多酚氧化酶基因论文_宋慕波,帅良,方方,陈振林,张志

导读:本文包含了多酚氧化酶基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:氧化酶,多酚,基因,特异性,茶树,砀山,黄色素。

多酚氧化酶基因论文文献综述

宋慕波,帅良,方方,陈振林,张志[1](2019)在《荸荠多酚氧化酶基因的克隆及其在鲜切荸荠贮藏过程中的表达分析》一文中研究指出利用RACE技术首次从荸荠中克隆得到PPO基因全长cDNA序列,并分析其在鲜切荸荠贮藏过程中的表达变化。克隆得到的荸荠PPO基因cDNA序列全长为2 006 bp,开放阅读框长度为1 734 bp,编码577个氨基酸,命名为CwPPO(登录号:MG702489)。预测分析表明,CwPPO编码蛋白质的分子量为64.86 ku,分子式为C_(2891)H_(4417)N_(795)O_(873)S_(18),理论等电点为6.50,属亲水性蛋白。CwPPO蛋白可能定位于线粒体基质空间,具有3个典型的保守结构域和2个铜离子结合域。此外,预测发现CwPPO有20个丝氨酸磷酸化位点、7个苏氨酸磷酸化位点及6个酪氨酸磷酸化位点,其二级结构以不规则卷曲为主。系统发育分析显示,CwPPO蛋白与菠萝、油棕有较近的亲缘关系。荧光定量分析发现,CwPPO在鲜切荸荠中的初始表达水平较低,但在贮藏后期表达量快速提高。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年17期)

姚恒,杨大海,白戈,谢贺[2](2018)在《利用CRISPR/Cas9技术定点敲除烟草多酚氧化酶基因NtPPO1》一文中研究指出植物多酚氧化酶具有多种重要的生理功能。为研究烟草中多酚氧化酶基因功能,从GenBank中挑选一个烟草多酚氧化酶基因(基因登录号为XM_016608009.1),命名为NtPPO1。NtPPO1编码序列经PCR扩增、克隆测序验证后,采用CRISPR/Cas9技术定点敲除NtPPO1,并利用实时荧光定量PCR检验基因敲除效果。研究表明烟草NtPPO1全长1 746 bp,存在2种可变剪切方式。经测序与分析发现,T2突变体中的NtPPO1序列在靶位点处发生了1个、2个碱基的缺失突变与1个碱基的插入突变。实时荧光定量PCR检测结果显示,与对照相比,T2突变体中NtPPO1表达水平显着下降。烟株外观显示NtPPO1突变体与野生型对照之间无明显差异。(本文来源于《生物技术通报》期刊2018年11期)

郑楚楚,曾泽媛,罗勇,石玉兰,王坤波[3](2019)在《茶树多酚氧化酶基因的单核苷酸多态性分析》一文中研究指出多酚氧化酶(PPO)是一类含铜氧化还原酶,是红茶加工中品质形成的关键酶。本研究对44个茶树品种进行测序,研究PPO基因m RNA编码区的单核苷酸多态性(SNP),结果表明:共发现50个SNP位点,核苷酸多态性指数pi为0.014 06,基因的单倍型多样性(HD)为0.955,说明PPO基因具有较高的遗传多样性;转换类型有(A?G, C?T),颠换类型有(A?T, G?C, G→T, A→C),其中18个SNPs属于同义突变,32个外显子SNPs属于错义突变,有6个SNPs发生在核酸内切酶酶切位点。表明PPO基因存在多个等位基因,而且新等位基因的产生对PPO基因的表达有重要影响,对茶树新品种选育和早期鉴定具有十分重要的意义,为进一步研究茶树分子育种提供理论依据。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年13期)

