导读:本文包含了小鼠血腹模型论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:模型,小鼠,阿司匹林,血症,高尿酸,血尿酸,冰片。
小鼠血腹模型论文文献综述
杨明,麻雅婷,何赏,段欣欣,王佳楠[1]（2017）在《不同细菌所致小鼠血流感染模型中MIP-1β、MIP-2和IL-12p70的表达及变化规律》一文中研究指出目的探讨4种血流感染常见细菌致小鼠血流感染后MIP-1β、MIP-2和IL-12p70的表达及变化规律。方法建立金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CD-1(ICR)小鼠血流感染模型,采用Luminex液相芯片系统检测各实验组和PBS对照组小鼠感染后0.5、1、3、6、12、24和48 h MIP-1β、MIP-2和IL-12p70的含量。结果 MIP-1β的浓度在细菌入血后1 h时明显升高,金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌组和对照组浓度分别为(134.5±18.3)、(61.5±15.4)、(3 354.0±809.0)、(6 888.4±1 100.2)和(28.9±4.6)pg/mL;IL-12p70达峰值时的浓度分别为(389.3±118.1)、(127.6±10.0)、(42.2±3.5)、(62.8±8.4)和(4.8±0.3)pg/mL。MIP-1β、MIP-2的浓度在大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组高于其他实验组和对照组(均P<0.01),而IL-12p70的浓度在金黄色葡萄球菌组和粪肠球菌组中高于大肠埃希菌组、肺炎克雷伯菌组和对照组(均P<0.01)。结论大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组MIP-1β和MIP-2的浓度高于金黄色葡萄球菌组和粪肠球菌组,而金黄色葡萄球菌组和粪肠球菌组IL-12p70的浓度高于大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组。联合检测多种细胞因子或趋化因子在预测革兰阳性或革兰阴性菌感染方面有一定价值,且可能为感染早期指导治疗提供依据。(本文来源于《中国感染控制杂志》期刊2017年11期）
罗素[2]（2016）在《鱼源无乳链球菌小鼠血脑屏障开放评估模型的建立及cas9基因功能分析》一文中研究指出无乳链球菌(Streptococcus agalctiae),亦称 B 群链球菌(Group B Streptococcus,GBS),具有广泛的宿主感染范围,不仅能引起新生儿脑膜炎及肺炎和奶牛乳腺炎,还可引致鱼类脑膜炎和败血症。近年来,无乳链球菌已成为鱼类重要致病菌之一,其传染性强,死亡率高,给水产养殖业造成惨重经济损失,严重制约了我国罗非鱼养殖业的稳定发展。研究发现,无乳链球菌对鱼类的致死率可达100%,但其致病机制尚不清楚。因此,研究其致病机制对防控鱼类无乳链球菌病至关重要。1鱼源无乳链球菌小鼠血脑屏障开放评估模型的建立本试验筛选出一株产β-半乳糖苷酶大肠杆菌M5,毒力测定得知其对小鼠半数致死量(LD50)>2×109CFU;各脏器细菌载量分析表明,该菌不能穿透血脑屏障(BBB)进入中枢神经系统,因此该菌可作为小鼠血脑屏障开放程度的指示菌。在此基础上,对小鼠腹腔注射l00μL浓度为103CFU/mL的无乳链球菌GD201008-001,并于注射后3h、6h、9h和12h,通过尾静脉注射大肠杆菌M5 100μL(2×108CFU),于5min后眼球采血并处死小鼠,无菌取脑,涂板计数。