口疮病毒GIF蛋白的原核表达及对小鼠免疫细胞的影响

口疮病毒GIF蛋白的原核表达及对小鼠免疫细胞的影响

论文摘要

探究口疮病毒GIF蛋白对小鼠骨髓源树突状细胞成熟及Na?ve CD4+T细胞极化作用的影响。原核表达口疮病毒GIF蛋白,用纯化后的蛋白刺激小鼠树突状细胞,利用流式细胞术检测细胞表面分子的表达情况,ELISA方法检测细胞培养上清中细胞因子IL-12P40、TNF-α、IL-10、IL-1β的分泌情况。将Na?ve CD4+T细胞与经不同质量浓度的GIF蛋白刺激后的树突状细胞共培养,用ELISA检测该树突状细胞对Na?ve CD4+T细胞的免疫刺激能力,并进一步检测培养上清中IFN-γ和IL-5的分泌水平。结果显示,成功克隆了ORFV117基因,表达了羊口疮病毒GIF蛋白。经不同质量浓度蛋白刺激后,树突状细胞的表面共刺激分子CD86、CD40的表达水平均明显升高,其中5μg/mL蛋白刺激后,MHCⅡ表达水平显著升高,IL-12P40、TNF-α、IL-1β、IL-10释放水平显著升高。经不同质量浓度的GIF重组蛋白刺激后的树突状细胞对Na?ve CD4+T细胞的刺激能力增强,淋巴细胞共培养上清中IFN-γ分泌量显著增加。这表明一定质量浓度的口疮病毒GIF蛋白能促进小鼠骨髓源树突状细胞的成熟,能够激活抗原递呈作用,并且具有刺激T细胞分化的能力。

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类型: 期刊论文

作者: 冯倩,吴锦艳,李玲霞,杜国玉,尚佑军,刘湘涛,刘永生

关键词: 口疮病毒,蛋白,纯化,树突状细胞

来源: 中国兽医科学 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室

基金: 国家重点研发计划项目(2017YFD0500903),国家现代肉羊产业技术体系项目(CARS-38-04B),内蒙古科技专项

分类号: S852.654

DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0169

页码: 1222-1232

总页数: 11

文件大小: 2230K

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口疮病毒GIF蛋白的原核表达及对小鼠免疫细胞的影响
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