二种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的评价

二种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的评价

胡永忠曾细英陈雪梅(江西新余市妇幼保健院338025)

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)29-0364-01

【摘要】目的耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检测方法比较。方法用K-B法,药敏纸片为头孢西丁(30μg/片),用NCCLS规定的MRS确诊试验苯哇西林法和K-B琼脂扩散法(纸片用头孢西丁FOX)进行对比试验(对比试验和方法不作详细说明)。结果两者方法的检出率几乎相同。结论K-B琼脂扩散法用(FOX)简单、易行。

【关键词】金黄色葡萄球菌MRS扩散法FOX

1什么是耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)

金黄色葡萄球菌是临床上常见的毒性较强的细菌,自从本世纪40年代青霉素问世后,金黄色葡萄球菌引起的感染性疾病受到较大的控制,但随着青霉素的广泛应用,有些金黄色葡萄球菌产生青霉素酶,能水解β-内酷胺环,表现为对青霉素的耐药。因而人们又研究出一种新的能耐青霉素酶的半合成青霉素,即甲氧西林。此药应用于临床后有效地控制金黄色葡萄球菌产酶株的感染,可时隔不久,由于抗生素的广泛应用,英国的JEVONS就首先发现了耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌。此菌已遍及全球,国内多数医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的院内感染率已在50%以上,已成为院内感染的重要病原菌之一。因此,开展对耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检测,对于控制医院内的感染的流行。指导临床治疗有着十分重要的意义。

2材料和方法

2.151株菌株均来自于临床标本,经常规分离鉴定得到,收集本院2006--09年间标本培养分离的金黄色葡萄球菌51株,其中金黄色葡萄球菌(SA)39株,凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)12株。MRS阳性参考菌株ATCC(R)43300,MRS阴性菌ATCC25923均购于省临检中心。M-H培养基购于杭州天和生物制品有限公司。抗菌药物苯唑西林(1μg/片)纸片和头孢西丁(30μg/片)购于北京天坛生物制品有限公司。

2.2MRS的测定方法有很多,如纸片扩散法微量肉汤稀释法,琼脂筛选法,仪器测定法,Etest法,核酸探针技术和PCR法和Meca(l)基因法等。目前大多数医院多采用苯唑西林纸片(1μg/片)来检测,但当它的抑菌环直径在中介时就很难作出判断,那么就得用MIC法来做筛选试验,这样既耗时又费力,且上述其它方法在基层的医院又难以开展,在这种情况下我们采用一种头孢西丁(30μg/片)纸片来监测MRS,其方法简单,结果准确,重复性好。

2.3步骤:用K-B法,培养基为2%NaCl的M-H琼脂,接种物为直接菌悬液,挑选来自过夜的琼脂平板培养基,制备被检菌株悬液,调至0.5麦氏比浊管,具体操作方法如常规纸片法。贴头孢西丁纸片,35℃孵育24小时(而不是16-18小时),结果判断:如头孢西丁抑菌环直径≥18mm为敏感。若≤18mm则为MRS。

对于凝固酶阴性的金黄色葡萄球菌其抑菌环直径≥24mm为敏感。若≤24mm则为MRS。

2.4质量控制:以金黄色葡萄球菌ATCC29213为敏感性对照菌株,金黄色葡萄球菌ATCC43300为耐药性对照菌株。药敏质控菌株与实验菌株同时进行。

3讨论

3.1K-B琼脂扩散法方法简单,结果易判断,不需要做筛选试验。且能给临床医生提供准确、及时的药敏结果。

3.2MRS监测意义:对于MRS应报告对所有头孢菌素类和其它β-内酷胺类耐药,喹喏硐类药物除氟哌酸外,环丙氟哌酸、氟嗪酸有较好的抗菌活性。利福平敏感率在90%以上,未见耐万古霉素菌株,但己有万古霉素中介金黄色葡萄球菌,如疑为耐万古霉素的金黄色葡萄球菌菌株,应需送参考实验室。

参考文献

[1]赵玉坤,娄金丽等.耐甲氧西林葡萄球菌的临床检测——中华医学检验杂志1996.19.361-363.

[2]李蓓,刘晶靖,孙竞等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的比较郧阳医学院学报2006,1(25):21-23.

[3]张绍银.846株金葡菌中耐甲氧西林葡萄球菌的分离结果及耐药性分析实用医学杂志,2005,21(3):257-259.

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