导读:本文包含了过继转输论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,蛛网膜,体外,微小,细胞因子,淋巴细胞,脑缺血。
过继转输论文文献综述
焦玉萌,夏惠,王雪梅,陶志勇,朱琳[1]（2019）在《刚地弓形虫排泄分泌抗原刺激NK细胞过继转输对小鼠B16F10黑色素瘤生长的抑制作用》一文中研究指出目的观察刚地弓形虫排泄分泌抗原(Tg ESA)刺激后的NK细胞对小鼠B16F10黑色素瘤生长的作用。方法取弓形虫RH株体外培养12 h后,从培养上清收集获得弓形虫ESA。取10只C57BL/6小鼠随机分为2组,每组5只,每只小鼠右腋窝皮下接种B16F10黑素瘤细胞2×10~5个。接种后第7天,随机取1组小鼠腹腔注射100μl Tg ESA,另1组注射等量的PBS。接种后第14天,无痛处死小鼠,无菌条件下制备小鼠脾细胞悬液,分离2组荷瘤鼠的NK细胞,分别记为NK_(B16F10)和NK_(ESA),用于后续过继转输实验。取30只C57BL/6小鼠随机分为对照组、 NK_(B16F10)组和NK_(ESA)组,每组10只。3组小鼠均右腋窝皮下接种B16F10细胞2×10~5个/鼠。其中NK_(B16F10)组和NK_(ESA)组小鼠同时分别尾静脉注射2×10~5个NK_(B16F10)和NK_(ESA)。观察瘤体生长情况以及各组小鼠死亡数和死亡时间,共观察35 d。结果 NK细胞过继转输后,NK_(ESA)组和NK_(B16F10)组小鼠平均出瘤时间分别为(14.70±0.95)、(12.60±0.70) d,均晚于对照组的(8.50±0.85) d (P <0.05)。3组小鼠出瘤后,瘤体均不断增长,至第35天,NK_(B16F10)组和NK_(ESA)组的平均瘤体面积分别为(686.53±17.84)和(577.79±49.70) mm~2,均小于对照组的(787.84±19.94) mm~2 (P <0.05)。对照组、 NK_(B16F10)组和NK_(ESA)组小鼠分别于接种B16F10细胞后第24、 27和30天开始出现死亡,至第35天,存活的小鼠数分别为3、 4和6只。结论弓形虫ESA刺激的NK细胞过继转输小鼠后可较为明显地抑制B16F10黑色素瘤瘤体的生长。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2019年04期）
岳东旭,赵娟娟,陈慧子,丁涛,胡琳[2]（2018）在《miR-7敲减CD4~+ T细胞过继转输对小鼠急性肝损伤模型的影响》一文中研究指出目的:观察过继转输微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(knockdown,KD)CD4~+ T细胞对小鼠急性肝损伤模型的影响,并探讨其意义。方法:利用磁珠分选技术分别获得正常野生型(WT)小鼠和miR-7KD小鼠脾脏中CD4~+ CD62L~+ T细胞;CFSE染色标记后,按每只小鼠2×10~6个细胞,经尾部静脉注射给同系WT小鼠,并利用伴刀豆球蛋白A建立急性肝损伤模型;观察过继转输后2组小鼠肝脏的形态、重量及其重量指数的变化;HE染色观察小鼠肝脏组织的病理学变化;real-time PCR检测小鼠肝脏组织中凋亡相关分子Bax和P53的表达;流式细胞术检测小鼠肝脏组织中CFSE标记的CD4~+ T细胞活化相关膜分子CD62L表达水平以及细胞因子白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的表达变化。结果:与对照组相比,过继转输miR-7KD小鼠CD4~+ CD62L~+ T细胞组(miR-7KD转输组)小鼠的肝脏重量明显减轻(P<0.01),但重量指数显着增加(P<0.05);HE染色显示miR-7KD转输组的肝脏细胞损伤增加;real-time PCR结果显示miR-7KD转输组肝脏组织中凋亡相关细胞分子Bax和P53的相对表达水平均明显升高(P<0.05);流式细胞术检测结果进一步显示肝脏组织中的CFSE~+细胞活化相关分子CD62L的表达水平明显降低(P<0.01),细胞因子IFN-γ的表达水平明显增加(P<0.05),而IL-4的表达水平显着降低(P<0.01)。结论:过继转输miR-7敲减CD4~+ T细胞可显着加重急性肝损伤模型小鼠的肝组织损伤。这为后续深入探讨急性肝损伤的发生机制提供了重要的实验基础。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2018年09期）