结果发现,脑组织中的无乳链球菌和大肠杆菌M5都随感染时间的延长而增加,证明该模型稳定性良好,为细菌性脑膜炎致病机制的研究提供了实用可靠的工具。2鱼源无乳链球菌透明质酸酶的表达及其对小鼠的致病作用为了确定透明质酸酶(hyaluronidase,Hyl)在鱼源无链球菌穿透血脑屏障引起脑膜炎过程中的作用,根据实验室分离并公布在GenBank上的罗非鱼源无乳链球菌的全基因组序列,设计hylB特异性引物,采用PCR技术扩增长为3156bp的hylB基因片段。用限制性内切酶EcoR Ⅰ和xho Ⅰ消化后将该片段克隆至表达载体pET32a(+),构建重组表达质粒pET32a(+)-hylB,经双酶切、测序鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,进行体外原核表达,获得有透明质酸酶活性的137.1kD目的蛋白。经镍离子亲和层析柱纯化后,注射ICR小鼠,在不同时间点处死小鼠,无菌取心、肝、脾、肺、肾和脑制作病理切片,显微镜下观察到心、肝和肾无明显病变;脾脏表现轻微出血;肺组织病变严重,表现为血管破裂,内皮细胞松散,肺间质增厚,肺实变;脑组织有大量小胶质细胞浸润,脑微血管出血,血管内皮细胞肿胀脱落。研究表明,Hyl在鱼源无乳链球菌引致肺炎和破坏血脑屏障引起脑膜炎过程中发挥重要作用。3鱼源无乳链球菌cas9基因缺失株的构建为了明确cas9基因对无乳链球菌毒力的影响,根据公布在GenBank上的鱼源无乳链球菌GD201008-001株的基因组,设计cas9基因的上下游引物,通过PCR技术扩增其上下游片段,然后通过融合PCR方法融合扩增所得的上下游同源臂。将上下游同源臂连接至温敏型自杀质粒pSET-4s。通过电击转化将重组质粒转入GD201008-001株进行同源重组,通过抗性和温度筛选出cas9基因缺失株。将含有启动子的目的基因片段连入链球菌-大肠杆菌穿梭质粒pSET2,再转入缺失株,构建互补株。通过常规PCR、基因测序及荧光定量PCR检测目的基因在亲本株,缺失株和互补中的mRNA转录水平,证明cas9基因缺失株和互补株构建成功,为后续的生物学特性分析奠定了基础。4鱼源无乳链球菌cas9基因缺失株的特性分析为了进一步研究鱼源无乳链球菌cas9基因的功能,试验比较了野生株、缺失株和互补株在生物体内外的特性差异。研究发现,3株菌生长曲线无显着差异;小鼠巨噬细胞对cas9基因缺失株的吞噬率高于野生株和互补株,但差异不显着;相比于野生株和互补株,cas9基因缺失株对bEnd.3细胞的黏附率显着下降。缺失株对斑马鱼的LD50显着高于野生株和互补株;对小鼠的LD50有所升高,与野生株和互补株无显着差异,但小鼠死亡时间推迟12h。将培养至OD600约为0.6的3株菌(103CFU/mL)100μL及200μLHy1蛋白(2.0mg/mL)注射小鼠,分别在注射3h、6h、9h和12h后尾静脉注射大肠杆菌M5(2×108CFU),10min后眼球采血,并处死小鼠,无菌取脑,匀浆后10倍比稀释涂至THB和M63培养基平板。计数结果表明,3株菌在诱导BBB开放的时间上明显不同,感染野生株和互补株6h后小鼠BBB开放,而攻毒缺失株△cas99h后BBB开放;在攻毒后9h至12h,野生株和互补株攻毒组穿过BBB的无乳链球菌和大肠杆菌显着高于缺失株组。攻毒Hyl蛋白后,BBB在3h时已开放,在攻毒后6h至9h,蛋白组与3株细菌组穿过BBB的大肠杆菌无明显差异,而在12h时BBB开放程度显着低于野生株。研究结果表明cas9基因与无乳链球菌的毒力密切相关。(本文来源于《南京农业大学》期刊2016-06-01）
