共定位论文_樊振宇,包烨华,张永生,楚佳梅

导读:本文包含了共定位论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蛋白,荧光,免疫,胶质,受体,阿尔,激素。

共定位论文文献综述

樊振宇,包烨华,张永生,楚佳梅[1](2019)在《麦粒灸对双转基因AD小鼠GFAP与Ab_(1-42)斑块共定位的影响》一文中研究指出目的探讨麦粒灸治疗阿尔茨海默病(AD)的相关机制及对小鼠脑内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)与b-淀粉样蛋白_(1-42)(Ab_(1-42))斑块的共定位的影响。方法 PCR法进行小鼠基因型的鉴定,将1.5月龄双转基因AD小鼠40只,随机分为治疗组和模型组各20只,同龄、同背景的阴性纯合子小鼠20只,为正常组。治疗组小鼠取双侧心俞、肾俞行麦粒灸治疗。采用免疫荧光法检测AD转基因小鼠GFAP与Ab_(1-42)斑块的共定位情况。结果模型组AD小鼠额叶皮层和海马区GFAP与Ab_(1-42)阳性细胞共表达率明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组AD小鼠治疗后额叶皮层、海马区GFAP与Ab_(1-42)阳性细胞共表达率低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论早期麦粒灸疗法可以抑制AD小鼠星形胶质细胞的炎症反应,抑制Ab异常聚集,延缓AD病理过程的进展。(本文来源于《上海针灸杂志》期刊2019年11期)

何叶,潘林鑫,张永,范礼斌,刘晓颖[2](2019)在《Sedlin突变体的表达及其与RB1在细胞中的共定位》一文中研究指出目的构建脊椎骨骺发育不良蛋白(Sedlin)的缺失突变和点突变体质粒,检测其在细胞内的表达、定位及其与RB1蛋白的共定位情况,为后续研究蛋白质相互作用提供依据。方法以Sedlin全长cDNA序列为模板,扩增目的基因序列,连接至表达载体,构建3个原核表达质粒,即pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F和相应的真核表达质粒,即pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F。分别转化pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F到大肠杆菌BL21感受态细胞中,IPTG诱导表达、谷胱甘肽琼脂糖球珠纯化后进行SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝染色法检测其表达情况;分别转染pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F于HEK 293T细胞,Western blot法检测相关蛋白在真核细胞中的表达情况;分别单转pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F以及将上述质粒与pDNA3.1-FLAG-RB1共转到COS7细胞中,进行免疫荧光制片,观察其在真核细胞内的定位情况。结果测序结果显示pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F和pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F重组质粒构建成功;考马斯亮蓝染色显示融合蛋白GST-SedlinN/Y115A/Y115F在BL21细胞中能够大量表达;Western blot结果显示GFP-SedlinN/Y115A/Y115F在HEK 293T细胞中能够高效表达;免疫荧光结果显示GFP-SedlinN/Y115A/Y115F蛋白在COS7细胞的细胞质和细胞核中均有分布,并与RB1蛋白存在明显的核内共定位。结论人Sedlin及其突变体在BL21菌株和HEK 293T细胞中均能有效表达;在COS7细胞中,Sedlin主要表达于细胞核,而Sedlin突变体除在细胞核中表达外,在细胞质中也有相当量的表达,Sedlin及其突变体均与RB1蛋白共定位,显示Sedlin羧基端以及NPFY基序中的Y磷酸化与否并不影响与RB1蛋白的共定位。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2019年10期)

狄安洁,吴庆瑜,谭剀,徐双悦,兰天舒[3](2019)在《对细胞膜质蛋白共定位染色方法的改良》一文中研究指出[目的]将流式细胞术染色方法进行改良用于T细胞膜质蛋白共定位的共聚焦显微镜检测,在共定位表达于细胞膜上的CD4和细胞质内表达的TIPE2蛋白较常规镜检免疫荧光染色法可提高实验效率。[方法]取小鼠脾脏T细胞,用流式细胞术的染色方法代替实验室常规免疫染色法,对细胞膜上的CD4与细胞质内的TIPE2蛋白进行染色,制片并在激光共聚焦显微镜下观察。[结果]小鼠脾脏CD4+T细胞上出现了TIPE2蛋白的共表达,符合实验预期,同时实验效率从原有10%提高到90%。[结论]采用该染色方法后突破了常规免疫荧光染色必须要在载玻片上进行的局限,简化了操作,保证了实验的有效性,提高实验效率。(本文来源于《生物技术》期刊2019年04期)