张庆义[3]（2017）在《过继细胞转输治疗白血病微小残留病灶治疗效果的Meta分析》一文中研究指出目的评价过继细胞转输对白血病微小残留病灶治疗的效果及安全性。方法应用数据库检索有关CIK细胞治疗白血病微小残留病灶的随机对照试验将检索到的原始研究进行质量评估,评价过继细胞转输治疗白血病微小残留病灶MRD(-)对比MRD(+)的临床预后生存率及安全性。结果符合纳入标准的文献共172篇,共纳入4个随机对照试验。3个试验报道了3年复发率,化疗后联合CIK治疗组在3年复发率方面与单纯化疗组有统计学差异(P<0.05)。AIT治疗相关的不良反应,主要为发热、头痛、头晕、恶心或心动过速,且多具有自限性,尚未见与AIT相关的感染。结论辅助AIT治疗能降低白血病MRD阳性患者化疗1年的复发率,可改善生存率及远期复发率无明显作用。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2017年A0期）
崔澄,郝淑维,刘杰,郑文广,王雅卓[4]（2014）在《不同雄性淋巴细胞及其Exosomes过继转输改善妊娠丢失孕鼠胚胎发育的比较分析》一文中研究指出目的:分析雄性T淋巴细胞及其Exosomes(Exo)过继转输对妊娠丢失孕鼠胚胎发育的保护作用。方法:分别将健康男性外周血单个核细胞(PBMC)、BALB/c及DBA/2雄鼠脾细胞体外诱导增殖,蔗糖密度梯度离心联合超滤制备Exo。CBA/J(♀)×BALB/c(♂)为正常妊娠对照,CBA/J(♀)×DBA/2(♂)为妊娠丢失URSA模型。将URSA孕鼠随机分组,经尾静脉或皮下注射,分别予以父方、非父方、无关雄鼠脾细胞或其Exo,以及男性PBMC来源Exo过继转输。观察胚胎发育,计算胎盘体积、胚胎吸收率及妊娠丢失率。结果:URSA组胎盘体积明显缩小,胚胎吸收率、妊娠丢失率显着升高(均P<0.000 5);尾静脉或皮下注射不同来源细胞及Exo后,孕鼠胎盘体积显着恢复,胚胎吸收率、妊娠丢失率显着下降(均P<0.000 5)。不同治疗组内两种注射途径产生的疗效无差异(均P>0.05);不同细胞来源Exo过继转输后,胚胎吸收率的下降幅度显着强于细胞治疗组(均P<0.05);男性Exo过继转输后,妊娠丢失率的下降幅度显着强于细胞治疗组及鼠源Exo治疗组(均P<0.05)。结论:过继转输不同来源雄性T淋巴细胞及其Exo均可明显改善胚胎发育。Exo作为非细胞成分生物学制剂,有望取代传统细胞过继免疫治疗。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2014年12期）
程焱,孙保亮[5]（2014）在《体外扩增的调节性T细胞过继转输对脑缺血的保护作用》一文中研究指出目的探讨体外扩增的CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)静脉输注移植对大鼠脑缺血再灌注后的保护效应。方法线栓法制备右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血2h再灌注,股静脉注射Treg细胞(2×106个/只)。实验大鼠随机分成假手术组、PBS处理组、脾细胞(SP)处理组和Treg细胞治疗组。在Treg细胞输注后3d、7d、14d采用Zea Longa、触须诱导的前肢放置试验、足失误试验、圆筒实验对各组大鼠进行神经功能评分;行TTC染色测量脑梗死体积比;应用TUNEL和caspase-3染色观察细胞凋亡情况。结果脑缺血再灌注后3d,模型组大鼠各项神经功能评分达到高峰,与PBS组和SP组相比Tregs治疗组的感觉运动功能得到显着改善。TTC染色结果显示在MCAO后不同时间点Treg治疗组的脑梗死体积较PBS和SP治疗组均显着降低。在MCAO后不同时间点Caspase-3染色和TUNEL染色结果显示Tregs治疗组脑缺血半暗带区的阳性细胞数目较PBS和SP治疗组显着降低。结论体外扩增的CD4+CD25+Treg细胞治疗性输注可显着改善脑缺血再灌注后的神经功能损伤,通过降低脑梗死体积、抑制细胞凋亡来发挥脑保护作用。(本文来源于《中国微循环学会2014年全国学术会议大会汇编》期刊2014-06-26）
