导读:本文包含了根癌土壤农杆菌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:VirE2基因,克隆,表达
根癌土壤农杆菌论文文献综述
刘红玲,李小红,王彦芹,王爱英,祝建波[1](2010)在《根癌土壤农杆菌Ti质粒VirE2基因的克隆及原核表达》一文中研究指出目的:获得根癌土壤农杆菌Ti质粒VirE2基因原核表达蛋白,为研究其功能打下基础。方法:利用PCR方法,根据发表的根癌土壤农杆菌(Agribacterium tumefaciens)C58Ti质粒基因序列,设计1对引物扩增了C58根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区蛋白VirE2基因,连接T载体经测序,结果与发表的序列同源性达100%。将目的片段从T载体上切下,连接至原核表达载体PET-30a上,转化E.coli DH5α,筛选出阳性克隆,提质粒转化E.coliBL21,用IPTG诱导表达。结果:经SDS-PAGE电泳,发现与对照比较在略小于66kDa处有特异条带,与理论大小(63.5kDa)相符。结论:克隆的VirE2基因获得了原核表达。(本文来源于《生物技术》期刊2010年03期)
王彦芹,李小红,包慧芳,刘红玲,祝建波[2](2005)在《根癌土壤农杆菌Ti质粒毒蛋白基因VirD_1的克隆及原核表达》一文中研究指出根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区VirD1蛋白表现拓扑异构酶活性,能解除T-DNA边界处25bp重复序列的超螺旋状态,使外源基因的插入成为可能。本实验以C58菌株为模板,设计了一对含有BamHI和XhoI酶切位点的引物,成功克隆了VirD1基因,并构建了原核表达载体pET30a-VirD1,将其在宿主菌BL21中获得了表达,为将来构建含有VirD1基因的植物表达载体并协助目的基因转化奠定基础。(本文来源于《石河子大学学报(自然科学版)》期刊2005年04期)
刘红玲,朱新霞,祝建波[3](2005)在《根癌土壤农杆菌VirD_2蛋白基因的克隆及原核表达》一文中研究指出根据U.Washington发表的根癌土壤农杆菌(Agribacteriumtumefaciens)C58Ti质粒基因序列,设计一对引物含NcoⅠ、SalⅠ酶切位点,利用PCR的方法,扩增了C58根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区蛋白VirD2基因,连接T载体经测序与发表的序列同源性达100%。将目的片段从T载体上切下,连接至原核表达载体PET-30a上,转化E.coliDH5α,筛选出阳性克隆,提质粒转化E.coliBL21,用IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳,发现与对照比较在近50kD处有特异条带,与理论大小(49.5kD)相符表明所克隆的VirD2基因获得了原核表达。(本文来源于《生物技术》期刊2005年03期)
刘红玲,祝建波,朱新霞,楚敏[4](2004)在《根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区VirD1基因的克隆及序列分析》一文中研究指出根据U.Washington报导的根癌土壤农杆菌(Agribacterium tumefaciens)C58Ti质粒基因序列,设计1对引物,利用PCR的方法扩增了c58根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区VirD1基因。通过琼脂糖凝胶电泳,所得目的片段略小于500bp,与引物设计跨幅片段476bp相吻合。将此片段连接到T载体,经蓝白斑筛选、PCR鉴定、测序及DNA序列分析,结果表明:克隆VirD1基因编码序列与报导的序列同源性达100%,说明通过PCR方法获得的VirD1基因片段是正确的,为进一步研究该基因的表达和活性奠定了基础。(本文来源于《石河子大学学报(自然科学版)》期刊2004年03期)
根癌土壤农杆菌论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区VirD1蛋白表现拓扑异构酶活性,能解除T-DNA边界处25bp重复序列的超螺旋状态,使外源基因的插入成为可能。本实验以C58菌株为模板,设计了一对含有BamHI和XhoI酶切位点的引物,成功克隆了VirD1基因,并构建了原核表达载体pET30a-VirD1,将其在宿主菌BL21中获得了表达,为将来构建含有VirD1基因的植物表达载体并协助目的基因转化奠定基础。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
根癌土壤农杆菌论文参考文献
[1].刘红玲,李小红,王彦芹,王爱英,祝建波.根癌土壤农杆菌Ti质粒VirE2基因的克隆及原核表达[J].生物技术.2010
[2].王彦芹,李小红,包慧芳,刘红玲,祝建波.根癌土壤农杆菌Ti质粒毒蛋白基因VirD_1的克隆及原核表达[J].石河子大学学报(自然科学版).2005
[3].刘红玲,朱新霞,祝建波.根癌土壤农杆菌VirD_2蛋白基因的克隆及原核表达[J].生物技术.2005
[4].刘红玲,祝建波,朱新霞,楚敏.根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区VirD1基因的克隆及序列分析[J].石河子大学学报(自然科学版).2004