导读:本文包含了基因失活论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,地中海,子区,突变,甲基化,蛋白,质粒。
基因失活论文文献综述
刘霞[1]（2019）在《CMAH基因失活或导致人类更易患心血管疾病》一文中研究指出科技日报讯（记者刘霞）与其它哺乳动物相比，为什么人类更易患心血管疾病？一项刊发于最新一期美国《国家科学院学报》的研究称，人类祖先的一个基因失活可能是导致人类容易患心血管疾病的“罪魁祸首”。论文指出，此前研究发现，动脉粥样硬化引起的心脏病和中风等(本文来源于《科技日报》期刊2019-08-13）
李文月,高爽,张志鹰,张红,超博[2]（2018）在《变形链球菌耐氟菌株gtfB基因失活菌株的构建》一文中研究指出目的:构建变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株,为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础。方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段,以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重迭延伸聚合酶链反应法(overlap extension polymerase chain reaction,OE-PCR)获取上述3个片段的同源重组片段;与pEASY-Blunt Cloning Vector连接形成重组质粒后,进行PCR鉴定和测序鉴定;将重组片段电转化入UA159-FR感受态细胞中得到gtfB基因失活菌株,并进行PCR鉴定。结果:经PCR鉴定和测序鉴定,含有gtfB基因重组片段的重组质粒构建成功;经PCR鉴定,UA159-FR的gtfB基因失活株构建成功。结论:成功构建了含有gtfB基因重组片段的重组质粒和S.mutans耐氟菌株UA159-FR的gtfB基因失活株,可用于gtfB基因功能的研究。(本文来源于《口腔医学研究》期刊2018年05期）
张兴艳[3]（2018）在《PRDM1/Blimp1基因失活及甲基化在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的作用研究》一文中研究指出目的:研究100例弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large cell B lymphoma,DLBCL)中PRDM1/Blimp1和c-myc在在蛋白和mRNA水平的表达,PRDM1/Blimp1基因甲基化状态,探讨其与临床病理特征、免疫分型和预后相关性。方法:应用免疫组化Envision法和RT-PCR检测100例DLBCL肿瘤组织和20例反应性增生淋巴结石蜡包埋组织中PRDM1/Blimp-1和c-myc在蛋白和转录水平的表达。细胞水平沉默DLBCL细胞系中PRDM1/Blimp-1基因的表达,应用Western blot和RT-PCR分别检测转染细胞中c-myc蛋白和mRNA表达的变化。甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测PRDM1/Blimp-1基因甲基化状态。运用SPSS17.0分析PRDM1/Blimp-1和c-myc在蛋白及和转录水平的相关性,并分析与临床病理参数及预后相关性;分析PRDM1/Blimp-1基因甲基化与临床病理参数及预后相关性。结果:(1)根据Han’s分型法,100例DLBCL组织中,GCB型27例,non-GCB型73例。(2)肿瘤组织中PRDM1/Blimp1蛋白阳性表达26例(26%),反应性增生淋巴结中阳性表达20例(100%)。PRDM1/Blimp1 mRNA高表达58例(58%),其中GCB型22例(81.5%),non-GCB型36例(49.3%)。(3)PRDM1/Blimp1基因启动子甲基化在肿瘤组织中有23例(23%),而对照组未发生甲基化。