王文文[6]（2014）在《调节性T细胞过继转输减轻脑出血后血脑屏障损害和细胞凋亡》一文中研究指出目的建立小鼠脑出血（ICH）模型，将外源CD4+CD25+调节性T细胞经过股静脉过继转输，探讨调节性T细胞（CD4+CD25+Tregs）对出血后小鼠脑组织的保护作用和可能机制。方法实验选取10-12周龄，体重25g左右的健康雄性昆明小鼠作为研究对象，将动物随机分为：脑出血手术组和假手术对照（sham）组。采用改良的方式向小鼠左侧纹状体注入10ul的自体血制备脑出血模型；采用免疫磁珠法，提取小鼠脾脏内CD4+CD25+Tregs；经股静脉输注Tregs。脑出血手术组又分为叁个亚组：Tregs组，输注移植提取的CD4+CD25+Tregs；PBS组，输注相同体积的PBS；ICH组：出血后未经任何处理。采用角转落、足失误实验等评分标准在术后一月内对小鼠的神经功能缺损进行评分。分别采用ELISA法（酶联免疫吸附）、EB法（伊文思蓝）、TUNEL（原位末端标记术）、Caspase-3（凋亡相关蛋白）对脑出血后自由基MDA及其清除剂SOD的变化，血脑屏障通透性，细胞凋亡等相关指标进行观察。结果1.与假手术对照组相比，脑出血后1d各组小鼠便表现出不同程度的神经功能缺损，尤以PBS组和ICH组最为严重（P＜0.05)，一个月后方恢复；Tregs组治疗的角转落及足失误评分都显着低于手术其他组（P＜0.05），3周时间基本恢复。2.脑出血后免疫荧光显微镜观察凋亡的有关指标可见：与假手术组比较，脑出血模型组小鼠血肿周围组织的TUNEL、Caspase-3染色的细胞数增加，提示出现明显的细胞凋亡（P＜0.05）。模型各亚组中又以ICH及PBS组细胞凋亡最为严重，Tregs组损伤最轻。与假手术组相比，小鼠脑出血后血脑屏障也遭破坏，EB外渗量显着升高，持续一周仍未好转，具有显着的统计学意义（P＜0.001)；脑出血组各时间点自由基MDA含量也显着升高，自由基清除剂SOD的水平却反向降低（P＜0.05）；Tregs组虽也出现类似变化，但程度较轻（P＜0.05）。结论1.采用改良的方式可成功制备小鼠脑出血模型，此模型能够模拟ICH的主要病理和临床过程。2.外源性CD4+CD25+Tregs过继转输对小鼠脑出血具有保护作用，可促进小鼠ICH后神经功能的恢复。3.外源性CD4+CD25+Tregs的过继转输可保护小鼠脑出血后BBB的完整性。4.外源性CD4+CD25+Tregs的过继转输可以显着降低脑出血后MDA的产生，减少SOD消耗，抑制细胞凋亡，减轻损伤，起到脑保护作用。(本文来源于《泰山医学院》期刊2014-04-01）
张磊[7]（2014）在《蛛网膜下腔出血的抗炎治疗：调节性T细胞过继转输》一文中研究指出目的1、建立大鼠蛛网膜下腔出血模型，静脉给予外源性CD4+CD25+调节性T细胞，探讨脑组织炎性细胞浸润的变化。2、观察CD4+CD25+调节性T细胞静脉输注治疗后蛛网膜下腔出血大鼠模型脑组织中TLR4、NF-κB，以及血浆中相关炎性因子表达的变化，探讨CD4+CD25+调节性T细胞对蛛网膜下腔出血后炎症反应的抑制作用。方法1、用免疫磁珠两步法，从大鼠的脾脏及淋巴结中分离、获取高纯度的调节性T细胞。枕大池二次注血法制作SAH大鼠模型。随机将健康成年雄性wister大鼠随机分为正常组、假手术组、SAH组，SAH组分为静脉PBS输注组（PBS组）、脾细胞（spleencells，SP）输注组和Treg输注组。于术后2天断头取脑，免疫组化法检测脑组织中的炎性细胞浸润情况。2、选用成年健康的雄性wister大鼠，枕大池二次注血法制作大鼠蛛网膜下腔出血模型。随机将动物分为正常组、假手术组、蛛网膜下腔出血组（SAH组），蛛网膜下腔出血组分为静脉PBS输注组、脾细胞（spleencells，SP）输注组和Treg输注组。术后第2天断头取脑，由股静脉留取静脉血，免疫组化法检测脑组织中TLR4的表达，westernbolt法检测脑组织中TLR4、NF-κB蛋白水平，ELISA法检测外周血中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平的变化。结果与假手术组相比，SAH后脑组织中性粒细胞浸润明显增多，TLR4表达也有明显升高。同时，SAH组NF-κB表达水平显着增高。血浆中IL-1β、TNF-α、IL-6表达显着增高。