朱海生,康娟,刘建汀,陈敏氡,李永平[4](2018)在《丝瓜多酚氧化酶PPO基因家族的克隆与表达分析》一文中研究指出多酚氧化酶(PPO)是参与酚类物质氧化的主要酶类之一,在果蔬褐变中发挥重要作用。为探究丝瓜中PPO基因家族的功能,以闽丝3号丝瓜为试验材料,通过转录组测序和RT-PCR方法获得了3个丝瓜PPO基因家族的c DNA序列,依次命名为Lc PPO1(Gen Bank登录号为KM506756)、Lc PPO2(Gen Bank登录号为KR819890)和Lc PPO3(Gen Bank登录号为KX092429);Lc PPO1基因全长2 026 bp,包含一个1 794 bp的ORF,编码598个氨基酸;Lc PPO2基因全长2 071 bp,ORF为1 722 bp,编码574个氨基酸;Lc PPO3基因全长2 189 bp,ORF为1 779 bp,编码593个氨基酸;3个基因均无内含子,其编码的蛋白与甜瓜、黄瓜同源蛋白的相似性较高。生物信息学分析表明,3个基因编码的酶蛋白均无信号肽,无跨膜结构域,为亲水性稳定蛋白,Wolf Psort预测其亚细胞定位于叶绿体。Lc PPO具有PPO蛋白的典型特征,分别具有PPO1-DWL、PPO1-KFDV 2个结构域和一个能够结合2个铜离子(Cu A、Cu B)的中央域酪氨酸酶。实时荧光定量PCR分析显示,Lc PPO家族的3个基因在丝瓜根、茎、叶、花和果实中均有表达。在丝瓜采后储藏期间,3个PPO基因初期表达上调,后期表达量受到抑制;在丝瓜鲜切条件下,Lc PPO1和Lc PPO2基因表达量总体呈先上升后下降趋势,Lc PPO3基因鲜切后表达量均低于采后0h。Lc PPO基因家族基因表达、PPO活性、总酚与丝瓜褐变关系密切,其中Lc PPO1、Lc PPO2在普通丝瓜果肉褐变过程中可能发挥着重要作用。本研究结果为进一步揭示丝瓜褐变的发生机理和丝瓜品种遗传改良奠定了一定的理论基础。(本文来源于《核农学报》期刊2018年08期)

许莉娟[5](2018)在《茶树中多酚氧化酶的基因克隆及功能探究》一文中研究指出多酚氧化酶PPO是一种金属蛋白酶,在茶叶加工制作过程中起着至关重要的作用,它可将茶叶中的多酚类物质酶促氧化成茶黄素、茶红素等关键品质成分物质,对红茶的品质产生重要影响。根据文献可知,多酚氧化酶主要与植物的抗逆性相关。但在茶树生长过程中,多酚氧化酶是否参与茶树抵抗外界胁迫、或在植物次生代谢途径上起到的作用,却并不明确。所以探究茶树中多酚氧化酶的生理功能有着重要的理论与实际意义。本论文筛选出3条茶树多酚氧化酶(CsPPOs)基因,并成功克隆它们全长;通过DNAMAN软件以及MEGA5.0软件对茶树3条基因进行生物信息学分析,结果表明,3条基因可能与茶树抗逆性相关;在预测网站上预测了3条基因在茶树体内的亚细胞定位情况,结果显示3条基因都定位在叶绿体中。利用qRT-PCR技术,分析了茶树多酚氧化酶基因在不同组织器官中的表达情况,以及诱导表达特异性,3条基因在不同组织器官中都有表达,CsPPO1在根中显着高表达,CsPPO3在幼嫩组织中表达较低,而在成熟组织中表达较高;在诱导特异性结果中,CsPPO1与CsPPO3可能参与茶树体内的抗病菌防御机制;CsPPO1和CsPPO2与茶树响应光诱导的关系更为密切;通过构建CsPPOs原核表达载体,将其转入蛋白表达菌株中,成功诱导CsPPOs蛋白表达,用纯酶进行酶反应,能与儿茶素反应,在380nm下检测到产物特征峰;最后通过过表达转基因烟草,发现在表型上,转基因烟草花较G28植物花色偏红,烟草体内的其他代谢产物也有不同程度的变化。本论文通过上述的研究,初步探究了多酚氧化酶在茶树体内的生理学意义,为茶树育种以及茶叶品质的提高提供了新的思路。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2018-06-01)

