miR-206靶向调控活化的T细胞核因子对人前列腺癌细胞增殖和侵袭的影响

miR-206靶向调控活化的T细胞核因子对人前列腺癌细胞增殖和侵袭的影响

论文摘要

目的:探讨miR206靶向调控活化的T细胞核因子5(NFAT5)蛋白表达对前列腺癌细胞增殖与侵袭的影响。方法:采用RT-qPCR技术对40例前列腺癌患者和40例前列增生患者的前列腺组织的miR-206和NFAT5表达水平进行检测。通过双荧光素酶试验检测miR-206和NFAT5的靶向关系。采用LipofectamineTM2000将miR-206-mimics和miR-206-NC转入PC-3细胞中,CCK8法检测两组细胞增殖速率,Transwell技术检测两组细胞侵袭能力的变化。Western blot方法和q-PCR技术测定两组细胞NFAT5、增殖细胞核抗原(PCNA)、EMT相关分子钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平。结果:前列腺癌组织miR-206表达水平显著低于前列腺增生组织,而前列腺癌组织NFAT5表达水平显著高于前列腺增生组织(均P<0.000 1),并且两者呈负相关关系(r=-0.934,P<0.000 1)。miR-206靶向调控NFAT5的3′-UTR,降低了荧光素酶的表达活性。与miR206-NC比较,细胞转染miR-206-mimics后,miR-206的表达水平显著升高,转染miR-206-mimics 48 h和72 h后,PC-3细胞的增殖速率显著降低(P<0.05)。转染miR-206-mimics后,与miR206-NC组比较,侵袭性PC-3细胞的数量明显降低(P<0.05)。与miR-206-NC组比较,miR-206-mimics组E-cadherin蛋白和mRNA水平显著升高,NFAT5、PCNA、Vimentin蛋白和mRNA水平显著降低(均P<0.05)。结论::miR-206可以通过靶向调控NFAT5的表达影响前列腺癌增殖和侵袭,在前列腺癌的发生发展过程中起重要作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 细胞株
  •     1.1.2 主要试剂和仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞培养
  •     1.2.2 RT-qPCR检测组织与细胞中miR-206和NFAT5的表达
  •     1.2.3 荧光素酶报告基因检测miR-206和NFAT5的结合
  •     1.2.4 细胞转染
  •     1.2.5 RT-qPCR检测转染后的细胞miR-206的表达
  •     1.2.6 CCK8检测细胞增殖
  •     1.2.7 Transwell小室检测细胞侵袭
  •     1.2.8 NFAT5、PCNA、E-cadherin和Vimentin蛋白水平的测定
  •     1.2.9 NFAT5、PCNA、E-cadherin和Vimentin mRNA表达水平检测
  •   1.3 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 细胞和组织中miR-206和NFAT5的表达水平比较
  •   2.2 NFAT5是miR-206的靶向基因
  •   2.3 细胞增殖速率的比较
  •   2.4 细胞侵袭能力的比较
  •   2.5 NFAT5、PCNA、E-cadherin和Vimentin蛋白水平比较
  •   2.6 NFAT5、PCNA、E-cadherin和Vimentin mRNA水平比较
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 崔崎,韩玲,郭小鹏

    关键词: 前列腺癌,增殖,侵袭

    来源: 中国免疫学杂志 2019年22期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 泌尿科学,肿瘤学

    单位: 新疆医科大学附属中医医院泌尿科,新疆医科大学附属中医医院风湿免疫科

    基金: 新疆地产中药民族药新药研发培育项目(No.2016-02-02)

    分类号: R737.25

    页码: 2749-2754

    总页数: 6

    文件大小: 655K

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