结论:(1)肿瘤组织中PRDM1/Blimp1蛋白阳性率与反应性增生淋巴结存在显着差异;(2)在不同免疫分型、血清乳酸脱氢酶水平(LDH)、B症状、原发部位等临床病理参数之间PRDM1/Blimp1 mRNA表达水平差异显着,c-myc在性别、IPI评分、血清LDH水平之间表达有差异。(3)siRNA转染沉默人DLBCL细胞株OCI-LY1和OCI-LY3中PRDM1/Blimp1基因后,OCI-LY1细胞株中c-myc基因和蛋白表达较对照组上调。(4)生存分析显示在年龄<60岁、PS评分0-2分、无B症状组DLBCL患者有较高生存率。同时PRDM1/Blimp1高表达组PRDM1/Blimp1低表达组预后好,从生存曲线图可以得出PRDM1/Blimp1基因启动子甲基化组有较低的生存趋势。综上所述,由PRDM1/Blimp1基因沉默诱导的c-myc基因表达上调可能是DLBCL发生的重要因素。同时,证实在DLBCL患者中存在PRDM1/Blimp1基因启动子区域中的CpG岛甲基化。PRDM1/Blimp1基因甲基化导致该基因沉默或减少可能是DLBCL发展的另一个重要因素。PRDM1/Blimp1基因甲基化有望作为一个候选分子诊断标记,为后续研究提供实验证据。(本文来源于《新疆医科大学》期刊2018-03-01）
何思雨,成文玉,金红星[4]（2017）在《S-丙二酰转移酶基因失活对地中海拟无枝酸菌产利福霉素的影响》一文中研究指出为提高利福霉素的产量,构建了S-丙二酰转移酶基因失活的地中海拟无枝酸菌。利用融合PCR构建S-丙二酰转移酶基因的同源重组载体,通过电击转化导入到地中海拟无枝酸菌中,使之发生同源重组,以安普霉素为标记,筛选了S-丙二酰转移酶基因失活菌株,并对比了突变菌株与原始菌株的利福霉素SV产量。成功构建了S-丙二酰转移酶基因的同源重组载体,获得了地中海拟无枝酸菌突变株A.mediterranei △fab D,失活菌株的利福霉素SV产量为168.08 mg/L,比原始菌提高了9.94%。S-丙二酰转移酶基因的失活,弱化了突变菌株脂肪酸的合成,强化了利福霉素的合成。(本文来源于《生物技术通报》期刊2017年08期）
宋玉立[5]（2017）在《第一部分 PHLDA3基因失活导致肿瘤发生及临床意义 第二部分 胰腺神经内分泌肿瘤中YY1基因热点突变》一文中研究指出背景和目的:我们课题组既往的研究发现胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine tumors,PNETs)频繁发生染色体1q31-32区域的杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH),该区域内存在PHLDA3基因,日本学者发现在小鼠PHLDA3基因敲除模型中有胰岛增生。因此,本课题的研究目的是:PHLDA3基因敲除能否导致大鼠PNETs发生,人类PNETs中是否在PHLDA3基因异常和表达缺失,从而阐明散发性PNETs发生的分子机制。同时明确该基因蛋白表达是否具有判断预后的价值。方法:利用免疫组化的方法测定222例PNETs组织和109例PNETs瘤旁组织中PHLDA3蛋白的表达,然后分析蛋白表达与患者的临床病理特征和预后的关系。利用甲基化特异性PCR测定PHLDA3基因启动子甲基化状态。利用微卫星标记检测PHLDA3基因是否存在LOH。采用CRISPR/Cas9技术构建PHLDA3基因敲除的SD大鼠模型,繁殖并进行基因型鉴定,分别在6月、12月、18月时处死大鼠,观察是否有肿瘤形成;取得胰腺等腺体组织,石蜡包埋后切片、HE染色,分析基因敲除大鼠和野生大鼠胰岛数量和面积的变化;留取空腹血清,测定血糖、胰岛素水平,分析PHLDA3基因敲除对糖代谢影响。结果:PHLDA3在未发生转移的PNETs中表达率较高(28.5%vs.17.9%,P =0.078),PHLDA3蛋白阳性表达的PNETs患者的预后较好(总生存:N = 187,P =0.026;无病生存:N = 187,P = 0.024),生存时间较长(总生存:N = 187,Log Rank P = 0.017;无病生存:N = 182,Log Rank P = 0.041)。PNETs及其瘤旁组织中存在高比例的PHLDA3基因启动子甲基化(分别为12/19和3/6),统计结果显示甲基化与蛋白表达无关。