拟南芥AtSWEET4基因启动子序列、编码蛋白结构分析及其在病原菌胁迫下表达特性检测

拟南芥AtSWEET4基因启动子序列、编码蛋白结构分析及其在病原菌胁迫下表达特性检测

论文摘要

【目的】分析拟南芥糖运输载体蛋白基因(AtSWEET4)启动子序列及其编码蛋白的结构,并检测病原菌胁迫下AtSWEET4基因的表达特性,为研究AtSWEET4蛋白在拟南芥生长发育和生物胁迫中的作用机制提供理论依据。【方法】采用生物信息学方法分析AtSWEET4基因启动子序列及其编码蛋白的结构,并采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)组织染色法检测人工接种菜豆晕疫病菌(Pseudomonas syringae pv. phaseolicola,Psp)NPS3121和丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pathovar tomato,Pst)DC3000后AtSWEET4基因的表达情况。【结果】AtSWEET4蛋白由251个氨基酸组成,分子量为27.8 kD,分子式为C1300H2038N304O346S11,理论等电点(pI)为8.71,脂肪氨基酸指数为118.76,不稳定指数为38.72,平均亲水性指数为0.629,为稳定的亲水蛋白,且含有7个跨膜结构域,无信号肽,为非分泌型蛋白。AtSWEET4蛋白与芥属的亚麻荠和荠菜SWEET4蛋白亲缘关系最近,其次是十字花科的甘蓝和萝卜SWEET4蛋白,与禾本科的二穗短柄草SWEET4蛋白亲缘关系最远。AtSWEET4基因启动子序列中包含核心元件TATA-box、增强子元件CAAT-box、调控植物生长发育相关元件、激素响应相关元件、非生物胁迫响应相关元件和生物胁迫响应相关元件。Psp NPS3121和Pst DC3000均可诱导AtSWEET4基因表达,但表达模式不同:接种Psp NPS3121后6和12 h的AtSWEET4基因表达明显上调,但至接种后24 h又迅速下降;接种Pst DC3000后AtSWEET4基因表达量逐渐增加。【结论】AtSWEET4基因的启动子序列特征及其编码蛋白结构与其参与植物免疫反应密切相关。

论文目录

  • 0 引言
  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验材料
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 AtSWEET4基因启动子序列及其编码蛋白的生物信息学分析
  •     1.2.2 植物表达载体构建及拟南芥遗传转化
  •       1.2.2. 1 AtSWEET4基因启动子克隆及植物表达载体pBI121-psweet4::GUS构建
  •       1.2.2. 2 拟南芥遗传转化
  •     1.2.3 转基因植株检测
  •     1.2.4 病原菌接种
  •     1.2.5 qRT-PCR检测AtSWEET4基因表达情况
  •   1.3 统计分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 AtSWEET4蛋白氨基酸序列及其理化性质分析结果
  •   2.2 拟南芥AtSWEET4蛋白结构分析结果
  •   2.3 AtSWEET4基因启动子序列分析结果
  •   2.4 重组植物表达载体pBI121-psweet4::GUS构建及纯合转基因植株获得
  •   2.5 接种病原菌后AtSWEET4基因表达情况
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘晓柱,李银凤

    关键词: 拟南芥,运输载体蛋白,理化性质,结构特征,启动子序列,病原菌胁迫,表达分析

    来源: 南方农业学报 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 贵州理工学院

    基金: 贵州省科技计划项目(黔科合平台人才〔2017〕5789)

    分类号: Q943.2

    页码: 1893-1902

    总页数: 10

    文件大小: 7646K

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