朱砂七拮抗耐药金黄色葡萄球菌的实验研究及免疫调节机制初探

朱砂七拮抗耐药金黄色葡萄球菌的实验研究及免疫调节机制初探

论文摘要

目的:本研究通过多水平评价体系明确朱砂七是否可以拮抗耐药金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA),并探讨其发挥拮抗作用的免疫调节机制。方法:采用试管二倍稀释法进行药物敏感试验,观察药物对MRSA生长的抑制作用,再检测朱砂七是否影响金MRSA对宿主细胞的侵入,纤粘连蛋白粘附试验评价朱砂七对细菌粘附作用的影响。荧光定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)法检测朱砂七对AT-Ⅱ细胞模式识别受体Toll样受体(Toll like receptor,TLRs)和胞质受体家族核苷结合寡聚结构域(nucleotide-binding oligomerization domain,NODs)及其下游炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)/白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)基因表达的影响。通过Western blot检测朱砂七对AT-Ⅱ细胞模式识别受体MAPK和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白表达水平的影响。结果:朱砂七组AT-Ⅱ细胞的MRSA侵入数量(471.57±34.32)明显低于模型组(1014.54±127.51,P<0.05)和阳性对照组(810.05±101.33,P<0.05)。朱砂七组MRSA感染AT-II细胞纤粘连蛋白吸附比例(0.25±0.01)明显低于模型组(1.04±0.12,P<0.05)和阳性对照组(0.74±0.07,P<0.05)。RT-PCR结果显示,MRSA可明显升高AT-Ⅱ细胞TLR2、NOD2及其下游炎性因子IL-6、TNF-α(P<0.05),朱砂七可降低其升高水平(P<0.05)。Western blot检测结果表明,朱砂七可以明显下调MAPK和NF-κB信号通路蛋白表达(P<0.05)。结论:朱砂七可以拮抗耐药金黄色葡萄球菌,该作用可能涉及MAPK和NF-κB信号通路,进而调控TLRs/NLRs模式识别受体及其下游炎性因子TNF-α/IL-6。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料
  •   1.2 金黄色葡萄球菌的鉴定和培养
  •   1.3 AT-Ⅱ细胞培养和保存
  •   1.4 药物敏感实验
  •   1.5 侵入实验
  •   1.6 纤粘连蛋白粘附实验
  •   1.7 RT-PCR
  •   1.8 Western blot
  •   1.9 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 MRSA对朱砂七敏感性评价
  •   2.2 朱砂七减少MRSA对AT-Ⅱ细胞的侵入
  •   2.3 朱砂七降低对MRSA纤粘连蛋白的粘附
  •   2.4 朱砂七对MRSA感染AT-Ⅱ细胞TLR2、NOD2受体及下游炎性因子TNF-α/IL-6的mRNA表达水平的影响
  •   2.5 朱砂七对MRSA感染AT-Ⅱ细胞MAPK、NF-κB蛋白表达水平的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 曹兰秀,吕娟,赵娴,王江,马莉

    关键词: 朱砂七,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,模式识别受体,样受体,核因子

    来源: 重庆医科大学学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 陕西中医药大学基础医学院方剂教研室,陕西中医药大学中药教研室

    基金: 陕西省科技厅专项科研资助项目(编号:2017JM8021),陕西省教育厅自然专项科研资助项目(编号:2010Jk476),陕西省中管局资助项目(编号:2009jc67)

    分类号: R392

    DOI: 10.13406/j.cnki.cyxb.001975

    页码: 605-610

    总页数: 6

    文件大小: 437K

    下载量: 153

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