来兄[4](2019)在《TSSK6与IZUMO1和IZUMO4在绵羊精子上的共定位》一文中研究指出哺乳动物精卵融合是精子和卵子上多种蛋白相互作用介导完成的。但这些蛋白在精卵融合过程中的具体作用还不清楚。经基因敲除小鼠模型鉴定,精子上的IZUMO家族成员IZUMO1和睾丸特异性丝氨酸苏氨酸激酶TSSK6是精卵融合所必需的蛋白。IZUMO家族有四个成员,其中IZUMO1、IZUMO2和IZUMO3是睾丸特异性表达的膜蛋白,而IZUMO4是睾丸和其它组织均表达的可溶性蛋白。本实验室前期用酵母双杂交、哺乳动物双杂交和免疫共沉淀技术在分子水平上鉴定发现绵羊TSSK6既能与IZUMO1结合也能与IZUMO4结合,但这叁种蛋白在绵羊精子细胞上是否结合?什么时候、什么部位结合?还需要进一步鉴定。本实验拟用间接免疫荧光技术研究TSSK6与IZUMO1和IZUMO4在绵羊精子上的共定位,从而进一步确定这叁种蛋白在细胞水平是否结合。本实验首先克隆了绵羊Tssk6、Izumo1和Izumo4的cDNA编码区,分别插入到pGEX-4T-1质粒构建了pGEX-Tssk6、pGEX-Izumo1和pGEX-Izumo4原核表达载体,分别在大肠杆菌中表达了GST-TSSK6、GST-IZUMO1和GST-IZUMO4的融合蛋白。用分离纯化后的GST-TSSK6融合蛋白免疫实验兔,GST-IZUMO1和GST-IZUMO4融合蛋白分别免疫小鼠,得到了兔抗TSSK6的血清多克隆抗体和鼠抗IZUMO1、鼠抗IZUMO4腹水多克隆抗体。以自制的兔抗羊TSSK6血清为一抗、驴抗兔IgG-Alex Flour~(TM) 568为二抗,鼠抗羊IZUMO1腹水为一抗、山羊抗鼠IgG-Alex Flour~(TM) 488为二抗,用间接免疫荧光技术观察到,在获能精子的表面,IZUMO1位于顶体赤道区,TSSK6分布于赤道靠下及尾部,二者没有共定位。以自制的鼠抗羊IZUMO4腹水为一抗、山羊抗鼠IgG-Alex Flour~(TM) 488为二抗,用间接免疫荧光技术观察到,在获能精子表面,IZUMO4分布于精子头部,TSSK6分布于颈部和尾部,二者没有共定位。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-06-03)

安新业,纪冰,孙大康[5](2019)在《TRIM22与HIV衣壳蛋白p24在脑胶质瘤细胞中的表达特点及共定位研究》一文中研究指出目的观察外源性叁基序蛋白22(TRIM22)与HIV衣壳蛋白p24在U-251脑胶质瘤细胞中的表达特点及共定位情况。方法分别将pEGFP-N3-TRIM22或pDsRed1p24载体转染U-251细胞,通过激光共聚焦显微镜观察TRIM22-EGFP和p24-DsRed1的表达和分布情况。通过激光共聚焦xyz轴扫描,经ImageJ 1.50i软件进行3D结构重建,观察p24-Dsred1在U-251细胞中的分布特点。将pEGFP-N3-TRIM22和pDsRed1p24载体在U-251细胞中共表达,观察TRIM22-EGFP和p24-DsRed1是否存在共定位关系。结果单独转染pEGFP-N3-TRIM22或pDsRed1p24载体时,TRIM22-EGFP和p24-DsRed1在U-251细胞的胞体或突起中均有较高水平的表达;且3D结构重建显示外源性p24-DsRed1可迁移至U-251细胞的足突。在U-251细胞共转染pEGFP-N3-TRIM22和pDsRed1p24载体时,TRIM22-EGFP与p24-DsRed1存在共定位关系,并能以出胞形式脱离细胞。结论 TRIM22与HIV衣壳蛋白p24在U-251脑胶质瘤细胞中存在共定位关系。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2019年03期)

陶一鸣,杜艳军,田青,王静芝,孙国杰[6](2019)在《电针对阿尔茨海默病大鼠齿状回星形胶质细胞和白细胞介素-10表达及其共定位的影响》一文中研究指出目的观察电针对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马齿状回星形胶质细胞(AC)和白细胞介素(IL)-10表达及其共定位的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠随机等分成对照组、假手术组、模型组和治疗组。采用双侧海马注射Aβ1~42建立AD模型。对照组、假手术组和模型组不予任何治疗;治疗组选取百会、肾俞,电针20 min,1次/d,6 d为1个疗程,2个疗程间休息1 d。采用免疫组化法和免疫双标法检测相关指标。结果模型组和治疗组胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性表达均显着升高(P<0. 01),但两组间无显着性差异(P>0. 05),模型组AC胞体变大,突起增多增粗,胞核空化,染色深。模型组IL-10阳性表达显着降低(P<0. 01),治疗组IL-10阳性表达显着增强(P<0. 01)。假手术组IL-10与GFAP共定位呈金黄色,模型组IL-10主要定位于神经元细胞核,治疗组IL-10表达显着增强,不仅表达在神经元细胞核,也表达在神经元纤维。结论电针对AD的调节作用不限于抗炎作用,尚可促进AC对神经元的抗炎保护作用。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2019年04期)