与PBS治疗组和SP治疗组相比，Treg治疗组脑组织中TLR4，NF-κB水平显着降低，血浆中IL-1β、TNF-α、IL-6表达也降低（P<0.05）。结论SAH早期出现脑血管痉挛及脑损伤后，炎性因子、NF-κB的表达与TLR4有关。TLR4在脑室周围的血管丛中表达较多，在小胶质、星形胶质细胞，少量分布于脑血管内的内皮细胞和平滑肌细胞。TLR4/NF-κB信号通路被激活进而导致的炎症反应在SAH后的脑血管痉挛及早期脑损伤的发生过程中发挥重要作用。Treg治疗SAH后，脑组织中的TLR4、NF-κB以及血浆中IL-1β、TNF-α、IL-6炎性因子表达水平显着降低。表明Treg能较好的限制SAH后中枢神经系统的炎症反应，从而减轻SAH造成的脑组织损伤。(本文来源于《泰山医学院》期刊2014-04-01）
张礼萍[8]（2014）在《调节性T细胞过继转输对SAH后脑血管痉挛及早期脑损伤的影响》一文中研究指出研究背景蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)是由脑底部或脑表面的病变血管破裂，血液直接流入蛛网膜下腔引起的一种临床综合征。流行病学调查显示，SAH约占急性脑卒中的10%左右,大多数蛛网膜下腔出血是由动脉瘤破裂导致的。动脉瘤性蛛网膜下腔出血是一种极其危重的疾病，其致残率和致死率都很高。蛛网膜下腔出血主要的患病人群是40-60岁的中老年人。每年的发病率大约是10/100,000，其中有12%的SAH患病人群在进入医院接受治疗之前死亡，另外有40%的SAH患者在入院治疗1个月内死亡。在所有幸存下来的SAH患者中约30%会遗留严重的神经功能障碍，导致生活不能自理。50%的患者在较长一段时间内伴有认知功能障碍，而且这种认知障碍几乎不可能恢复到病前水平。虽然SAH的诊断技术和外科治疗措施有了很大提高和改进，但是SAH患者的临床预后仍然不理想。目前为止，研究发现导致SAH患者高致残率和高致死率的主要因素是脑血管痉挛(cerebral vasospasm,CVS)和早期脑损伤(earlybrain injury,EBI).。CVS在SAH后的第1天出现，在SAH后6-8天达到高峰，并持续2-3周。CVS是SAH最常见的高危并发症，常可继发严重的脑组织缺血，进而出现迟发性脑缺血，导致患者遗留严重的神经功能障碍，甚至是死亡。以往一直认为CVS是导致SAH患者死亡率高和预后不良的主要原因，所以数十年来，研究者们将重点放在了CVS上，但是针对这些机制的治疗措施并没有明显改善SAH患者的预后。近年来的研究发现，SAH后EBI也与患者的长期不良预后有关，EBI是SAH后的前72小时内出现的脑组织的损伤，有学者提出一个挑战性的观点：EBI对SAH预后的影响比CVS大。EBI的病理生理机制包括由颅内压的急剧增加和脑灌注压的急剧下降导致的弥漫性的脑缺血损伤，细胞凋亡的激活，血脑屏障的破坏，脑水肿和免疫炎症反应等。在深入理解SAH后CVS及EBI的发病机制的基础上，寻找出安全、有效、易于实施的防治措施是改善SAH患者预后的关键环节。虽然长期以来国内外对SAH后CVS及EBI的研究投入了大量人力和物力，然而迄今为止仍然缺乏切实有效的防治手段。近几年的研究发现由活化的免疫系统介导的免疫炎症反应在许多中枢神经系统疾病中发挥着重要的作用。国内外学者的大量研究显示SAH后痉挛的脑动脉壁和脑实质中存在显着而持续的免疫炎症反应。在脑动脉瘤破裂发生SAH后，血液进入蛛网膜下腔并裂解释放出血红蛋白、胆红素等物质从而激活免疫炎症系统。SAH后脑动脉壁中有中性粒细胞、巨噬细胞和其它免疫细胞浸润，免疫球蛋白及补体沉积，以及血管内皮发生肿胀与变性凋亡、血管中膜及外膜增厚等炎症表现，上述变化与CVS发生的时相及迟发性缺血性神经功能损害相一致。而且，在SAH大鼠脑组织中，许多与免疫炎症相关的基因及其产物发生了明显的变化。虽然具有许多潜在的副作用，旨在以减轻免疫炎症反应为目标的干预药物如类固醇激素、免疫抑制剂等对SAH后CVS及EBI显示出了肯定的效果。因此，免疫炎症反应是蛛网膜下腔出血后CVS及EBI有前景的治疗靶点。抑制过度免疫反应和炎性细胞激活、浸润及炎性细胞因子等的产生有望成为防治SAH后CVS及EBI的新的有效途径。研究目的1.探讨调节性T细胞过继转输对SAH后脑血管痉挛的缓解作用。2.探讨调节性T细胞过继转输在SAH后早期脑损伤中的保护作用。3.观察调节性T细胞过继转输对SAH后细胞损伤、凋亡及其相关因子的影响，以确定调节性T细胞对SAH后脑损伤保护的有关分子机制。