H5亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR方法的建立与应用

H5亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR方法的建立与应用

论文摘要

H5亚型禽流感病毒HA序列差异越来越大。为更准确地检测H5亚型禽流感病毒,对GenBank中发表的H5亚型禽流感病毒HA序列以及本实验室保存病毒序列进行比对,同时设计1对引物和1条探针,建立了H5亚型禽流感病毒实时RT-PCR方法,并对该方法的反应体系和反应参数进行了优化。以本实验室分离测序确定的30份H5亚型禽流感病毒RNA为模板,将该方法与两种商品化H5亚型禽流感病毒检测试剂盒进行比对,发现该方法与两种商品化试剂盒的检出率分别为100%、98%、98%。敏感性试验显示,该方法可以检测出0.1 fg的RNA模板,灵敏度比两种商品化试剂盒均提高了10倍。结果表明,该方法具有更高的特异性和敏感性,可用于H5亚型高致病性禽流感的早期诊断。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 病毒
  •   1.2 试剂盒
  •   1.3 引物设计
  •   1.4 实时荧光RT-PCR方法建立
  •   1.5 实时荧光RT-PCR方法优化
  •   1.6 敏感性试验
  •   1.7 特异性试验
  •   1.8 与临床同类试剂盒比较
  •   1.9 临床应用
  • 2 结果
  •   2.1 实时荧光RT-PCR方法的建立及优化
  •   2.2 实时荧光RT-PCR方法的特异性
  •   2.3 实时荧光RT-PCR方法的敏感性
  •   2.4 与其他试剂盒的对比
  •   2.5 临床样品检测
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 蒋文明,李阳,程善菊,刘华雷

    关键词: 亚型,禽流感,实时,敏感性,特异性

    来源: 中国动物检疫 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国动物卫生与流行病学中心国家禽流感专业实验室

    基金: 国家重点研发计划项目(2017YFC120050)

    分类号: S852.65

    页码: 87-91

    总页数: 5

    文件大小: 1789K

    下载量: 155

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