谢尹晶,段晋燕,张洪瑞,王娜,刘一凡[3]（2014）在《临床分离菌株ICR小鼠血流感染模型的建立》一文中研究指出目的建立革兰阴性菌和革兰阳性菌ICR小鼠血流感染模型,为寻找能在疾病早期鉴别不同病原菌所致血流感染的炎症指标等研究提供有效可靠的实验模型。方法收集临床分离的大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌菌株,将不同浓度的细菌悬液通过尾静脉注射入ICR小鼠体内,按Reed-Muench方法计算半数致死量LD50,并根据1/2LD50浓度的菌液建立小鼠感染模型,通过进行小鼠血液白细胞(WBC)计数和C-反应蛋白(CRP)检测,肝和肺的病理改变观察,验证造模结果。结果大肠埃希菌的LD50为1.77×109 CFU/ml,金黄色葡萄球菌为4.21×108 CFU/ml;运用1/2LD50的菌液浓度感染后6h,大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌感染小鼠血浆CRP即明显升高,分别为(263.3±28.7)、(499.1±32.6)ng/ml;感染后12h,各组小鼠的WBC明显升高;感染12h即可观察到肝和肺的炎症细胞浸润,至感染48h肺泡腔可见大量渗出液,肝脏可见明显坏死灶。结论成功建立小鼠血流感染模型,为血流感染的早期诊断和不同病原菌感染的鉴别诊断等研究提供了可靠的动物模型。(本文来源于《中华医院感染学杂志》期刊2014年03期）
姚洪武,王建,刘岩,王丹丹[4]（2011）在《麝香与冰片不同配比对急性脑缺血模型小鼠血脑屏障通透性的影响》一文中研究指出目的:考察麝香与冰片配伍对急性脑缺血模型小鼠血脑屏障通透性的影响。方法:采用双侧颈总动脉结扎法制造急性脑缺血模型,通过测定渗出脑血管外的伊文思蓝含量分析药物对血脑屏障通透性的影响。结果:假手术组与吐温对照组脑组织伊文思蓝含量无显着差异(P>0.05);模型组与假手术组及吐温对照组比较,伊文思蓝含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组脑组织中伊文思蓝含量均有所降低,其中,麝香与冰片1∶2、1∶3配伍组的伊文思蓝含量显着降低(P<0.05)。结论:麝香与冰片配伍可降低小鼠缺血状态下血脑屏障的通透性,提示二者配伍能调节病理状态下的血脑屏障而起到保护作用。(本文来源于《成都中医药大学学报》期刊2011年04期）
张海英,卓来东,李玉珍[5]（2009）在《小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响》一文中研究指出目的:考察小剂量阿司匹林对正常小鼠和高尿酸血症模型小鼠血浆尿酸、肌酐、尿素氮的影响。方法:90只正常小鼠灌胃阿司匹林溶液12.5,25,50 mg.kg-1(每组30只),qd,持续1周。末次给药后,每剂量组一半小鼠立即腹腔注射尿酸溶液250 mg.kg-1,以形成高尿酸血症模型。正常小鼠末次给药1 h和模型小鼠造模1 h后均摘眼球取血,测定血浆尿酸、肌酐和尿素氮。实验同时设立正常小鼠对照组和模型对照组(n=15),均给予等体积的溶剂。结果:12.5~50 mg.kg-1阿司匹林对正常和高尿酸血症模型小鼠的血浆肌酐、尿素氮影响不明显,但可显着升高血浆尿酸水平,在12.5 mg.kg-1剂量时,升高率最大(正常小鼠P<0.05,模型小鼠P<0.01);随给药剂量增加,血尿酸水平逐渐回落至基线,与对照组相比无显着性差异。结论:小剂量阿司匹林可导致正常小鼠和高尿酸血症模型小鼠血尿酸水平升高,随给药剂量增加,这种影响减小。结果提示患者特别是痛风和高尿酸血症患者在应用小剂量阿司匹林时应注意监测血尿酸浓度。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2009年05期）