从利用具有免疫抑制作用的调节性T细胞对SAH大鼠模型进行干预的方法中寻找可以治疗或改善SAH患者预后的药物。研究方法1.选择健康成年Wistar大鼠，雌雄各半，体重在300-350g之间，随机将大鼠分成假手术组、SAH+PBS处理组、SAH+脾细胞（spleen cells，SP）处理组、SAH+调节性T细胞(Tregs)治疗组。选择经股静脉输注的方法对SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组、SAH+Treg治疗组这叁个组的动物模型进行治疗干预。2.对上述分组的实验动物，在模型制作前及枕大池二次注血后6小时和12小时时用激光多普勒血流计动态测量动物顶叶皮层局部脑血流量（regional cerebral bloodflow,rCBF）；于SAH后2天时，经心脏灌注固定后分离出大鼠脑干做成冰冻切片，通过H-E染色法染色，在显微镜下观察基底动脉形态学变化，测定并比较各组大鼠模型基底动脉内外径和管壁厚度的变化。3.对上述分组动物，在SAH后2天时，留取大鼠新鲜的大脑皮层脑组织并提取蛋白，用Western blot法检测大脑皮层中基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinases-9，MMP-9)的表达水平；于SAH后2天时，用干湿重法测定并比较各组大鼠脑组织的含水率。4.在SAH后2天时，对脑组织切片行尼氏染色，用显微测量尺测量海马CA1区神经元细胞密度；用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP末端缺口标记法(Terminal deoxynuleotidyl transferase-mediated Dutp-biotin nick end-labaling，TUNEL)检测各组大鼠大脑皮层中的原位神经细胞的凋亡，对凋亡细胞计数并比较各组大鼠大脑皮层凋亡细胞数目的差异；用免疫荧光法检测并比较各组大鼠大脑皮层中activecaspase-3阳性表达的细胞数的差异；通过western blot法检测大脑皮层中activecaspase-3的表达水平。研究结果1.（1）除假手术组之外， SAH+PBS组、SAH+SP组、SAH+Tregs组大鼠模型制作之后6h和12h时顶叶皮层的rCBF均较模型制作之前的rCBF显着减少(p<0.01)，其中以SAH后PBS治疗组和SP治疗组最为明显，SAH后静脉输注Tregs治疗组的rCBF较另外两个治疗组显着改善(p<0.05)。（2）SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组、SAH+Tregs治疗组比假手术组的基底动脉明显痉挛缩窄、管壁增厚(p<0.05)，SAH+Tregs治疗组模型又比前两个治疗组的基底动脉管径显着增大，管壁变薄(p<0.01)。2.（1）干湿重法测定结果发现SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组、SAH+Tregs治疗组脑组织含水率较假手术组大鼠脑组织的含水率显着增加(p<0.05),Tregs细胞治疗组又比PBS处理组和SP处理组大鼠脑组织的含水率明显减少(p<0.05)；（2）Westernblot测定结果发现，与假手术组相比，SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组、SAH+Tregs治疗组MMP-9的表达量均显着增加(p<0.05)，而SAH+Tregs治疗组中该蛋白酶的表达量较SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组明显减少(p<0.05)。3.