多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白论文_关瑞攀,白智伟,王倩,唐笔锋,崔秀明

导读:本文包含了多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:醛酸,蛋白,抑制,半乳糖,基因,甘蓝,镰刀。

多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白论文文献综述

关瑞攀,白智伟,王倩,唐笔锋,崔秀明[1](2018)在《叁七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的功能分析》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是植物抗病防御系统的重要组成部分。在前期研究中,从叁七中分离得到一个编码PGIP蛋白的基因PnPGIP,PnPGIP在转录水平响应叁七根腐病菌茄腐镰刀菌的侵染。为深入分析PnPGIP的功能,构建PnPGIP的原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行大量表达,纯化获得PnPGIP的重组蛋白,并进行体外平板抑菌试验;构建PnPGIP的植物超表达载体,通过根癌农杆菌介导产生了PnPGIP转基因烟草,分析T2转基因烟草离体叶片对茄腐镰刀菌的抗性。PnPGIP原核重组蛋白对茄腐镰刀菌、胶孢炭疽菌、核盘菌和轮枝状镰刀菌的菌丝生长具有很强的抑制作用,并且随着蛋白量的增加,抑制活性也逐渐增强。q RT-PCR分析结果显示,PnPGIP在T2转基因烟草中大量表达。此外,与野生型烟草相比,转基因烟草对茄腐镰刀菌的抗性显着增强。PnPGIP是叁七中参与茄腐镰刀菌防御反应的重要抗病基因。(本文来源于《华北农学报》期刊2018年02期)

孙志伟,李佳欣,张茹琴,迟玉成,徐曼琳[2](2016)在《花生多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因ApPGIP1的克隆》一文中研究指出以花育25(Arachishypogaea L.)植株总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,获得大约1 000 bp的条带。将该片段克隆到pMD19-T simple vector载体上,经测序表明,该序列全长967 bp,含一个开放阅读框(ORF),编码一个由318个氨基酸残基组成的蛋白质。在线软件预测该蛋白质的分子量为37.9kD,理论等电点为6.65,碱性氨基酸(Lys+Arg)占8.9%,酸性氨基酸(Asp+Glu)占9.3%,亮氨酸比例最高(12.8%);不稳定系数为39.10,说明该蛋白为稳定蛋白。将该cDNA及其推导的氨基酸序列在NCBl网站上进行Blast比对,表明该及其推导的氨基酸序列与已报道的PGIP基因及其推导的氨基酸的序列同源性最高。分析结果表明,所克隆片段为花生的PGIP基因,命名为ApPGIP1,并提交给GenBank。蛋白质疏水性分析表明,该蛋白N端有一明显的疏水区,采用神经网络方法预测蛋白质信号肽表明,ApPGIP1信号肽为N端的26个氨基酸残基,这与疏水性分析结果相一致。序列分析结果还表明,ApPGIP1成熟肽氨基酸序列中具有4个潜在的N-糖基化位点,N端和C端各有4个参与二硫键形成的半胱氨酸残基,亚细胞定位分析表明,该蛋白属于胞外蛋白。ApPGIP1叁级结构预测结果表明,由ApPGIP1肽链构建的叁维模型含9个α-螺旋和21个β-折迭,主体结构由9个串联的LRRs基序组成;ApPGIP1氨基酸序列从第74个氨基酸开始的LRRs基序均具有"LxxLxLxxNxLS/TGxIPxxLxxL"(x代表任意氨基酸残基)这样的共有序列,除个别替换、插入或缺失外,序列高度保守。(本文来源于《植保科技创新与农业精准扶贫——中国植物保护学会2016年学术年会论文集》期刊2016-11-10)

王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春[3](2016)在《桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一种特异性结合和抑制真菌内切多聚半乳糖醛酸酶(endo-PG)活性的细胞壁结合蛋白。采用RT-PCR从嘉陵40(Morus atropurpurea Roxb.)果实中扩增PGIP基因cDNA,利用生物信息学的方法分析其编码蛋白的结构和功能。结果表明,嘉陵40PGIP开放阅读框全长1017 bp,编码338个氨基酸残基,被命名为MaPGIP1。MaPGIP1蛋白分子量37.9 kD,等电点为为6.65,信号肽为N端26个氨基酸残基,具有4个潜在的N-糖基化位点。MaPGIP1蛋白的核心区域由9个串联的LRRs基序组成。原核表达产物经SDS-PAGE分析,MaPGIP1蛋白以包涵体形式出现,Western blot证实了重组蛋白的特异性,经过Ni-NTA柱纯化和分步透析复性后获得可溶性蛋白,该蛋白能部分抑制果桑肥大性菌核病菌(Ciboria shiraiana)PG(Cs PG)活性,其最适pH值为4.5~5.0,最适温度30℃。抑菌试验结果表明,MaPGIP1蛋白在果桑肥大性菌核病菌菌丝侵染油菜叶片过程中具有一定的抑制效果。(本文来源于《第十二届家(柞)蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集(摘要汇编)》期刊2016-07-01)