25.7%的PNETs存在PHLDA3基因LOH,发生LOH的肿瘤中PHLDA3蛋白表达率低(21%vs.52%,P = 0.098)。PHLDA3基因敲除的大鼠可形成PNETs,PHLDA3基因敲除大鼠的胰岛形态和大小与野生型大鼠差别不大,然而基因敲除的雄性大鼠血糖水平较低(6.23 mmol/Lvs.11.07 mmol/L,P = 0.018)。结论:敲除PHLDA3基因的SD大鼠发生PNET,而基因野生型的对照大鼠则无PNETs生成。提示PHLDA3基因是PNETs的抑癌基因。人类PNETs中存在PHLDA3基因的杂合性缺失和基因启动子甲基化,同时瘤组织中PHLDA3蛋白表达减少或丢失。提示部分人类PNETs的发生和PHLDA3基因失活相关。背景和目的:胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine tumors,PNETs)是一组少见的异质性的肿瘤,年发病率约0.94-1.27/10万人,但是其发病率呈逐年上升趋势。我国的学者首次报道了 30%的胰岛素瘤中存在YY1T372R热点突变,然而该基因突变与蛋白表达在胰岛素瘤中的临床意义尚不明确,特别是该基因突变在其他PNETs亚型中是否发生未见报道。方法:我们在138例PNETs中对YY1基因热点突变进行一代测序,其中包括75例胰岛素瘤,19例功能性非胰岛素瘤PNETs和44例无功能PNETs。用免疫组化染色测定103个PNETs和29例配对瘤旁组织中YY1蛋白表达,用western bolt对4例PNETs、1例配对瘤旁胰腺组织和3例正常胰腺组织验证YY1蛋白表达。统计分析YY1突变和蛋白表达的临床病理意义。结果:测序结果显示19%(14/75)的胰岛素瘤和1.5%(1/67)的非胰岛素瘤PNETs存在YY1T372R突变,表明YY1基因热点突变为胰岛素瘤所特有(P = 0.001)。发生YY1T372R突变的患者年龄较大(57.5岁vs.43岁,P = 0.006)。Y1T372R突变与胰岛素瘤的良恶性以及肿瘤分期、分级均无关,提示该突变是肿瘤发生的早期事件。我们的研究还发现出现YY1T372R突变的患者胰岛素水平较低和胰岛素释放指数下调(N =69,P = 0.015和N = 69,P = 0.073);此外,O型血的胰岛素瘤患者发生YY1热点突变的比例明显高于其他血型患者(38.9%vs.13.2%,P = 0.018)。YY1T372R突变不影响蛋白表达。YY1蛋白广泛表达于PNETs和瘤旁胰腺组织的胞核中,但是同瘤旁组织相比,PNETs中YY1的表达显着上调。YY1蛋白在男性患者中的表达较高(88.1%vs.72.1%,P=0.052),在良性 PNETs 中表达较高(82.7%vs.63.6%,P=0.053),YY1高表达的患者体重指数较低(27.9 vs.29.3,P = 0.010),Kaplan-Meier生存分析显示YY1高表达的患者总生存和无病生存的时间均延长(总生存:N=71,Log Rank P =0.006;无病生存:N=68,Log Rank P =0.009),Cox模型显示YY1表达上调的患者预后好(总生存:HR15.643,95%CI1.635-149.685,P =0.017;无病生存:HR3.162,95%C10.830-12.047,P =0.092)。结论:YY1T372R热点突变在胰岛素瘤中特异存在,O型血的胰岛素瘤患者中较为多见。该突变可能是肿瘤发生的早期事件,可能影响胰岛素的分泌。YY1T372R突变不影响蛋白表达。YY1在PNETs中表达上调提示患者预后较好。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2017-05-01）
