成功构建了符合需要的融合基因表达载体,为后期甘蔗的遗传转化研究奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 徐荣,吴清莲,孟玉,陈疏影,王先宏,何丽莲,李富生

关键词: 融合基因

来源: 西南农业学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,农作物

单位: 云南农业大学农学与生物技术学院,云南农业大学甘蔗研究所

基金: 国家自然科学基金(31560417),国家重点研发计划项目(2018YFD1000503),云南省现代农业甘蔗产业技术体系建设专项(2009-2019)

分类号: S566.1;Q943.2

DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2019.7.006

页码: 1492-1497

总页数: 6

文件大小: 1460K

下载量: 106

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