王子豪,张奇亚[7](2019)在《鲫疱疹病毒ORF31R(CaHV-31R)的特征及其编码蛋白与细胞器共定位》一文中研究指出鲫疱疹病毒(Carassius auratus herpesvirus, CaHV)是一种引起鲫急性鳃出血症和高死亡率的病毒病原。病毒要借助功能基因与细胞组分(如细胞器)的相互作用才能完成感染与复制。本实验通过生物信息分析、PCR扩增、重组质粒构建及其与细胞器标记质粒共转染鱼细胞(epithelioma papulosum Cyprinid, EPC)的荧光观察,对预测鲫疱疹病毒基因CaHV-31R编码蛋白的特性、亚细胞定位及与细胞器共定位进行研究。结果显示,鲫疱疹病毒编码蛋白CaHV-31R由313个氨基酸组成,含一个跨膜结构域(248~270 aa)和一个RNase E/G家族蛋白的典型结构域(40~182 aa);与5种来源鲤疱疹病毒同源蛋白多重比对发现,与鲤疱疹病毒II型中的日本株ST-J1和中国株SY-C1的同一性较高(分别为100%和80.7%),与鲤疱疹病毒I型代表株CyHV-1的同一性居中(为26.5%),而与鲤疱疹病毒III型中的德国株CyHV-3(或称锦鲤疱疹病毒Koi herpesvirus,KHV)和中国株CyHV-3-GZ11的同一性最低(分别为20.7%和18.2%);经基因扩增和构建真核重组质粒pEGFP-31R,当用其单独转染EPC细胞,绿色荧光信号主要在细胞质中呈弥散分布,少量在细胞质中或在细胞核外围呈点状分布;当用pEGFP-31R与内质网标记质粒pDsRed2-ER或与高尔基体标记质粒pDsRed2-Golgi共转染细胞,绿色荧光信号在胞质中的分布情况与单独转染时不同,分别能与2种有单层膜结构的细胞器—内质网和高尔基体共定位。研究表明,CaHV-31R是鲫疱疹病毒中一个能编码与细胞器共定位蛋白的基因。(本文来源于《水产学报》期刊2019年05期)

马玉涛,石文娜,李晓林,周连泉,王世军[8](2018)在《免疫荧光法检测FSHR与GnRHR在胃癌组织中的分布及其共定位研究》一文中研究指出目的研究卵泡刺激素受体与促性腺激素释放激素受体在胃癌组织中的定位、分布及共存性。方法选取我院胃肠外科经手术和病理证实的48例胃癌患者的病理组织石蜡包块标本,采用免疫荧光双标记定位方法检测胃癌标本中FSHR及GnRHR的定位及分布。结果 FSHR和GnRHR在胃癌组织细胞胞浆中均有分布,免疫荧光反应阳性物质分布于细胞质,细胞核呈阴性反应,二者分布模式相同。结论 FSHR与GnRHR在胃癌组织中分布具有共存性,提示其可能对胃癌的病理发生机制具有重要的影响。(本文来源于《医学信息》期刊2018年23期)

王娟娟,魏学红[9](2018)在《激光共聚焦显微技术在共定位应用中的常见问题》一文中研究指出荧光共定位分析是当今生物显微成像中一个极为常见的技术。本文从以下4个方面详细介绍了使用Zeiss LSM880型激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)进行共定位研究时常见的问题及解决方法:1.如何用共聚焦进行共定位实验;2.如何进行共定位分析;3.如何评价共定位;4.如何判定共定位结果。在共定位研究中,只要按照共定位实验的基本要求拍摄图像,并按照上述方法进行分析,便可得到准确可靠的共定位分析结果。(本文来源于《影像科学与光化学》期刊2018年06期)