张海英,卓来东,李玉珍[6]（2008）在《微小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响》一文中研究指出目的考察微小剂量阿司匹林对正常小鼠和高尿酸血症模型小鼠血尿酸、肌酐、尿素氮的影响。方法120只小鼠,随机分为8组,分别为正常对照组、高尿酸血症模型对照组、正常给药组(3组)和高尿酸血症模型给药组(3组)。2组对照组分别给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液,给药组按照12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg的给药剂量分别给予阿司匹林溶液,每天1次,持续一周。一周后,正常阿司匹林给药组在灌胃结束1小时后取血,正常对照组立即腹腔注射0.5%CMC-Na,高尿酸对照组和阿司匹林实验组则腹腔注射尿酸溶液,并于注射后1小时取血样测定尿酸、肌酐和尿素氮。结果微小剂量阿司匹林对正常和高尿酸血症模型小鼠的肌酐、尿素氮影响不明显,但可显着升高血尿酸水平,在给药剂量为12.5mg/kg时,升高比率最大。随给药剂量增加,血尿酸水平逐渐回落至基线,与对照组相比无显着性差异。结论微小剂量阿司匹林可导正常小鼠和致高尿酸血症模型小鼠血尿酸水平升高,且随给药剂量增加,这种影响减小。患者特别是痛风和高尿酸血症患者在应用微小剂量阿司匹林时应注意监测血尿酸浓度。(本文来源于《2008年中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集》期刊2008-10-01）
张海英,卓来东,李玉珍[7]（2008）在《微小剂量阿司匹林对高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响考察》一文中研究指出目的:考察微小剂量阿司匹林对高尿酸血症模型小鼠血尿酸水平等的影响。方法:75只小鼠随机分为5组,包括正常对照组、高尿酸对照组和阿司匹林低、中、高实验组。对照组给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液,实验组分别给予3种剂量(12.5、25、50mg·kg-1)阿司匹林溶液,每天1次,持续1周后,除正常对照组外,其余4组腹腔注射尿酸溶液,建立高尿酸血症模型,并于建模后1h取血样测定尿酸、肌酐和尿素氮水平。结果:与高尿酸对照组比较,各剂量阿司匹林对肌酐、尿素氮影响不明显,但可显着升高血尿酸水平(P<0.0001),但随剂量增加,血尿酸水平逐渐降低。结论:微小剂量阿司匹林可导致高尿酸血症模型小鼠血尿酸水平升高,推测其作用机制可能与抑制尿酸排泄有关。(本文来源于《中国药房》期刊2008年19期）
程云鹏[8]（2007）在《罗格列酮在BALB/C小鼠血流阻断模型中对血管重构及血管内皮功能的作用》一文中研究指出目的:罗格列酮可以在多种模型中,通过多种可能机制改善血管内皮细胞功能;而血管内皮细胞是维持正常血管功能的第一道防线,对血流动力学变化非常敏感。切应力是血液流动时血液与血管内皮细胞间产生的摩擦力,其紊乱可能会导致血管内皮细胞功能发生改变,促进动脉粥样硬化的形成。本试验通过研究罗格列酮在雄性BALB/C小鼠血流阻断模型中对结扎侧(低切应力侧)颈总动脉亲环素A、ICAM-1及P-选择素表达的影响,探讨罗格列酮对低切应力导致的血管重构及血管内皮功能的作用。方法:将雄性BALB/C小鼠(12~16周龄,体重30~40g)60只随机分为手术+罗格列酮组(OR组)、手术+安慰剂组(OM组)、假手术+罗格列酮组(SR组)、假手术+安慰剂组(SP组)4组,每组15只。手术组通过在血管分叉处结扎左侧颈总动脉制作血流阻断模型。所有小鼠于术后给与1周时间恢复。术后第8天至第28天,各组通过胃管给药方式(强饲法)分别给予罗格列酮(20mg/kg)或者安慰剂(甲基纤维素,20mg/kg),每日1次。第29天,处死小鼠,按原手术入路分离左侧颈总动脉,并贮藏于-80℃。