（1）在SAH后2天，尼氏染色发现SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组、SAH+Tregs治疗组大鼠海马CA1区正常椎体细胞密度较假手术组显着减小(p<0.05)，SAH+Tregs治疗组大鼠海马CA1区的正常椎体细胞密度较SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组明显增大(p<0.05)；（2）TUNEL染色法发现SAH后，SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组、SAH+Tregs治疗组大鼠大脑皮层中的凋亡细胞数较假手术组显着增多(p<0.05),SAH+Tregs治疗组中凋亡细胞数目明显减少(p<0.05)；（3）通过免疫荧光法发现SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组、SAH+Tregs治疗组大鼠大脑皮层中表达active caspase-3的细胞数较假手术组大鼠模型大脑皮层中active caspase-3的阳性细胞数显着增加（p<0.05），SAH+Tregs治疗组大鼠大脑皮层中active caspase-3阳性细胞数较SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组明显减少（p<0.05）。（4）western blot法发现SAH+PBS处理组、SAH+SP处理组、SAH+Tregs治疗组大鼠大脑皮层中activecaspase-3的表达水平较假手术组大鼠大脑皮层中active caspase-3的表达水平显着增加（p<0.01），SAH+Tregs治疗组大鼠模型大脑皮层中active caspase-3的表达水平较SAH+PBS处理组和SAH+SP处理组大鼠大脑皮层中active caspase-3的表达水平明显减少（p<0.05）。研究结论1.调节性T细胞过继转输可以缓解SAH后脑血管痉挛的程度和基底动脉的病理变化程度。2.调节性T细胞过继转输可以减轻SAH后脑水肿的程度，减少SAH后MMP-9的表达。3.调节性T细胞的过继转输通过调节active caspase-3的表达而抑制SAH后脑组织细胞发生细胞凋亡。(本文来源于《泰山医学院》期刊2014-04-01）
程焱[9]（2014）在《体外扩增的调节性T细胞过继转输对缺血性脑卒中的保护作用及抗炎机制》一文中研究指出实验目的：1.建立大鼠CD4+CD25+调节性T细胞（regulatory T cells， Tregs）的分离和体外扩增方法，并检测分离的和扩增的Tregs纯度、活性及其免疫抑制活性。2.探讨体外扩增的Tregs静脉输注移植对大鼠缺血性脑卒中的保护作用。3.研究体外扩增的Tregs输注移植后脑缺血再灌注大鼠固有的和入侵的炎症细胞的变化，并探讨Tregs对脑缺血后神经炎症反应的抑制作用。研究方法：1.采用免疫磁珠细胞分选(Magnetic cell sorting, MACS)两步法从健康成年SD大鼠脾脏和淋巴结中提取CD4+CD25+Tregs，然后加入刺激因子anti-CD3、anti-CD28、IL-2以及雷帕霉素与之共培养进行体外扩增。用流式细胞仪测定分离的以及培养的细胞中Tregs的纯度，台盼蓝染色法检测细胞的活性，体外增殖抑制试验测定新鲜分离的和扩增的Tregs的增殖及其抑制功能。2.线栓法制备右侧大脑中动脉阻塞（MCAO）模型，缺血2h再灌注。实验大鼠随机分成假手术组、PBS处理组、脾细胞（SP）处理组和Treg细胞治疗组。在Treg细胞输注后3d、7d、14d采用Zea Longa、触须诱导的前肢放置试验、足失误试验、圆筒实验对各组大鼠进行神经功能评分；于术后2w采用水迷宫实验评价各组大鼠的空间认知能力；行TTC染色和甲酚紫染色测量脑梗死体积比以及采用干湿称重法测量脑组织含水量；免疫荧光染色法检测缺血脑组织Caspase-3的表达情况；Fluro-JadeB染色观察神经元退化情况。3.模型处理和分组同前。于Treg细胞输注后3d、14d采用免疫荧光和免疫组化染色观察MPO、Iba1、GFAP在脑组织的表达情况以检测Treg细胞输注后对中性粒细胞（MPO）向脑部的浸润以及脑固有细胞如小胶质细胞（Iba1）和星形胶质细胞（GFAP）的反应性的影响，并采用Werstern Blot方法进一步验证各组大鼠脑组织中Iba1、GFAP的表达情况。结果：1.MACS分选获得的CD4+CD25+regulatory T细胞的纯度是84.50±5.08%，细胞存活率为95.22±2.97%。经过3周体外培养扩增，Tregs的纯度为76.03±4.04%，细胞存活率为94.31±3.14%。体外增殖抑制实验表明Tregs能显着抑制CD4+CD25-T细胞的增殖（P＜0.01），体外扩增的Tregs的抑制功能超过新鲜分离的细胞，差异具有统计学意义（P＜0.05）。