猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物的研究

猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物的研究

论文摘要

本文以猫儿屎(Decaisnea insignis)茎部分离到活性较好的菌株DS37为研究对象,通过形态学结合分子生物学手段,最终将DS37鉴定为塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)。用大米培养基对DS37进行发酵,阴干的发酵物用石油醚,乙酸乙酯及甲醇浸泡提取,减压浓缩提取液得到粗浸膏。通过硅胶、凝胶柱色谱结合薄层色谱、重结晶手段对粗浸膏进行分离纯化得到16个化合物,并根据纯品化合物的理化性质结合各种波谱和X-单晶衍射数据,最终将16个化合物鉴定为:麦角甾-7,22-二烯-3β-棕榈酸酯(1)、二十四烷酸(2)、1,3-二辛酰基-2-亚油酸甘油酯(3)、交链孢酚甲醚(4)、交链孢酚(5)、asperpyrone C(6)、asperpyrone D(7)、2,4,6a,10,12-Pentahydroxy-6,6a-dihydr-odinaphtho[2,1-b:1’,2’-d]furan-5,9-dione(8)、leptosphaepi(9)、胡萝卜苷(10)、5,5’-二甲基-7-羟基-4,4’,7’-三甲氧基-6,8’-双香豆素(11)、3-(5-oxo-2,5-dihydrofuran-3-yl)propanoic acid(12)、5,5’-二甲基-4,4’,7,7’-四甲氧基-8,8’-双香豆素(13)、7-羟基-4-甲氧基-5-甲基香豆素(14)、豆甾-7,22-二烯-3β,5α,6α-三醇(15)、槲皮素-3-O-β-L-鼠李吡喃糖苷(16)。其中3-(5-oxo-2,5-dihydrofuran-3-yl)propanoic acid(12)为新化合物,1-3、6、8-16均为首次从塔宾曲霉发酵物中得到。以4株细菌(大肠杆菌、乳酸链球菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌)和5株植物病原性真菌(小麦赤霉病菌、烟草赤星病菌、油菜菌核病菌、番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌)作为测试菌,对16个化合物的抑菌活性进行了测试。结果显示:化合物4、5、7和14对4株细菌表现出与阳性对照相当的抑制效果,化合物4、5、9、11-14对5株植物病原性真菌表现出与阳性对照相当甚至优于阳性对照的抑制效果。以DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除率为标准,测试了化合物4-8、11-13的抗氧化能力。结果显示:化合物均未表现出明显的抗氧化作用。以4种人体常见的肿瘤细胞株(PC-3、A-549、MCF-7、HepG2)和1种正常细胞株(L02)对化合物4-9、11-13进行抗肿瘤活性测试。结果显示:化合物4、5、7、11和13均表现出不同程度的抗肿瘤作用。尤其是化合物4和11对肿瘤细胞HepG2以及化合物7和13对肿瘤细胞A-549表现出较突出的抗肿瘤效果。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1 绪论
  •   1.1 药用植物内生真菌的研究方法
  •     1.1.1 内生真菌的分离
  •     1.1.2 内生真菌的鉴定
  •     1.1.3 内生真菌的筛选
  •     1.1.4 内生真菌的发酵
  •     1.1.5 内生真菌次生代谢产物提取、分离及鉴定
  •   1.2 药用植物的内生真菌次生代谢产物
  •     1.2.1 香豆素和异香豆素类化合物
  •     1.2.2 聚酮类化合物
  •     1.2.3 甾体类化合物
  •     1.2.4 酯类化合物
  •     1.2.5 生物碱类化合物
  •     1.2.6 酚酸类化合物
  •     1.2.7 黄酮类化合物
  •     1.2.8 萜类化合物
  •     1.2.9 其他类化合物
  •   1.3 猫儿屎的研究现状
  •   1.4 研究的目的及意义
  • 2 猫儿屎内生真菌DS37 菌种鉴定与发酵
  •   2.1 实验材料与方法
  •     2.1.1 菌株
  •     2.1.2 试剂
  •     2.1.3 仪器
  •     2.1.4 培养基
  •     2.1.5 菌株DS37 的鉴定
  •     2.1.6 固体发酵和发酵物的提取及粗分
  •   2.2 结果与讨论
  •     2.2.1 菌株DS37 的鉴定
  •     2.2.2 发酵物的提取及粗分
  •   2.3 小结
  • 3 猫儿屎内生真菌DS37 次生代谢产物的分离及结构鉴定
  •   3.1 实验材料与方法
  •     3.1.1 试剂
  •     3.1.2 仪器
  •     3.1.3 测试菌株
  •     3.1.4 培养基
  •     3.1.5 各组分的抑菌活性测定
  •     3.1.6 次生代谢产物的分离
  •     3.1.7 次生代谢产物结构鉴定
  •   3.2 结果与讨论
  •     3.2.1 各组分抑菌活性结果
  •     3.2.2 次生代谢产物的结构解析
  •   3.3 小结
  • 4 内生真菌DS37 次生代谢产物生物活性
  •   4.1 实验材料与方法
  •     4.1.1 试剂
  •     4.1.2 仪器
  •     4.1.3 测试菌株及肿瘤细胞株
  •     4.1.4 培养基
  •     4.1.5 配制溶液
  •     4.1.6 抑菌、抗氧化和抗肿瘤活性测试
  •   4.2 结果与讨论
  •     4.2.1 抑菌、抗氧化和抗肿瘤活性结果
  •     4.2.2 抑菌、抗氧化和抗肿瘤活性结果讨论
  •   4.3 小结
  • 5 结论与创新
  •   5.1 结论
  •   5.2 创新点
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录:化合物波谱图
  • 攻读硕士期间发表的学术论文
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 王宁宁

    导师: 杨秀芳

    关键词: 猫儿屎,塔宾曲霉,次生代谢产物,抑菌活性,抗氧化活性,抗肿瘤活性

    来源: 陕西科技大学

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 一般化学工业

    单位: 陕西科技大学

    基金: 陕西省科技厅科技统筹创新工程计划项目(2016KTTSNY03-04)

    分类号: TQ920.6

    总页数: 113

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