PK15细胞的无血清全悬浮驯化研究

PK15细胞的无血清全悬浮驯化研究

论文摘要

目前PK15细胞主要用于生产猪圆环病毒2型,传统的培养工艺为滚瓶系统或微载体系统,该两种培养系统都存在各自的劣势。驯化一株全悬浮的PK15细胞可推进工艺的进一步升级,降低成本的同时也简化了培养工艺且更易于产业化。经贴壁降血清培养、低血清悬浮优化传代、无血清悬浮传代培养,对一株贴壁的PK15细胞进行了无血清的全悬浮驯化。传代23次后,该株细胞无血清全悬浮培养初始密度为0. 5×106/m L,在72 h密度可增殖到4. 0×106/m L左右,形态良好,倍增时间稳定,且细胞活率达到95%以上,命名为PK15-S,为大规模培养PK15细胞提供了理论依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 细胞和毒株
  •     1.1.2 主要试剂和耗材
  •     1.1.3 主要仪器和设备
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 PK15细胞无血清全悬浮驯化
  •       1.2.1. 1 PK15贴壁细胞降血清
  •       1.2.1. 2 PK15贴壁细胞低血清的悬浮驯化
  •       1.2.1. 3 PK15悬浮无血清的驯化
  •     1.2.2 PK15-S增值的稳定性
  •     1.2.3 细胞密度测定方法
  •     1.2.4 PK15-S倍增时间的测定
  • 2 结果与分析
  •   2.1 无血清悬浮PK15细胞生长情况分析
  •     2.1.1 PK15贴壁细胞降血清
  •     2.1.2 PK15贴壁低血清的悬浮驯化
  •     2.1.3 PK15悬浮无血清的驯化
  •   2.2 PK15-S增值的稳定性
  •   2.3 PK15-S倍增时间的测定
  • 3 讨论与结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘天伦,郎洪彬,孔飒

    关键词: 细胞,细胞驯化,无血清,全悬浮

    来源: 中国兽药杂志 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 北京民海生物科技有限公司,北京大北农科技集团股份有限公司

    分类号: S852.651

    页码: 12-18

    总页数: 7

    文件大小: 438K

    下载量: 147

    相关论文文献

    • [1].不同浓度牛磺酸对高糖诱导的猪PK15细胞凋亡的影响及其作用机制[J]. 基因组学与应用生物学 2015(12)
    • [2].猪细小病毒在PK15细胞中增殖规律的研究[J]. 中国兽药杂志 2009(01)
    • [3].猪伪狂犬病毒感染PK15细胞对细胞凋亡及相关凋亡因子的影响[J]. 中国兽医学报 2016(04)
    • [4].猪圆环病毒2型诱导PK15细胞凋亡的研究[J]. 中国畜牧兽医 2014(10)
    • [5].敌敌畏与马拉硫磷对猪肾细胞PK15增殖抑制分析[J]. 农药 2020(04)
    • [6].黑曲霉β-甘露聚糖酶基因manA在PK15细胞中的分泌表达[J]. 生物技术通报 2011(08)
    • [7].使用不同胰酶消化PK15细胞对比试验[J]. 福建畜牧兽医 2018(01)
    • [8].猪SAP基因对PK15细胞凋亡的影响[J]. 黑龙江畜牧兽医 2014(19)
    • [9].PK15、ST细胞增殖猪传染性胃肠炎病毒的比较研究[J]. 黑龙江畜牧兽医 2014(01)
    • [10].lncRNA在乙脑病毒感染PK15细胞过程中的作用研究[J]. 中国畜牧兽医 2019(07)
    • [11].PK15细胞在不同培养条件下的生长情况[J]. 福建畜牧兽医 2020(03)
    • [12].猪细小病毒在F81细胞和PK15细胞增殖的研究[J]. 畜牧与兽医 2012(03)
    • [13].PK15细胞的生物学特性和质量评价研究[J]. 黑龙江农业科学 2015(05)
    • [14].木聚糖酶-甘露聚糖酶融合酶基因Linker优化及其在猪肾pK15细胞中共表达[J]. 中国农业科学 2013(22)
    • [15].猪圆环病毒2型PK15细胞系高敏感性细胞的克隆[J]. 中国兽药杂志 2010(04)
    • [16].两种鼠血清与两种培养基对PK15细胞培养的比较[J]. 湖南畜牧兽医 2016(02)
    • [17].适合猪圆环病毒2生长的PK15均质细胞株的构建[J]. 湖南农业大学学报(自然科学版) 2013(04)
    • [18].铜对猪传代肾细胞(PK15)增殖的影响[J]. 黑龙江八一农垦大学学报 2008(02)
    • [19].微生物源果胶酶在猪PK15细胞中异源表达及其酶学性质分析[J]. 遗传 2019(08)
    • [20].适合猪圆环病毒2型敏感复制的PK15细胞株的克隆与鉴定[J]. 中国兽医科学 2011(01)
    • [21].利用CRISPR/Cas9技术构建PERV敲除的PK15细胞系[J]. 生物技术 2018(06)
    • [22].稳定表达猪APOBEC3F的PK15细胞单克隆株的建立[J]. 生物技术通讯 2019(01)
    • [23].猪肾细胞(PK15细胞)ABCA1基因与miRNA-758关系的研究[J]. 黑龙江畜牧兽医 2018(01)
    • [24].PK15细胞cDNA T7噬菌体展示文库的构建及鉴定[J]. 南方农业学报 2013(08)
    • [25].类猪圆环病毒P1诱导PK15细胞自噬的研究[J]. 华北农学报 2014(S1)
    • [26].用微载体系统培养PK15细胞生产猪圆环病毒2型[J]. 上海农业学报 2010(04)
    • [27].荷包猪SLA-2-HB01真核表达载体的构建及在PK15细胞中的表达[J]. 生物技术通报 2018(12)
    • [28].逆转录病毒载体介导的T7RNA聚合酶在猪源细胞PK15及SK6中的稳定表达[J]. 畜牧兽医学报 2011(04)
    • [29].猪传染性胃肠炎病毒感染PK15细胞抗病毒相关因子转录变化分析[J]. 东北农业大学学报 2015(11)
    • [30].不同种属H1启动子驱动miR-1在PK15细胞中的表达情况[J]. 南方农业学报 2015(11)

    标签:;  ;  ;  ;  

    PK15细胞的无血清全悬浮驯化研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