王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春[4](2015)在《桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一种特异性结合和抑制真菌内切多聚半乳糖醛酸酶(endo-PG)活性的细胞壁结合蛋白。采用RT-PCR从嘉陵40(Morus atropurpurea Roxb.)果实中扩增PGIP基因c DNA,利用生物信息学的方法分析其编码蛋白的结构和功能。结果表明,嘉陵40PGIP开放阅读框全长1017 bp,编码338个氨基酸残基,被命名为MaPGIP1。MaPGIP1蛋白分子量37.9 k D,等电点为为6.65,信号肽为N端26个氨基酸残基,具有4个潜在的N-糖基化位点。MaPGIP1蛋白的核心区域由9个串联的LRRs基序组成。原核表达产物经SDS-PAGE分析,MaPGIP1蛋白以包涵体形式出现,Western blot证实了重组蛋白的特异性,经过Ni-NTA柱纯化和分步透析复性后获得可溶性蛋白,该蛋白能部分抑制果桑肥大性菌核病菌(Ciboria shiraiana)PG(Cs PG)活性,其最适pH值为4.5~5.0,最适温度30℃。抑菌试验结果表明,MaPGIP1蛋白在果桑肥大性菌核病菌菌丝侵染油菜叶片过程中具有一定的抑制效果。(本文来源于《作物学报》期刊2015年09期)

林世锋,安雪琴,杨承,王仁刚,任学良[5](2015)在《两个烟草多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆和表达分析》一文中研究指出为了研究多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)在烟草中的生物学功能,运用生物信息学方法,结合RT-PCR和SMART RACE技术,从烟草中克隆到2个多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因c DNA和DNA全长序列,分别命名为Nt PGIP1(Gen Bank登录号:KF317203)和Nt PGIP2(Gen Bank登录号:KF317204)。Nt PGIP1基因全长为1 413 bp,编码338个氨基酸;Nt PGIP2基因全长为1 185 bp,编码329个氨基酸;两基因均没有内含子序列,核苷酸序列有50%的一致性,编码的氨基酸序列有54%的一致性。两基因编码蛋白均含有植物PGIP蛋白特有的重复保守序列LXXLXXLXXLXLXXNXLXGXIPXX。对PGIP基因在烟草不同组织表达量分析发现,两基因在根、茎、叶和芽中均有表达,其中均在茎中表达量最高,其次是根,叶中表达量很低。(本文来源于《华北农学报》期刊2015年01期)

燕孟娇[6](2014)在《甘蓝型油菜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白PGIP9和PGIP15基因克隆及真核表达》一文中研究指出黑胫病病原菌感染油菜时,病原菌会分泌一系列的聚半乳糖醛酸酶(PGs)来降解植物的天然屏障——细胞壁,并诱导油菜产生一系列抗性基因来防御黑胫病病原菌。其中特异性蛋白聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIPs)能非竞争性的抑制病原菌的内切多聚半乳糖醛酸酶(endo-PGs)的活性,来抵御病原真菌的侵染,抑制病害的发生,从而增强植物的抗病性。所以PGIP是一个有效的抗真菌病害的蛋白,值得用于植物的抗病育种。但植物中直接分离纯化该蛋白有产率低、工艺复杂等弊端,因此希望通过本研究克隆出Pgip基因,构建出能够产生PGIP蛋白的工程菌株。本文克隆2个甘蓝型油菜的聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIPs)相关基因,转入毕赤酵母中诱导表达,并检测黑胫病病原菌诱导甘蓝型油菜产生的PGIP蛋白对病原菌分泌的PG是否有抑制作用,为提高油菜黑胫病的抗性具有重大意义。主要研究内容如下:1、接种黑胫病病原菌NM—1孢子悬浮液于甘蓝型油菜——青杂5号子叶叶片,提取病斑周围叶片总RNA,扩增获得pgip9和pgip15的CDS编码序列,构建克隆载体pMD-19-T-pgip9/15。2、构建真核表达载体pPICZaA-pgip9/15,转入Pichia pastoris PAMD16宿主细胞中构建工程菌株。SDS-PAGE及Western blot检测,在36-37KDa处出现单一的融合蛋白条带。3、工程菌株诱导表达后,上清液中PGIP9和PGIP15蛋白含量分别为12.356μg/μL和11.976μg/μL。通过DNS法和琼脂糖扩散法检测确定表达蛋白PGIP9和PGIP15对黑胫病病原菌NM-1分泌的PG有一定的抑制作用。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2014-05-22)

