导读:本文包含了二硫键稳定段免疫毒素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:毒素,免疫,肝癌,抗体,稳定,肝细胞,核糖核酸。
二硫键稳定段免疫毒素论文文献综述
王建丽,郑玉玲,王保莉,郭霭光,马茹[1]（2006）在《二硫键稳定单链抗体融合PE38免疫毒素的构建及活性分析》一文中研究指出目的构建二硫键稳定单链抗体(B3dsscFv)融合PE38原核表达载体,实现其高效表达,并对初步纯化后的复性产物的稳定性、对肿瘤细胞的结合和杀伤活性进行测定。方法重迭PCR连接B3抗体的VH和VL片段,并将PCR产物克隆至pET22b表达载体(B3dsscFv-pET22b)。测序正确的PE38基因片段经酶切连接至B3dsscFv-pET22b,构建B3dsscFv-PE38-pET22b表达载体。IPTG诱导转化菌,将表达的包涵体进行变性、复性后用阳离子柱Q-Sepharose进行了初步纯化,ELISA测定此融合蛋白中单链抗体的结合活性及其在37℃的稳定性,并采用MTT法检测其对B3抗原表面阳性细胞HT-29的杀伤作用。结果双酶切鉴定表明成功地构建了B3dsscFv-PE38-pET表达载体,表达产物以包涵体形式存在,占总蛋白量的45%左右。复性后的B3dsscFv-PE38保持单链抗体的结合活性,并且对结肠癌HT-29细胞具有一定的杀伤作用,最大杀伤率可达96%。该蛋白在37℃孵育16h后,仍能保持大部分活性。结论所获B3dsscFv-PE38免疫毒素具备导向和杀伤肿瘤细胞的双重功能和良好的稳定性,为其研制有效的肿瘤免疫治疗靶向药物提供一定的基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2006年01期）
付勇,刘彦仿,赵君,杨守京,孙志伟[2]（2004）在《二硫键稳定的人源化抗肝癌单链抗体与人嗜酸性细胞神经毒素重组免疫毒素融合基因的构建及表达》一文中研究指出目的 :构建二硫键稳定的人源化抗肝癌单链抗体 (hdsFv)与人嗜酸性细胞神经毒素 (hEDN)融合基因原核表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法 :利用RCR的方法扩增hEDN基因 ,克隆入含抗肝癌hdsFv基因的TIH原核表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)plyS后 ,以IPTG诱导融合蛋白表达。表达产物用SDS -PAGE及Westen -blot分析及鉴定。结果 :成功构建了抗肝癌hdsFv -hEDN融合基因原核表达载体 ;SDS -PAGE和Westen -blot分析显示 ,诱导表达产物出现一条Mr约为 4 5 .0KD的新生蛋白带 ,表达量占菌体总蛋白量的 2 2 % ,主要以包涵体形式存在。结论 :抗肝癌hdsFv -hEDN重组免疫毒素融合基因的成功构建及表达 ,为其进一步进行肝癌的导向治疗研究奠定了基础(本文来源于《西北国防医学杂志》期刊2004年05期）
马兰花[3]（2000）在《抗肝癌重组单链Fv段—免疫毒素（scFv25-TNFα）及二硫键稳定Fv段—免疫毒素（dsFv25-TNFα）的构建、表达、纯化及导向研究》一文中研究指出1．抗肝癌重组单链Fv段-免疫毒素(m／hseFv25-TNFα)的表达、纯化及导向研究 将抗肝癌重组单链Fv段-免疫毒素(pGEX 4T-1 m／hscFv25-TNFα)在大肠杆菌JM109中以IPTG诱导进行表达。表达产物为包涵体形式，溶解和折迭后，以GST亲合层析色谱纯化。间接免疫荧光染色表明m／hscFv25-TNFα的特异性和亲和力与亲本抗体HAb25相比没有明显下降。MTT实验提示在放线菌素D存在的情况下，体外m／hscFv25-TNFα对靶细胞SMMC-7721有明显的细胞毒作用；如无放线菌素D，靶细胞SMMC-7721则对m／hscFv25-TNFα不敏感。荷肝癌裸鼠体内的抑瘤实验显示m／hscFv25-TNFα对荷肝癌裸鼠体内直径2～4mm左右的肿瘤具有一定的导向杀伤作用，实验组14只裸鼠中3只部分缓解，4只完全消失，5只处于静止状态。而TNFα对照组无完全缓解。我们的结果提示TNFα对靶细胞SMMC-7721的杀伤作用不是直接的，必须依赖于体内的某些机制，可能TNFα是通过作用于血管肉皮细胞，或通过诱导肿瘤细胞凋亡，或体内某些物质起到了放线菌素D、谷胱甘肽或转录抑制因子的作用，需进一步研究以明确之。(本文来源于《第四军医大学》期刊2000-05-01）
二硫键稳定段免疫毒素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 :构建二硫键稳定的人源化抗肝癌单链抗体 (hdsFv)与人嗜酸性细胞神经毒素 (hEDN)融合基因原核表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法 :利用RCR的方法扩增hEDN基因 ,克隆入含抗肝癌hdsFv基因的TIH原核表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)plyS后 ,以IPTG诱导融合蛋白表达。表达产物用SDS -PAGE及Westen -blot分析及鉴定。结果 :成功构建了抗肝癌hdsFv -hEDN融合基因原核表达载体 ;SDS -PAGE和Westen -blot分析显示 ,诱导表达产物出现一条Mr约为 4 5 .0KD的新生蛋白带 ,表达量占菌体总蛋白量的 2 2 % ,主要以包涵体形式存在。结论 :抗肝癌hdsFv -hEDN重组免疫毒素融合基因的成功构建及表达 ,为其进一步进行肝癌的导向治疗研究奠定了基础
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
二硫键稳定段免疫毒素论文参考文献
[1].王建丽,郑玉玲,王保莉,郭霭光,马茹.二硫键稳定单链抗体融合PE38免疫毒素的构建及活性分析[J].细胞与分子免疫学杂志.2006
[2].付勇,刘彦仿,赵君,杨守京,孙志伟.二硫键稳定的人源化抗肝癌单链抗体与人嗜酸性细胞神经毒素重组免疫毒素融合基因的构建及表达[J].西北国防医学杂志.2004
[3].马兰花.抗肝癌重组单链Fv段—免疫毒素（scFv25-TNFα）及二硫键稳定Fv段—免疫毒素（dsFv25-TNFα）的构建、表达、纯化及导向研究[D].第四军医大学.2000