每组随机取4例标本通过HE染色切片进行血管形态学分析,并使用免疫组织化学染色方法分析亲环素A在蛋白质水平的表达情况;另每组随机取7只小鼠通过实时定量反转录方法检测ICAM-1与P-选择素mRNA的表达。所有数据用均值±标准差表示;统计学分析使用方差分析(ANOVA)SNK法。统计软件为SPSS 13.0 Windows版。p<0.05被视为有统计学意义。结果:1.结扎4周后,手术组与假手术组相比较,左侧颈总动脉发生明显的负性重构,包括血管中层明显增厚,内皮细胞增殖,血管管腔明显狭窄。2.根据免疫组织化学染色结果,亲环素A在各组间的表达无明显差异。3.根据实时定量反转录PCR结果,各组间ICAM-1与P-选择素mRNA的表达无显着性差异(p>0.05)。结论:1.低切应力可导致BALB/C小鼠的颈总动脉发生明显的负性重构,包括血管中层增厚,血管内皮细胞增殖及由此产生的管腔狭窄。2.在本研究中,罗格列酮未能在BALB/C小鼠改善由低切应力导致的颈总动脉负性重构,亦未能改善此模型中的血管内皮功能。(本文来源于《大连医科大学》期刊2007-05-01）
苗明叁,程再兴,白明[9]（2007）在《小鼠血瘀合并脑缺血模型的建立》一文中研究指出目的:建立小鼠血瘀合并脑缺血模型。方法:在注射地塞米松造成血瘀模型基础上,结扎双侧颈总动脉造成小鼠全脑缺血再灌注模型。结果:模型小鼠的血液粘度、脑能量代谢、脑水肿、Ca2+和脑组织显微结构的变化符合缺血性脑血管病的临床特征。结论:注射地塞米松造成血瘀并通过结扎双侧颈总动脉可成功建立小鼠血瘀合并脑缺血再灌注模型。(本文来源于《中药药理与临床》期刊2007年02期）
李朝敢,张树球,王叁艳,崔明明,周美娥[10]（2006）在《荔枝核提取液对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血生化指标的干预实验》一文中研究指出目的:通过测定糖耐量变化,分析荔枝核提取液对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠生化指标的干预作用。方法:实验于2005-12/2006-01在右江民族医学院生化教研室完成。①荔枝核,为广西百色市靖西县产酸荔枝果核,晒干后粉碎,水提取,加热煮沸30min后,过滤去渣浓缩,加乙醇沉淀,再过滤去沉淀,加热挥发乙醇,提取,得到含浓度1.2g/mL生药水提液。②选取清洁级健康昆明种小白鼠40只,分为正常对照组、模型对照组、荔枝核提取液低浓度组、荔枝核提取液高浓度组,10只/组。③除正常对照组外,其余各组均按200mg/kg体质量腹腔注射四氧嘧啶水溶液建立糖尿病模型。48h后测血糖,血糖未升高的小鼠按100mg/kg腹腔注射四氧嘧啶水溶液,连续追加2次。③待空腹血糖升高和糖耐量异常后,荔枝核提取液低浓度组用荔枝核水提取液给予灌胃治疗,每只小鼠剂量为0.5mL(内含0.012g荔枝核生药);荔枝核提取液高浓度组每只小鼠剂量为0.5mL(内含0.024g荔枝核生药);正常对照组、模型对照组给予等量蒸馏水灌胃。1次/d,连续7d。④测定造模前后空腹血糖,治疗前后糖耐量血糖,治疗后血清丙氨酸氨基转移酶、尿素、叁酰甘油、总胆固醇含量。制备大脑匀浆,测定乙酰胆碱酯酶活性、超氧阴离子自由基(O2-)浓度和清除率、蛋白含量。结果:实验选取健康昆明种小白鼠40只,全部进入结果分析。①造模前后各组小鼠血糖含量的变化:与造模前比较,造模后2,6,9d模型对照组、荔枝核提取液低浓度组、荔枝核提取液高浓度组血糖含量均显着升高,而正常组无明显变化。②治疗前后各组糖耐量试验血糖含量的比较:治疗前30min,与正常对照组比较,其余3组血糖含量均明显升高(P<0.05或P<0.01),显示耐糖量较差。治疗后30min,与正常对照组比较,其余3组血糖含量亦均明显升高(P<0.05或P<0.01)。治疗后2h除模型对照组外,荔枝核提取液低浓度组、荔枝核提取液高浓度组均恢复到治疗前空腹水平。