刘昆昂,王振中[7](2013)在《不同香蕉品种多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白活性的比较》一文中研究指出植物多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一种富含亮氨酸重复区域的蛋白质,能够非竞争性地抑制真菌的多聚半乳糖醛酸酶(PG)的活性。以目前生产上几个主要抗枯萎病的香蕉品种为材料,参照Gross的PGIP活性测定方法,通过测定了Musa AAA、Musa ABB、Musa ABB、Musa AA和Musa AAAB等不同细胞基因型的香蕉品种的PGIP活性,发现东莞大蕉(Musa ABB)的活性最高。通过对东莞大蕉根、假茎、叶不同部位的PGIP活性比较,发现假茎的活性最高。用香蕉枯萎病菌4号生理小种接种诱导东莞大蕉能明显提高PGIP活性,观察还发现东莞大蕉苗期PGIP的活性明显高于后期。(本文来源于《热带作物学报》期刊2013年01期)

李建湘,王振中[8](2013)在《5种瓜类植物多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白的诱导表达及活性测定》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一种富含亮氨酸重复单位的糖蛋白,能非竞争性地抑制真菌多聚半乳糖醛酸酶(PG)的活性,从而提高植物的抗病性。以黄瓜、苦瓜、冬瓜、节瓜和甜瓜幼苗为材料,研究PGIP的诱导表达特性及在不同组织中的含量差异。通过比较经孢子诱导、SA诱导和黑暗诱导的黄瓜幼苗中的PGIP的相对含量,发现经病原菌孢子悬浮液处理48 h时PGIP的表达量最高。对经孢子诱导48 h的黄瓜幼苗的根、茎、叶中的PGIP含量进行比较,发现茎中PGIP的相对含量最高。测定这5种瓜类的PGIP对6种尖孢镰刀菌粗PG的抑制作用,发现苦瓜PGIP的相对活性较高,并证实了不同的PGIP能够特异性地识别不同的PG,PGIP对不同PG存在着选择性抑制。(本文来源于《广东农业科学》期刊2013年01期)

张弢[9](2012)在《甘蓝多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白BoPGIP基因的克隆及序列分析》一文中研究指出PGIP是一种特异性结合和抑制真菌内切PG活性的细胞壁结合蛋白,在植物分子抗病育种中占有十分重要的地位。甘蓝PGIP基因的克隆和序列分析,将为进一步通过转基因技术培育抗病甘蓝新品种奠定基础。本研究通过同源序列克隆法,根据GenBank已登录的青花菜BoPGIP1(Accession:JF325875)基因全长序列设计基因特异性引物,利用PCR扩增技术从甘蓝中克隆基因,利用生物信息学的方法对其编码蛋白的结构和功能进行了预测。将获得的PGIP基因命名为BoPGIP。该基因DNA全长为1065bp,包含1个内含子和2个外显子。外显子全长975bp,编码342个氨基酸,分子量为36.2kD,等电点是6.26。该基因属于PGIP基因家族,具有典型的LRR结构域;功能位点分析显示编码蛋白序列中包括4个N-糖基化位点(65~68,106~109,130~133,254~257),1个蛋白激酶C磷酸化位点(189~191),5个酪蛋白激酶II磷酸化位点(73~76,78~81,151~154,182~185,304~307)和4个N-豆蔻酰化位点(157~162,188~193,236~241,273~278);N末端具有一明显跨膜区域和一个典型信号肽序列;二级结构中包含31.79%helix,13.89sheet和54.32%loop,二级结构以无规则卷曲为主。通过对所克隆的甘蓝BoPGIP基因分析可知,该基因属于PGIP基因家族的新成员,基因的克隆及序列分析为进一步验证甘蓝BoPGIP的功能奠定了基础。(本文来源于《中国农学通报》期刊2012年28期)

