胭脂红酸人工抗原合成及多克隆抗体的制备

论文摘要

为了快速高效检测食品中胭脂红酸含量,本研究通过羟基二咪唑法制备了胭脂红酸人工抗原;通过免疫新西兰大耳白兔获得了胭脂红酸抗血清,经硫酸铵沉淀法分离纯化获得抗胭脂红酸多克隆抗体;利用棋盘滴定法检测了抗体效价,并探究了溶液pH值、离子强度和有机溶剂对ELISA反应的影响,优化出最佳ELISA反应条件;在最佳反应条件下,建立了胭脂红酸的间接竞争ELISA抑制曲线。紫外光谱扫描结果显示,免疫抗原（CA-BSA）和检测抗原（CA-OVA）均与载体蛋白成功偶联;经分离纯化获得的胭脂红酸多克隆抗体效价为1:16000;检测抗原最佳浓度为1μg/m L、ELISA反应最适缓冲液为pH7.4、含50mmol/L Na+且无甲醇的磷酸盐缓冲液;间接竞争ELISA标准曲线的线性范围为7.8～1150ng/mL,检测限为1ng/mL,灵敏度IC50值为95.2ng/mL。本研究为开发CA快速检测试剂盒对食品中胭脂红酸含量的大量快速测定奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 何峰容,杨帆帆,李佳楠

关键词: 胭脂红酸,人工抗原,多克隆抗体,酶联免疫吸附试验

来源: 现代食品科技 2019年03期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 江汉大学生命科学学院,武汉云克隆科技股份有限公司

基金: 武汉市黄鹤英才计划(2014)

分类号: TS207.3

DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.3.040

页码: 270-274+240

总页数: 6

文件大小: 1348K

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