2.脑缺血再灌注后3d，模型组大鼠各项神经功能评分达到高峰，与PBS组和SP组相比Tregs治疗组的感觉运动功能得到显着改善。Morris Water Maze test显示在MCAO后14d，Tregs治疗组的空间学习和记忆能力较PBS组和SP组均有显着改善。TTC染色和甲酚紫染色结果显示在MCAO后不同时间点Treg治疗组的脑梗死体积较PBS和SP处理组均显着降低。在MCAO后不同时间点，Tregs治疗组的脑组织含水量较PBS和SP处理组均有明显改善；Caspase-3、Fluro-JadeB染色结果显示Tregs治疗组脑缺血半暗带区的阳性细胞数目较PBS和SP处理组显着降低。3.免疫荧光染色观察脑组织中中性粒细胞的浸润情况，结果显示假手术组无或可见少量散在分布的MPO+细胞，PBS组和SP组MPO+细胞在缺血再灌注1-3d时向脑部浸润明显，Tregs治疗组的MPO+细胞数显着降低。免疫组化和免疫荧光染色结果显示在脑缺血2w时Tregs治疗组Iba1阳性和GFAP阳性细胞数较PBS和SP处理组显着降低，WesternBlot结果与免疫组化结果一致。结论1.本实验建立的分离和扩增大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的方法，可有效的获得高纯度、有活力且不影响其抑制功能的Treg细胞。2.扩增的CD4+CD25+Tregs治疗性输注可显着降低大脑中动脉阻塞脑缺血再灌注后脑梗死体积，降低凋亡及退化的神经元数目，并显着改善脑缺血再灌注后的神经功能损伤。3.体外培养扩增的Tregs治疗性输注可能是通过抑制外周中性粒细胞浸润以及调节小胶质细胞和星形胶质细胞的活化来介导Tregs对脑缺血再灌注的保护作用。(本文来源于《泰山医学院》期刊2014-04-01）
刘杨[10]（2014）在《过继转输调节性T细胞对弓形虫感染致不良妊娠结局影响的分子机制研究》一文中研究指出目的：探索Treg细胞相关功能分子在早孕期弓形虫感染致不良妊娠结局中的作用机制以及过继转输调节性T细胞对弓形虫感染致不良妊娠结局影响的分子机制。方法：为探索Treg细胞相关功能分子在早孕期弓形虫感染致不良妊娠结局中的作用机制,建立刚地弓形虫感染孕鼠模型,设感染组和正常对照组,感染组于孕8天腹腔感染刚地弓形虫(Toxoplasma gondii, T. gondii)速殖子,孕14天颈椎脱臼处死孕鼠,记录妊娠结局。制备母胎界面(子宫、胎盘)和脾淋巴细胞悬液,流式检测Treg细胞凋亡率及Treg细胞表面抑制性分子CTLA-4和PD-1的表达水平；同时制备胎盘上清,ELISA检测TGF-β、IL-10和IFN-γ的水平。为了进一步研究过继转输调节性T细胞对弓形虫感染致不良妊娠结局影响的分子机制,分别提取正常孕鼠母胎界面和脾中Treg细胞并用CFSE标记,然后分别过继转输给弓形虫感染的孕鼠,追踪过继转输的Treg细胞在受体孕鼠体内的分布情况。实验对照组感染孕鼠注射相同剂量PBS。在孕第14天观察并记录妊娠结局,采用流式检测母胎界面和脾中CTLA-4+Treg和PD-1+Treg细胞的表达水平,同时观察来自母胎界面和脾的CFSE+Treg细胞在受体孕鼠体内的分布情况;并用ELISA检测过继转输组与对照组感染孕鼠胎盘中TGF-β、IL-10和IFN-γ的水平。结果：正常对照组孕鼠精神状态良好,胎鼠、胎盘血供正常。感染组孕鼠精神萎靡不振,耸毛、拱背,活动明显减少；胎鼠血供不足,胎鼠、胎盘形状小,重量轻,胎盘有出血坏死。感染组Treg细胞CTLA-4和PD-1表达较正常组显着降低,并且弓形虫感染可以使Treg细胞凋亡明显增加。与正常对照组比,感染组胎盘上清TGF-β/IFN-γ和IL-10/IFN-γ的比值显著下降。另外,研究发现正常孕鼠母胎界面的Treg细胞CTLA-4和PD-1的表达量比脾脏中的高。实验发现,只有当转输来自于母胎界面的Treg细胞时,妊娠结局才得到改善。过继转输母胎界面Treg细胞的感染组孕鼠相比较未转输Treg细胞的感染组孕鼠精神状态好,吸收胎率降低,胎鼠血供改善、重量增加,胎盘出血坏死情况减轻；而过继转输脾Treg细胞的感染组孕鼠的精神状态与未过继转输Treg细胞的感染组孕鼠相似,其胎鼠、胎盘的外观、重量、吸收胎率也无明显改善。此外发现,无论是来自母胎界面的Treg细胞还是来自脾的Treg细胞到达受体孕鼠相同部位(母胎界面或脾)的数量无明显差异。转输母胎界面Treg细胞的感染组孕鼠CTLA-4和PD-1增加的幅度显着高于转输脾脏Treg细胞的感染孕鼠。母胎界面TGF-β/IFN-γ和IL-10/IFN-γ的比值在转输母胎界面Treg细胞的感染组比未转输Treg的感染组显着升高,而在转输脾Treg细胞的感染组相对于未转输Treg细胞的感染组则无明显差异。结论：Treg细胞相关功能分子CTLA-4和PD-1在弓形虫感染致不良妊娠结局中发挥重要作用；过继转输母胎界面Treg细胞能显着改善弓形虫感染导致的不良妊娠结局。(本文来源于《滨州医学院》期刊2014-03-15）
