山羊痘病毒059蛋白表达及鉴定

山羊痘病毒059蛋白表达及鉴定

论文摘要

为研究山羊痘病毒的059蛋白,本研究用PCR技术扩增山羊痘病毒THX株059基因,并构建了融合表达His标签的原核表达载体,测序鉴定并分析了059基因的核苷酸序列特征和推测的氨基酸序列结构特征,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western-blot鉴定其蛋白表达情况。结果成功扩增并构建了山羊痘病毒059基因的原核表达载体PET-42b-059,THX株059基因全长为765 bp,与参考株的相似性高达99. 34%,与山羊痘病毒在亲缘关系上较近,而与疙瘩皮肤病病毒与绵羊痘病毒的亲缘关系较远。059蛋白会长255aa,由多个α螺旋和β片层交错构成,分子量大小为29 KDa,SDS-PAGE结果显示其以包涵体的形式表达,大小与理论相符,Western Blot结果证明059蛋白与His标签进行了融合表达。结果表明059蛋白可以较好原核表达,为进一步研究该蛋白的其他生物学特性奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 毒株与菌种
  •     1.1.2 主要药品及试剂
  •     1.1.3 主要使用仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 山羊痘病毒基因组的提取
  •     1.2.2 原核表达载体构建
  •       1.2.2. 1 引物合成
  •       1.2.2. 2 059基因的扩增
  •       1.2.2. 3 0 5 9 基因与质粒的酶切与纯化
  •       1.2.2. 4 0 5 9 基因与原核表达载体的连接与鉴定
  •     1.2.3 THX株059基因核苷酸及推测的氨基酸序列分析
  •     1.2.4 059蛋白表达及鉴定
  •       1.2.4. 1 059蛋白的表达
  •       1.2.4. 2 Western Blot检测
  • 2 结果
  •   2.1 PCR扩增目的基因
  •   2.2 PET42b-GTPV-059重组质粒的菌液PCR检验结果
  •   2.3 PET42b-GTPV-059重组质粒双酶切结果
  •   2.4 GTPV-059基因序列分析
  •   2.5 GTPV-059遗传进化树
  •   2.6 GTPV-059蛋白二级结构分析
  •   2.7 059蛋白表达检测
  •   2.8 059蛋白Wastern-blot鉴定
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 米丽开姆·托合提尼亚孜,张雪萍,何川川,童剑军,杨倩,李有文

    关键词: 羊痘病毒,基因,克隆,原核表达

    来源: 塔里木大学学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 塔里木大学动物科学学院,新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室,塔里木大学生命科学学院

    基金: 国家自然科学基金项目(31360616,31760741),塔里木畜牧科技兵团重点实验室开放课题项目(HS201307)

    分类号: S852.65

    页码: 12-18

    总页数: 7

    文件大小: 1548K

    下载量: 85

    相关论文文献

    • [1].山羊痘病的防疫与中药治疗[J]. 中兽医学杂志 2018(05)
    • [2].山羊痘的诊断及防治探析[J]. 畜禽业 2019(04)
    • [3].山羊痘的诊治[J]. 农民致富之友 2018(04)
    • [4].山羊痘流形特点和防治[J]. 中国畜禽种业 2018(04)
    • [5].山羊痘的预防及治疗[J]. 畜禽业 2018(06)
    • [6].中西医结合对山羊痘的防治[J]. 中兽医学杂志 2018(03)
    • [7].山羊痘的诊治[J]. 养殖与饲料 2017(11)
    • [8].山羊痘的诊断与免疫研究[J]. 农家参谋 2017(19)
    • [9].山羊痘的预防及治疗[J]. 现代农业科技 2017(20)
    • [10].山羊痘病毒反向间接血凝试验方法的建立[J]. 中国畜牧兽医文摘 2015(10)
    • [11].中西医结合治疗山羊痘[J]. 中兽医医药杂志 2019(03)
    • [12].山羊痘的诊断与处置措施[J]. 中国畜牧兽医文摘 2018(06)
    • [13].山羊痘病毒贵州株的分离与鉴定[J]. 黑龙江畜牧兽医 2008(03)
    • [14].山羊痘病毒检测方法研究进展[J]. 中国兽药杂志 2018(03)
    • [15].山羊痘的综合防制对策[J]. 当代畜禽养殖业 2018(06)
    • [16].山羊痘的防治[J]. 中国畜牧兽医文摘 2018(06)
    • [17].山羊痘病毒双向启动子序列的克隆与鉴定[J]. 中国预防兽医学报 2011(08)
    • [18].山羊痘病毒的鉴定及序列分析[J]. 中国兽医科学 2011(12)
    • [19].绵羊睾丸支持细胞的分离鉴定及其在山羊痘病毒疫苗株培养中的应用[J]. 中国兽医科学 2020(03)
    • [20].山羊痘的防制技术[J]. 畜禽业 2019(04)
    • [21].山羊痘的诊断与免疫防制[J]. 畜牧兽医科技信息 2017(01)
    • [22].山羊痘病毒和支原体混合感染症的诊断与防治[J]. 养殖技术顾问 2013(06)
    • [23].表达小反刍兽疫H蛋白的重组山羊痘病毒疫苗[J]. 生物工程学报 2009(04)
    • [24].山羊痘病的流行特点、临床表现与防控措施[J]. 现代畜牧科技 2018(05)
    • [25].山羊痘疫苗免疫保护能力试验[J]. 中兽医医药杂志 2018(03)
    • [26].山羊痘病毒不同基因片段PCR诊断方法的研究[J]. 黑龙江畜牧兽医 2008(07)
    • [27].重庆地区山羊痘病毒分离鉴定及其动物模型构建[J]. 中国草食动物科学 2018(03)
    • [28].O型口蹄疫病毒VP1基因重组山羊痘病毒活载体疫苗的研究[J]. 宁夏大学学报(自然科学版) 2017(04)
    • [29].云南流行山羊痘病毒的PCR鉴定及基因序列分析[J]. 中国兽医杂志 2008(03)
    • [30].山羊痘病毒ORF112基因的克隆与序列分析[J]. 中国草食动物科学 2018(01)

    标签:;  ;  ;  ;  

    山羊痘病毒059蛋白表达及鉴定
    下载Doc文档

    猜你喜欢