③治疗后各组小鼠血清生化指标的测定结果:荔枝核提取液高浓度组总胆固醇明显高于荔枝核提取液低浓度组、正常对照组;荔枝核提取液高浓度组、荔枝核提取液低浓度组、模型对照组尿素含量均明显高于正常对照组(P<0.01)。④治疗后各组小鼠脑匀浆中生化指标的测定结果:模型对照组乙酰胆碱酯酶活性和O2-浓度均明显高于其他各组(P<0.01),O2-清除率明显低于其他各组(P<0.01),脑蛋白明显低于荔枝核提取液高浓度组(P<0.05)。结论:荔枝核提取液能够明显改善四氧嘧啶糖尿病小鼠大脑胆碱能系统传递功能,加速超氧阴离子自由基的清除率,对血脂和肝、肾功能的保护作用尚不明显。(本文来源于《中国临床康复》期刊2006年31期）
小鼠血腹模型论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
无乳链球菌(Streptococcus agalctiae),亦称 B 群链球菌(Group B Streptococcus,GBS),具有广泛的宿主感染范围,不仅能引起新生儿脑膜炎及肺炎和奶牛乳腺炎,还可引致鱼类脑膜炎和败血症。近年来,无乳链球菌已成为鱼类重要致病菌之一,其传染性强,死亡率高,给水产养殖业造成惨重经济损失,严重制约了我国罗非鱼养殖业的稳定发展。研究发现,无乳链球菌对鱼类的致死率可达100%,但其致病机制尚不清楚。因此,研究其致病机制对防控鱼类无乳链球菌病至关重要。1鱼源无乳链球菌小鼠血脑屏障开放评估模型的建立本试验筛选出一株产β-半乳糖苷酶大肠杆菌M5,毒力测定得知其对小鼠半数致死量(LD50)>2×109CFU;各脏器细菌载量分析表明,该菌不能穿透血脑屏障(BBB)进入中枢神经系统,因此该菌可作为小鼠血脑屏障开放程度的指示菌。在此基础上,对小鼠腹腔注射l00μL浓度为103CFU/mL的无乳链球菌GD201008-001,并于注射后3h、6h、9h和12h,通过尾静脉注射大肠杆菌M5 100μL(2×108CFU),于5min后眼球采血并处死小鼠,无菌取脑,涂板计数。结果发现,脑组织中的无乳链球菌和大肠杆菌M5都随感染时间的延长而增加,证明该模型稳定性良好,为细菌性脑膜炎致病机制的研究提供了实用可靠的工具。2鱼源无乳链球菌透明质酸酶的表达及其对小鼠的致病作用为了确定透明质酸酶(hyaluronidase,Hyl)在鱼源无链球菌穿透血脑屏障引起脑膜炎过程中的作用,根据实验室分离并公布在GenBank上的罗非鱼源无乳链球菌的全基因组序列,设计hylB特异性引物,采用PCR技术扩增长为3156bp的hylB基因片段。用限制性内切酶EcoR Ⅰ和xho Ⅰ消化后将该片段克隆至表达载体pET32a(+),构建重组表达质粒pET32a(+)-hylB,经双酶切、测序鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,进行体外原核表达,获得有透明质酸酶活性的137.1kD目的蛋白。经镍离子亲和层析柱纯化后,注射ICR小鼠,在不同时间点处死小鼠,无菌取心、肝、脾、肺、肾和脑制作病理切片,显微镜下观察到心、肝和肾无明显病变;脾脏表现轻微出血;肺组织病变严重,表现为血管破裂,内皮细胞松散,肺间质增厚,肺实变;脑组织有大量小胶质细胞浸润,脑微血管出血,血管内皮细胞肿胀脱落。研究表明,Hyl在鱼源无乳链球菌引致肺炎和破坏血脑屏障引起脑膜炎过程中发挥重要作用。3鱼源无乳链球菌cas9基因缺失株的构建为了明确cas9基因对无乳链球菌毒力的影响,根据公布在GenBank上的鱼源无乳链球菌GD201008-001株的基因组,设计cas9基因的上下游引物,通过PCR技术扩增其上下游片段,然后通过融合PCR方法融合扩增所得的上下游同源臂。将上下游同源臂连接至温敏型自杀质粒pSET-4s。