论文摘要
构建重组质粒pNZ8149-IL21,并将其转到乳酸球菌中,利用Nisin诱导基因表达系统分析重组质粒在乳酸球菌中的表达。采用基于聚合酶链式反应的精确合成（PCR-based accurate synthesis,PAS）的方法,合成目的基因IL21,连入载体pUC57,获得重组质粒pUC57-IL21;对含有目的基因的pUC57-IL21和pNZ8149质粒进行双酶切后,构建pNZ8149-IL21质粒;采用电转化方法将连接产物转化进NZ3900,涂板挑取12个单菌落培养后,进行PCR验证,筛选出阳性克隆,从诱导剂Nisin的浓度（30,50和100 ng/m L）和诱导时间（12和24 h）进行诱导条件优化分析IL21在乳酸菌中表达。目的蛋白在乳酸菌NZ3900中得到表达,在50 ng/m L的Nisin诱导24 h可见目的蛋白在相对分子质量15 k左右有条带表达,Nisin诱导24 h的效果优于12 h。结果说明选择乳酸菌作为载体表达系统,构建IL21高表达的重组乳酸菌是可行的。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 卓倩,韩煜东,徐文雨,袁婷,王庆苓,赵树立
关键词: 基因,重组质粒,乳酸乳球菌,表达鉴定,诱导基因表达系统
来源: 药物生物技术 2019年02期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学
单位: 徐州医科大学病理学教研室,南京医科大学附属南京市第一医院
分类号: Q78
DOI: 10.19526/j.cnki.1005-8915.20190203
页码: 105-109
总页数: 5
文件大小: 732K
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标签：基因论文; 重组质粒论文; 乳酸乳球菌论文; 表达鉴定论文; 诱导基因表达系统论文;