过继转输论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:观察过继转输微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(knockdown,KD)CD4~+ T细胞对小鼠急性肝损伤模型的影响,并探讨其意义。方法:利用磁珠分选技术分别获得正常野生型(WT)小鼠和miR-7KD小鼠脾脏中CD4~+ CD62L~+ T细胞;CFSE染色标记后,按每只小鼠2×10~6个细胞,经尾部静脉注射给同系WT小鼠,并利用伴刀豆球蛋白A建立急性肝损伤模型;观察过继转输后2组小鼠肝脏的形态、重量及其重量指数的变化;HE染色观察小鼠肝脏组织的病理学变化;real-time PCR检测小鼠肝脏组织中凋亡相关分子Bax和P53的表达;流式细胞术检测小鼠肝脏组织中CFSE标记的CD4~+ T细胞活化相关膜分子CD62L表达水平以及细胞因子白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的表达变化。结果:与对照组相比,过继转输miR-7KD小鼠CD4~+ CD62L~+ T细胞组(miR-7KD转输组)小鼠的肝脏重量明显减轻(P<0.01),但重量指数显着增加(P<0.05);HE染色显示miR-7KD转输组的肝脏细胞损伤增加;real-time PCR结果显示miR-7KD转输组肝脏组织中凋亡相关细胞分子Bax和P53的相对表达水平均明显升高(P<0.05);流式细胞术检测结果进一步显示肝脏组织中的CFSE~+细胞活化相关分子CD62L的表达水平明显降低(P<0.01),细胞因子IFN-γ的表达水平明显增加(P<0.05),而IL-4的表达水平显着降低(P<0.01)。结论:过继转输miR-7敲减CD4~+ T细胞可显着加重急性肝损伤模型小鼠的肝组织损伤。这为后续深入探讨急性肝损伤的发生机制提供了重要的实验基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
过继转输论文参考文献
[1].焦玉萌,夏惠,王雪梅,陶志勇,朱琳.刚地弓形虫排泄分泌抗原刺激NK细胞过继转输对小鼠B16F10黑色素瘤生长的抑制作用[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2019
[2].岳东旭,赵娟娟,陈慧子,丁涛,胡琳.miR-7敲减CD4~+T细胞过继转输对小鼠急性肝损伤模型的影响[J].中国病理生理杂志.2018
[3].张庆义.过继细胞转输治疗白血病微小残留病灶治疗效果的Meta分析[J].世界最新医学信息文摘.2017
[4].崔澄,郝淑维,刘杰,郑文广,王雅卓.不同雄性淋巴细胞及其Exosomes过继转输改善妊娠丢失孕鼠胚胎发育的比较分析[J].中国免疫学杂志.2014
[5].程焱,孙保亮.体外扩增的调节性T细胞过继转输对脑缺血的保护作用[C].中国微循环学会2014年全国学术会议大会汇编.2014
[6].王文文.调节性T细胞过继转输减轻脑出血后血脑屏障损害和细胞凋亡[D].泰山医学院.2014
[7].张磊.蛛网膜下腔出血的抗炎治疗：调节性T细胞过继转输[D].泰山医学院.2014
[8].张礼萍.调节性T细胞过继转输对SAH后脑血管痉挛及早期脑损伤的影响[D].泰山医学院.2014
[9].程焱.体外扩增的调节性T细胞过继转输对缺血性脑卒中的保护作用及抗炎机制[D].泰山医学院.2014
[10].刘杨.过继转输调节性T细胞对弓形虫感染致不良妊娠结局影响的分子机制研究[D].滨州医学院.2014
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