陈明俊[6](2018)在《应用基因编辑技术抑制马铃薯多酚氧化酶的研究》一文中研究指出多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)是一类广泛的存在于植物、动物和微生物中,并且结构复杂的含铜氧化还原酶。在果蔬褐变过程中发挥重要作用。当果蔬受到机械损伤后,多酚氧化酶在氧气存在的情况下催化酚类化合物转化为醌,醌再与氨基酸、蛋白质和酚类物质进行聚合反应形成褐色的聚合物,从而导致果蔬因酶促褐变造成重大损失。本研究利用基因编辑技术CRISPR/Cas9分别对主要存在于马铃薯块茎中的多酚氧化酶基因POT32和POT33进行编辑,以期降低马铃薯块茎受机械损伤引发褐变发生率,获得抗褐化马铃薯新种质。该研究对减少果蔬褐变从而提高经济效益,创制抗褐化种质资源有重大意义。研究取得的主要研究结果如下:1、成功构建靶点特异性gRNA/Cas9植物表达载体并遗传转化马铃薯本实验以马铃薯大西洋品种作为实验材料,根据靶点设计要求构建靶点特异性gRNA/Cas9植物表达载体,POT32和POT33基因各两个靶点,分别记作SG5797、SG5798、SG5799和G5800,采用拟南芥U6启动子启动gRNA,并采用加强型CaMV35启动子高效表达Cas9蛋白,同时表达潮霉素抗性基因。通过农杆菌遗传转化获得54个马铃薯转化株,通过PCR鉴定获得叁处靶点(SG5797、SG5798、SG5799)共9个阳性转化株系,其中转SG5797靶点有五株、SG5798靶点叁株、SG5799靶点一株。通过靶序列测序发现仅两株在SG5797靶点处出现突变,共出现了两种突变类型,分别是植株POT32-2出现1个碱基插入和植株POT32-5出现的1个碱基缺失。2、对马铃薯PPO基因编辑可致使PPO活力降低本研究对得到的两个突变植株和野生型植株收获的马铃薯块茎PPO活力相关指标测定比较发现,植株POT32-2和POT32-5的块茎PPO活性降低了20.77%和14.88%,其中POT32-2较野生型褐变强度降低了3.97%。PPO化学定位表明突变株PPO主要分布在靠近维管部位,而野生型在切面上均匀分布且数量多,说明PPO含量更高。褐变表型观察发现野生型褐变更早发生,程度更大,相应的褐化指数更高。综上所述,我们认为对马铃薯PPO基因编辑可致使PPO活力降低。(本文来源于《贵州大学》期刊2018-05-01)

张煜晗,张希,董莉,董清华[7](2018)在《草莓多酚氧化酶基因全长的克隆及表达载体构建》一文中研究指出【目的】为了提高草莓的果实品质和经济价值。【方法】利用改良CTAB法提取五叶草莓叶片总DNA,反向PCR(IPCR)方法克隆基因。【结果】得到了2条完整的草莓多酚氧化酶基因全长3 591bp和1 809bp,分别编码1 196和602个氨基酸,分别命名为FpPPO1与FpPPO_2,GenBank登录号分别为HM063946和HM063947。FpPPO1和FpPPO_2与其他物种中的多酚氧化酶基因比较,氨基酸相似性分别为57%~77%与74%~99%。最后成功构建了多酚氧化酶基因反义植物表达载体pCP430和正义植物表达载体pCP1809。【结论】克隆得到草莓FpPPO1和FpPPO_2基因全长并构建转基因载体,为研究草莓中多酚氧化酶基因的功能奠定了基础。(本文来源于《北京农学院学报》期刊2018年02期)

陈泠,高春保,朱展望,佟汉文,刘易科[8](2017)在《小麦黄色素含量与多酚氧化酶活性相关基因的分子标记检测及分布差异》一文中研究指出用黄色素含量和多酚氧化酶活性相关分子标记对277份国内小麦(Triticum aestivum L.)品种(系)进行了检测,发现1B/1R易位系出现频率为27.1%,控制低多酚氧化酶(PPO)活性等位基因Ppo-A1b和Ppo-B1a分布频率为53.1%和65.3%,控制低黄色素(YP)含量的等位基因Psy-A1b和Psy-B1b出现频率分别是39.7%和55.6%。后4种基因型在各省份间分布频率差异很大,等位基因Ppo-A1b在河南品种中频率较低,为28.6%;Ppo-D1a基因型在陕西地区最低,为14.3%;Psy-A1b等位基因在河南和山东品种中分布频率很低,仅为15.7%和13.3%;Psy-B1b在江苏和山东地区较低,分别为25.0%和36.7%;四川品种中这4种等位基因出现频率都较高。根据不同地区面粉色泽相关等位基因分布差异,制定适宜育种策略,能更有效地改善该地区小麦新品种的面粉色泽。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2017年24期)

