成纤维细胞生长因子受体在成骨细胞中的表达及作用研究

成纤维细胞生长因子受体在成骨细胞中的表达及作用研究

论文摘要

目的检测成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)1-3在成骨分化不同阶段的表达变化,并明确FGFR信号在成骨分化中的重要作用。方法利用原代成骨细胞和成骨细胞系MC3T3-E1进行成骨诱导,通过形态观察、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色鉴定细胞分化情况,qRT-PCR和Western blot检测成骨分化相关基因和FGFR1-3的表达,并通过阻断FGFR信号观察成骨细胞分化的变化。结果原代成骨细胞ALP染色和茜素红染色阳性,成骨分化相关基因COL 1α、RUNX2、OPN表达增加,在成骨细胞系MC3T3-E1实验中得到了类似结果,而且FGFR1、FGFR2和FGFR3在成骨分化过程中表达增加,阻断FGFR信号可以显著抑制成骨分化,提示FGFR信号参与了成骨细胞分化调控。结论 FGFR信号促进成骨细胞成骨分化。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料
  •   1.2 主要器材与试剂
  •   1.3 细胞的分离与培养
  •     1.3.1 原代成骨细胞分离与培养
  •     1.3.2 细胞系培养
  •   1.4 成骨细胞形态观察及成骨能力鉴定
  •     1.4.1 细胞形态观察
  •     1.4.2 碱性磷酸酶染色
  •     1.4.3 茜素红染色
  •     1.4.4 ALP活性测定
  •     1.4.5 qRT-PCR检测成骨分化相关基因及FGFRs表达
  •     1.4.6 Western blot检测成骨细胞加入FGFR信号阻断剂BGJ398后成骨分化相关基因的蛋白表达
  •   1.5 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 原代成骨细胞形态特征
  •   2.2 原代成骨细胞诱导后成骨细胞成骨分化增加
  •   2.3 qRT-PCR检测成骨细胞成骨诱导处理后成骨分化相关基因表达
  •   2.4 qRT-PCR检测成骨细胞成骨过程中FGFRs的表达情况
  •   2.5 FGFR信号阻断剂BGJ398抑制成骨细胞成骨分化
  •   2.6 FGFR信号阻断剂BGJ398抑制成骨细胞和MC3T3-E1分化相关基因的蛋白表达
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 莫奇非,杨鹏,苏楠,陈林

    关键词: 成骨细胞,成纤维细胞生长因子受体

    来源: 第三军医大学学报 2019年24期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 陆军军医大学(第三军医大学)野战外科研究所:骨质疏松分骨发育中心,战伤组织修复与康复医学研究室,全军军事训练伤仿治与康复室,创伤、烧伤与复合伤国家重点试验室

    基金: 国家自然科学基金面上项目(81870621),国家重点研发计划(2018YFA0800802)~~

    分类号: R329.2

    DOI: 10.16016/j.1000-5404.201907008

    页码: 2386-2392

    总页数: 7

    文件大小: 6285K

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