通过电击转化将重组质粒转入GD201008-001株进行同源重组,通过抗性和温度筛选出cas9基因缺失株。将含有启动子的目的基因片段连入链球菌-大肠杆菌穿梭质粒pSET2,再转入缺失株,构建互补株。通过常规PCR、基因测序及荧光定量PCR检测目的基因在亲本株,缺失株和互补中的mRNA转录水平,证明cas9基因缺失株和互补株构建成功,为后续的生物学特性分析奠定了基础。4鱼源无乳链球菌cas9基因缺失株的特性分析为了进一步研究鱼源无乳链球菌cas9基因的功能,试验比较了野生株、缺失株和互补株在生物体内外的特性差异。研究发现,3株菌生长曲线无显着差异;小鼠巨噬细胞对cas9基因缺失株的吞噬率高于野生株和互补株,但差异不显着;相比于野生株和互补株,cas9基因缺失株对bEnd.3细胞的黏附率显着下降。缺失株对斑马鱼的LD50显着高于野生株和互补株;对小鼠的LD50有所升高,与野生株和互补株无显着差异,但小鼠死亡时间推迟12h。将培养至OD600约为0.6的3株菌(103CFU/mL)100μL及200μLHy1蛋白(2.0mg/mL)注射小鼠,分别在注射3h、6h、9h和12h后尾静脉注射大肠杆菌M5(2×108CFU),10min后眼球采血,并处死小鼠,无菌取脑,匀浆后10倍比稀释涂至THB和M63培养基平板。计数结果表明,3株菌在诱导BBB开放的时间上明显不同,感染野生株和互补株6h后小鼠BBB开放,而攻毒缺失株△cas99h后BBB开放;在攻毒后9h至12h,野生株和互补株攻毒组穿过BBB的无乳链球菌和大肠杆菌显着高于缺失株组。攻毒Hyl蛋白后,BBB在3h时已开放,在攻毒后6h至9h,蛋白组与3株细菌组穿过BBB的大肠杆菌无明显差异,而在12h时BBB开放程度显着低于野生株。研究结果表明cas9基因与无乳链球菌的毒力密切相关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
小鼠血腹模型论文参考文献
[1].杨明,麻雅婷,何赏,段欣欣,王佳楠.不同细菌所致小鼠血流感染模型中MIP-1β、MIP-2和IL-12p70的表达及变化规律[J].中国感染控制杂志.2017
[2].罗素.鱼源无乳链球菌小鼠血脑屏障开放评估模型的建立及cas9基因功能分析[D].南京农业大学.2016
[3].谢尹晶,段晋燕,张洪瑞,王娜,刘一凡.临床分离菌株ICR小鼠血流感染模型的建立[J].中华医院感染学杂志.2014
[4].姚洪武,王建,刘岩,王丹丹.麝香与冰片不同配比对急性脑缺血模型小鼠血脑屏障通透性的影响[J].成都中医药大学学报.2011
[5].张海英,卓来东,李玉珍.小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响[J].中国新药杂志.2009
[6].张海英,卓来东,李玉珍.微小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响[C].2008年中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集.2008
[7].张海英,卓来东,李玉珍.微小剂量阿司匹林对高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响考察[J].中国药房.2008
[8].程云鹏.罗格列酮在BALB/C小鼠血流阻断模型中对血管重构及血管内皮功能的作用[D].大连医科大学.2007
[9].苗明叁,程再兴,白明.小鼠血瘀合并脑缺血模型的建立[J].中药药理与临床.2007
[10].李朝敢,张树球,王叁艳,崔明明,周美娥.荔枝核提取液对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血生化指标的干预实验[J].中国临床康复.2006