孙宇慧,刘天相,石善党,丁梦云,高欣[10](2018)在《小麦穗粒数及千粒重主效QTL共定位区QC-7AL的精细定位及遗传效应分析》一文中研究指出为了研究小麦7AL染色体上与穗粒数及千粒重相关的基因位点及其遗传效应,对小麦穗粒数及千粒重主效QTL共定位区QC-7AL进行了精细定位及遗传效应分析。结果表明,QC-7AL主要位于小麦7AL染色体的IWA7406~IWA5913标记区间,长度为3.1cM,对应的物理距离约为5.63 Mb,其中包含了473个SNP标记和81个基因。QC-7AL对穗粒数和千粒重具有明显相反的遗传效应,其遗传效应分别为9.3%~14.3%和8.7%~13.7%。QC-7AL与QC-4BS位点对小麦穗粒数具有明显的互作效应,且QC-7AL位点对穗粒数的遗传效应略大于QC-4BS位点。(本文来源于《麦类作物学报》期刊2018年11期)

共定位论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的构建脊椎骨骺发育不良蛋白(Sedlin)的缺失突变和点突变体质粒,检测其在细胞内的表达、定位及其与RB1蛋白的共定位情况,为后续研究蛋白质相互作用提供依据。方法以Sedlin全长cDNA序列为模板,扩增目的基因序列,连接至表达载体,构建3个原核表达质粒,即pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F和相应的真核表达质粒,即pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F。分别转化pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F到大肠杆菌BL21感受态细胞中,IPTG诱导表达、谷胱甘肽琼脂糖球珠纯化后进行SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝染色法检测其表达情况;分别转染pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F于HEK 293T细胞,Western blot法检测相关蛋白在真核细胞中的表达情况;分别单转pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F以及将上述质粒与pDNA3.1-FLAG-RB1共转到COS7细胞中,进行免疫荧光制片,观察其在真核细胞内的定位情况。结果测序结果显示pGEX-3X-SedlinN/Y115A/Y115F和pCDGFP-SedlinN/Y115A/Y115F重组质粒构建成功;考马斯亮蓝染色显示融合蛋白GST-SedlinN/Y115A/Y115F在BL21细胞中能够大量表达;Western blot结果显示GFP-SedlinN/Y115A/Y115F在HEK 293T细胞中能够高效表达;免疫荧光结果显示GFP-SedlinN/Y115A/Y115F蛋白在COS7细胞的细胞质和细胞核中均有分布,并与RB1蛋白存在明显的核内共定位。结论人Sedlin及其突变体在BL21菌株和HEK 293T细胞中均能有效表达;在COS7细胞中,Sedlin主要表达于细胞核,而Sedlin突变体除在细胞核中表达外,在细胞质中也有相当量的表达,Sedlin及其突变体均与RB1蛋白共定位,显示Sedlin羧基端以及NPFY基序中的Y磷酸化与否并不影响与RB1蛋白的共定位。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

共定位论文参考文献

[1].樊振宇,包烨华,张永生,楚佳梅.麦粒灸对双转基因AD小鼠GFAP与Ab_(1-42)斑块共定位的影响[J].上海针灸杂志.2019

[2].何叶,潘林鑫,张永,范礼斌,刘晓颖.Sedlin突变体的表达及其与RB1在细胞中的共定位[J].安徽医科大学学报.2019

[3].狄安洁,吴庆瑜,谭剀,徐双悦,兰天舒.对细胞膜质蛋白共定位染色方法的改良[J].生物技术.2019

[4].来兄.TSSK6与IZUMO1和IZUMO4在绵羊精子上的共定位[D].内蒙古大学.2019

[5].安新业,纪冰,孙大康.TRIM22与HIV衣壳蛋白p24在脑胶质瘤细胞中的表达特点及共定位研究[J].西安交通大学学报(医学版).2019

[6].陶一鸣,杜艳军,田青,王静芝,孙国杰.电针对阿尔茨海默病大鼠齿状回星形胶质细胞和白细胞介素-10表达及其共定位的影响[J].中国老年学杂志.2019

[7].王子豪,张奇亚.鲫疱疹病毒ORF31R(CaHV-31R)的特征及其编码蛋白与细胞器共定位[J].水产学报.2019

[8].马玉涛,石文娜,李晓林,周连泉,王世军.免疫荧光法检测FSHR与GnRHR在胃癌组织中的分布及其共定位研究[J].医学信息.2018

[9].王娟娟,魏学红.激光共聚焦显微技术在共定位应用中的常见问题[J].影像科学与光化学.2018

[10].孙宇慧,刘天相,石善党,丁梦云,高欣.小麦穗粒数及千粒重主效QTL共定位区QC-7AL的精细定位及遗传效应分析[J].麦类作物学报.2018

论文知识图

在肠粘膜的表达及其与杯状细胞...抑制Numb表达损伤细胞屏障通透性沿着EE-RE-LE途径的运输在HMEC细胞中转运的结果敲除引起高尔基体重排的细...成分蛋白Esa1、Epl1和Rpd3-Sin3成...

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

共定位论文_樊振宇,包烨华,张永生,楚佳梅
下载Doc文档

猜你喜欢