猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

论文摘要

为建立一种快速、特异、鉴别诊断猪伪狂犬病毒野毒感染与疫苗免疫株,参考GenBank上公布的猪伪狂犬病毒gE基因序列设计了1对引物,以猪伪狂犬病毒核酸作为模板,PCR方法将扩增得到的核酸序列克隆到PEGM-18T载体上,将克隆载体转化到DH5α感受态细胞中,测序鉴定阳性重组质粒作为标准品建立猪伪狂犬病毒荧光定量PCR检测方法。结果表明,本研究所建立的猪伪狂犬病毒荧光定量PCR方法检测灵敏度可达10拷贝,与蓝耳病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和可重复性。此外,对33份疑似猪伪狂犬病料也作了检测,结果表明,2份病料均为阳性。本研究建立的猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、不发生交叉反应等优点,可用于日常猪伪狂犬病毒野毒感染与疫苗免疫株的鉴别诊断。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 温书香,安利民,赵协,张军,潘燕燕,葛位西

关键词: 猪伪狂犬病毒,荧光定量技术,灵敏度,标准曲线

来源: 江苏农业科学 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 河南省漯河市动物疫病预防控制中心

基金: 2015年河南省漯河市青年拔尖人才支持计划

分类号: S852.651

DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.07.013

页码: 50-53

总页数: 4

文件大小: 842K

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