何思雨[6]（2017）在《fabD和aceA基因失活对地中海拟无枝酸菌产利福霉素的影响》一文中研究指出利福霉素是一类安莎(ansamycins)大环内酯类抗生素,主要应用于治疗由结核分枝杆菌引起的结核病。地中海拟无枝酸菌是利福霉素的产生菌,基因调控策略是提高利福霉素生物合成的有效方法之一。为此,本论文以利福霉素工业生产菌—地中海拟无枝酸菌为研究对象,探究了基因失活菌株的构建方法,为构建工业高产菌株提供可行性依据。S-丙二酰转移酶能够将丙二酰CoA的酰基转移到酰基载体蛋白(ACP),形成丙二酰ACP和游离CoA-SH,是脂肪酸途径中关键的蛋白酶之一。丙二酰CoA是脂肪酸和利福霉素合成的共同前体物质,为探究S-丙二酰转移酶对利福霉素的影响,本论文通过融合PCR技术构建了带有安普霉素抗性的自杀型基因失活同源重组载体,并优化了融合PCR的条件。用电击转化法将失活同源重组载体导入地中海拟无枝酸菌中,经过基因同源重组,获得了S-丙二酰转移酶基因失活的突变菌株,利用高效液相色谱(HPLC)检测发酵液中利福霉素的产量,相比原始菌提高了9.9%。为探究异柠檬酸裂解酶对地中海无枝酸菌产利福霉素的影响,通过融合PCR技术构建了带抗性标记的异柠檬酸裂解酶基因的同源重组载体,利用电转化导入地中海拟无枝酸菌,得到异柠檬酸裂解酶基因失活菌株。利用重迭延伸PCR构建了无抗性的同源重组载体,再进行电转化获得异柠檬酸裂解酶基因敲除菌株。利用HPLC检测发酵液中利福霉素的产量,相比原始菌降低了26.0%。(本文来源于《河北工业大学》期刊2017-05-01）
孙进,李凤飞,朱红红,李建民,马建华[7]（2016）在《胰岛β细胞中PP2ACα基因失活小鼠模型的建立及初步表型分析》一文中研究指出目的 :建立胰岛β细胞特异性失活PPACα基因小鼠模型,对其表型进行初步观察。方法 :通过Ins2-Cre小鼠与PP2ACα~(~(flox/flox))小鼠交配,获得胰岛β细胞特异性失活PP2ACα基因小鼠(PP2ACα~(flox/fIox):Ins2-Cre)。PCR和Western blot鉴定PP2ACα基因第二外显子敲除小鼠(KO)。4月龄时行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT),以PP2ACα~(flox/flox)小鼠为对照。结果 :1PP2ACα转录本在KO小鼠短于对照小鼠;2KO小鼠胰岛中PP2AC蛋白水平较对照小鼠显着下降(P<0.05);3IPGTT结果显示:4月龄KO小鼠30、60、120 min时血糖明显高于对照小鼠(P<0.05)。结论:成功建立胰岛β细胞特异性失活PPACα基因小鼠模型,4月龄PP2ACα~(flox/fIox):Ins2-Cre小鼠糖耐量受损。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2016年04期）
刘碧英[8]（2016）在《肝癌细胞SOX_7基因失活及其启动子区的甲基化状态的研究》一文中研究指出目的:肝癌细胞SOX7基因失活及其启动子区的甲基化状态。方法:定量PCR检测肝癌细胞Hep G2和20例SOX7m RNA低表达肝癌患者癌组织SOX7甲基化水平。运用统计分析软件对数据进行分析。结果:定量PCR检测的甲基化结果显示,SOX7DNA启动子区在肝癌细胞Hep G2开始出现甲基化现象,但在SOX7m RNA表达下调的二十例肝癌组织中只有四例具备启动子区甲基化现象。结论:SOX7DNA启动子区于肝癌细胞Hep G2中出现甲基化现象,但在SOX7m RNA表达下调的肝癌组织中发现SOX7DNA启动子区甲基化状况并不具有显着性。(本文来源于《生物技术世界》期刊2016年02期）
Jian-zhong,XU,Wei-guo,ZHANG[9]（2016）在《遗传改造细菌基因组的策略:基因定点突变、基因失活和基因过表达（英文）》一文中研究指出该综述较为全面地概述了当前针对大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌基因组遗传改造的各个方法的具体流程、应用范围、注意事项以及其新颖之处,比较了针对基因定点突变、基因失活和基因过表达的各个方法所存在的优缺点,同时简单地介绍了利用质粒介导基因过表达所存在的问题。此外,还介绍了四种引物设计软件,并简单分析了它们的应用范围。为拟计划开展分子生物学实验的新手对关于细菌基因组遗传改造方法做了可靠的介绍,同时也为已进行相关实验的实验员提供关于基因定点突变、基因失活和基因过表达的最新信息。(本文来源于《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》期刊2016年02期）