刘峰娟,冯作山,白羽嘉,王敏,黄伟[9](2017)在《无核白葡萄多酚氧化酶基因的克隆与序列分析》一文中研究指出为获得无核白葡萄中多酚氧化酶(PPO)的基因序列,以无核白葡萄果实为试材,进行基因同源克隆,得到多酚氧化酶基因CDS全长序列,其完整的编码框为1 824 bp,编码607个氨基酸(GenBank登陆号为KP271928);系统进化分析可知,其与葡萄科植物PPO基因同源性最高;生物信息学方法发现该蛋白分子量为67 392.44 Da,等电点为6.42,具典型的酪氨酸家族结构域,无信号肽结构,但有一个跨膜结构域,为亲水性蛋白;二级结构预测发现,PPO具有CuA与CuB两个结合区,分别嵌入蛋白活性腔中。该研究为进一步从分子水平探讨多酚氧化酶与褐变的关系奠定理论基础。(本文来源于《保鲜与加工》期刊2017年06期)

常艳,刘晓峰,金青,蔡永萍,聂凡[10](2017)在《砀山酥梨多酚氧化酶基因(PbPPO)的原核表达及优化研究》一文中研究指出从砀山酥梨Pyrus bretschneideri ‘Dangshan Su’果实中克隆得到一条多酚氧化酶基因(PbPPO)的全长cDNA序列(GenBank登录号:JF809859)。通过生物信息学分析表明,PbPPO基因CDS区全长1782 bp,编码593个氨基酸,氨基酸序列由N端叶绿体转运肽、Cu结合区与C端疏水区叁部分组成。为进一步研究Pb PPO基因的功能,成功构建其原核表达载体pET-28a-PbPPO,并在大肠杆菌Rosetta菌株中成功诱导表达,经优化后显示,在28℃、1.0 mmol·L~(-1) IPTG诱导5 h的条件下,融合蛋白表达量最高。(本文来源于《亚热带植物科学》期刊2017年03期)

多酚氧化酶基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

植物多酚氧化酶具有多种重要的生理功能。为研究烟草中多酚氧化酶基因功能,从GenBank中挑选一个烟草多酚氧化酶基因(基因登录号为XM_016608009.1),命名为NtPPO1。NtPPO1编码序列经PCR扩增、克隆测序验证后,采用CRISPR/Cas9技术定点敲除NtPPO1,并利用实时荧光定量PCR检验基因敲除效果。研究表明烟草NtPPO1全长1 746 bp,存在2种可变剪切方式。经测序与分析发现,T2突变体中的NtPPO1序列在靶位点处发生了1个、2个碱基的缺失突变与1个碱基的插入突变。实时荧光定量PCR检测结果显示,与对照相比,T2突变体中NtPPO1表达水平显着下降。烟株外观显示NtPPO1突变体与野生型对照之间无明显差异。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

多酚氧化酶基因论文参考文献

[1].宋慕波,帅良,方方,陈振林,张志.荸荠多酚氧化酶基因的克隆及其在鲜切荸荠贮藏过程中的表达分析[J].江苏农业科学.2019

[2].姚恒,杨大海,白戈,谢贺.利用CRISPR/Cas9技术定点敲除烟草多酚氧化酶基因NtPPO1[J].生物技术通报.2018

[3].郑楚楚,曾泽媛,罗勇,石玉兰,王坤波.茶树多酚氧化酶基因的单核苷酸多态性分析[J].分子植物育种.2019

[4].朱海生,康娟,刘建汀,陈敏氡,李永平.丝瓜多酚氧化酶PPO基因家族的克隆与表达分析[J].核农学报.2018

[5].许莉娟.茶树中多酚氧化酶的基因克隆及功能探究[D].安徽农业大学.2018

[6].陈明俊.应用基因编辑技术抑制马铃薯多酚氧化酶的研究[D].贵州大学.2018

[7].张煜晗,张希,董莉,董清华.草莓多酚氧化酶基因全长的克隆及表达载体构建[J].北京农学院学报.2018

[8].陈泠,高春保,朱展望,佟汉文,刘易科.小麦黄色素含量与多酚氧化酶活性相关基因的分子标记检测及分布差异[J].湖北农业科学.2017

[9].刘峰娟,冯作山,白羽嘉,王敏,黄伟.无核白葡萄多酚氧化酶基因的克隆与序列分析[J].保鲜与加工.2017

[10].常艳,刘晓峰,金青,蔡永萍,聂凡.砀山酥梨多酚氧化酶基因(PbPPO)的原核表达及优化研究[J].亚热带植物科学.2017

论文知识图

茶黄素化学结构式Fig.1-1Thechemical...茶黄素合成途径高速逆流色谱原理图α表达载体Fig.1-4pPICZαexpre...茶树基因组DNA凝胶电泳图基因克隆的电泳检测Fig.3-2Agaros...

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