仇平平[10](2012)在《辣椒多聚半乳糖醛酸酶可逆性抑制蛋白(PGIP)基因转化小麦、玉米及抗性评价》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(polygalacturonase inhibiting protein, PGIP)是一种特异性蛋白,能够非竞争性地抑制病原菌的内切多聚半乳糖醛酸酶(endo polygalacturonase, endo-PG)活性,增强植物的抗病性。研究发现多种植物体内含有PGIP基因,这类基因承受了较小的进化压力,进化速率较快,致使有些植物如禾谷类作物的PGIP基因已经丢失,而多数茄科类作物留了这类基因。本研究主要是将PGIP基因转入到禾本科作物小麦和玉米基因组中,以期获得转PGIP基因的小麦玉米植株,从而能对真菌病害如小麦赤霉病、玉米纹枯、玉米大小斑病等产生抗性。本研究的主要结果和结论如下:1、植物表达载体pCBUPGIP构建将克隆出的PGIP基因和含有Bar基因的pCAMBIA-Bar-Ubi载体双酶切后用T4连接酶连接构建植物表达载体pCBUPGIP,并用PCR鉴定。成功构建载体后转入大肠杆菌进行扩大培养提取质粒,纯化后,测定浓度并稀释至1.0ug/L用于基因枪法转化小麦同时采用液氮冻融法将载体转入根癌农杆菌LBA4404,转化玉米。2、转基因小麦玉米利质材料的获得通过优化小麦玉米再生体系,建立了高效再生体系,并成功获得小麦品种扬麦158的转化再生株、玉米自交系A188和齐319的转化再生株。提取转化株的总DNA,用PGIP两端的引物扩增DNA样品,均得到了660bp的目的片段。3、转化株进行真菌病害抗病性初步鉴定对小麦转化品种扬麦158进行小麦赤霉病的抗性鉴定,结果显示转基因小麦表现出抗性;对玉米转化品种A188进行了玉米纹枯病、玉米大小斑病的抗性鉴定,结果显示转基因玉米表现出抗性。(本文来源于《山东农业大学》期刊2012-05-07)

多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

以花育25(Arachishypogaea L.)植株总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,获得大约1 000 bp的条带。将该片段克隆到pMD19-T simple vector载体上,经测序表明,该序列全长967 bp,含一个开放阅读框(ORF),编码一个由318个氨基酸残基组成的蛋白质。在线软件预测该蛋白质的分子量为37.9kD,理论等电点为6.65,碱性氨基酸(Lys+Arg)占8.9%,酸性氨基酸(Asp+Glu)占9.3%,亮氨酸比例最高(12.8%);不稳定系数为39.10,说明该蛋白为稳定蛋白。将该cDNA及其推导的氨基酸序列在NCBl网站上进行Blast比对,表明该及其推导的氨基酸序列与已报道的PGIP基因及其推导的氨基酸的序列同源性最高。分析结果表明,所克隆片段为花生的PGIP基因,命名为ApPGIP1,并提交给GenBank。蛋白质疏水性分析表明,该蛋白N端有一明显的疏水区,采用神经网络方法预测蛋白质信号肽表明,ApPGIP1信号肽为N端的26个氨基酸残基,这与疏水性分析结果相一致。序列分析结果还表明,ApPGIP1成熟肽氨基酸序列中具有4个潜在的N-糖基化位点,N端和C端各有4个参与二硫键形成的半胱氨酸残基,亚细胞定位分析表明,该蛋白属于胞外蛋白。ApPGIP1叁级结构预测结果表明,由ApPGIP1肽链构建的叁维模型含9个α-螺旋和21个β-折迭,主体结构由9个串联的LRRs基序组成;ApPGIP1氨基酸序列从第74个氨基酸开始的LRRs基序均具有"LxxLxLxxNxLS/TGxIPxxLxxL"(x代表任意氨基酸残基)这样的共有序列,除个别替换、插入或缺失外,序列高度保守。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白论文参考文献

[1].关瑞攀,白智伟,王倩,唐笔锋,崔秀明.叁七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的功能分析[J].华北农学报.2018

[2].孙志伟,李佳欣,张茹琴,迟玉成,徐曼琳.花生多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因ApPGIP1的克隆[C].植保科技创新与农业精准扶贫——中国植物保护学会2016年学术年会论文集.2016

[3].王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春.桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析[C].第十二届家(柞)蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集(摘要汇编).2016

[4].王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春.桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析[J].作物学报.2015

[5].林世锋,安雪琴,杨承,王仁刚,任学良.两个烟草多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆和表达分析[J].华北农学报.2015

[6].燕孟娇.甘蓝型油菜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白PGIP9和PGIP15基因克隆及真核表达[D].内蒙古大学.2014

[7].刘昆昂,王振中.不同香蕉品种多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白活性的比较[J].热带作物学报.2013

[8].李建湘,王振中.5种瓜类植物多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白的诱导表达及活性测定[J].广东农业科学.2013

[9].张弢.甘蓝多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白BoPGIP基因的克隆及序列分析[J].中国农学通报.2012

[10].仇平平.辣椒多聚半乳糖醛酸酶可逆性抑制蛋白(PGIP)基因转化小麦、玉米及抗性评价[D].山东农业大学.2012

论文知识图

(NH4)2SO4饱和度与蛋白质析出量的关系转BG2基因植株抗溃疡病分析处理东莞大蕉与对照PGIP活力测定类...植物抗病基因的分类四F妙此1.IC俪16叼...转基因植株组培苗MDA与PAL的变化基因核苷酸序列聚类结果

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