洪伟,陈学书,吴昌学,郜双林,赵艳[10]（2015）在《幽门螺旋杆菌cagA基因失活突变株的构建》一文中研究指出目的:通过同源重组基因失活方法,构建幽门螺旋杆菌(H.pylori)cag A基因失活突变株。方法:使用分子克隆方法构建包含cagA基因上、下游同源臂及氯霉素转乙酰基酶(CAT)的自杀型cag A基因靶向失活质粒pHG1,经PCR验证后将该质粒电转化入H.pylori 11639菌株中,通过氯霉素抗性筛选出cagA基因失活突变株。结果:pHG1质粒构建成功并转化进入H.pylori 11639菌株,氯霉素筛选获得cagA基因组区段发生重组的Δcag A突变株(Δcag A::gro EL-cat);PCR结果表明,cagA基因突变株构建成功。结论:使用自杀型同源重组质粒pHG1成功构建幽门螺旋杆菌(H.pylori)cag A基因失活突变株。(本文来源于《贵阳医学院学报》期刊2015年12期）
基因失活论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株,为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础。方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段,以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重迭延伸聚合酶链反应法(overlap extension polymerase chain reaction,OE-PCR)获取上述3个片段的同源重组片段;与pEASY-Blunt Cloning Vector连接形成重组质粒后,进行PCR鉴定和测序鉴定;将重组片段电转化入UA159-FR感受态细胞中得到gtfB基因失活菌株,并进行PCR鉴定。结果:经PCR鉴定和测序鉴定,含有gtfB基因重组片段的重组质粒构建成功;经PCR鉴定,UA159-FR的gtfB基因失活株构建成功。结论:成功构建了含有gtfB基因重组片段的重组质粒和S.mutans耐氟菌株UA159-FR的gtfB基因失活株,可用于gtfB基因功能的研究。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因失活论文参考文献
[1].刘霞.CMAH基因失活或导致人类更易患心血管疾病[N].科技日报.2019
[2].李文月,高爽,张志鹰,张红,超博.变形链球菌耐氟菌株gtfB基因失活菌株的构建[J].口腔医学研究.2018
[3].张兴艳.PRDM1/Blimp1基因失活及甲基化在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的作用研究[D].新疆医科大学.2018
[4].何思雨,成文玉,金红星.S-丙二酰转移酶基因失活对地中海拟无枝酸菌产利福霉素的影响[J].生物技术通报.2017
[5].宋玉立.第一部分PHLDA3基因失活导致肿瘤发生及临床意义第二部分胰腺神经内分泌肿瘤中YY1基因热点突变[D].北京协和医学院.2017
[6].何思雨.fabD和aceA基因失活对地中海拟无枝酸菌产利福霉素的影响[D].河北工业大学.2017
[7].孙进,李凤飞,朱红红,李建民,马建华.胰岛β细胞中PP2ACα基因失活小鼠模型的建立及初步表型分析[J].南京医科大学学报(自然科学版).2016
[8].刘碧英.肝癌细胞SOX_7基因失活及其启动子区的甲基化状态的研究[J].生物技术世界.2016
[9].Jian-zhong,XU,Wei-guo,ZHANG.遗传改造细菌基因组的策略:基因定点突变、基因失活和基因过表达（英文）[J].JournalofZhejiangUniversity-ScienceB(Biomedicine&Biotechnology).2016
[10].洪伟,陈学书,吴昌学,郜双林,赵艳.幽门螺旋杆菌cagA基因失活突变株的构建[J].贵阳医学院学报.2015
论文知识图
