导读:本文包含了烟草发根论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:发根,烟草,杆菌,基因,诱导,根瘤菌,苗期。
烟草发根论文文献综述
高渊[1]（2013）在《基于蛋白拆分的Cre/loxp系统构建及其在烟草发根中删除活性的初步验证》一文中研究指出植物转基因技术诞生于20世纪80年代,经历了叁十多年的发展历程,在现代农业生产实践中应用非常广泛。它在提高作物产量、改良作物品质、减少杀虫剂和除草剂等农药的使用方面有着非常重要的作用,转基因技术给我们带来了巨大的经济效益。与此同时,在全球能源危机日趋严重的情况下,转基因技术在生物能源方面的研究和应用日趋突出。可以说,转基因产品已经进入到我们的生活中。可是,人们对转基因产品的生物安全方面的担忧一直没有消除,针对“转基因产品是否安全”这一话题的争论一直在延续。从某种程度上讲,转基因技术的推广和应用因为人们的顾虑和争论而受到了严重的制约。因此,如何让人们既可以享受转基因产品带来的福利而又不担忧转基因产品可能带来的危害,这一问题亟待解决。在转基因生物安全控制方面的研究中,近年来建立的基因删除系统"Gene-deletor"备受关注。该系统在一定程度上能够准确高效的删除外源基因,但是由于其不能用于有性繁殖的植物和杂交作物,大大限制了该系统的推广应用。为了克服上述缺点,本研究对组成删除系统的重要元件—重组酶Cre拆分为N端和C端,构建了一个新的Cre/loxp系统。体外蛋白活性分析和体内实验证明,重组酶Cre蛋白拆分重建后仍具有较高的重组活性,从而为将来进一步改造"Gene-deletor"奠定了基础。论文具体研究结果如下：1、拆分蛋白体外原核表达及活性检测构建含有拆分后的重组酶Cre-N端(NCre)、C端(CCre)以及含有完整的重组酶Cre的原核表达载体,诱导表达、纯化。蛋白活性检测结果表明,拆分蛋白的N端(即NCre)无重组活性,而C端(即CCre)仍具有活性,进一步将拆分蛋白的N端和C端混合(即NCre+CCre),也表现出重组活性。2、植物表达载体构建以含有内含子(intron)的重组酶Cre的质粒为模板,用高保真DNA聚合酶进行扩增,获得全长的重组酶Cre以及各拆分片段,构建到中间载体pCXSN上,进一步连接到含有识别位点的载体pCA-LoxP上,筛选获得了预期的植物表达载体,并将上述载体通过冻融法导入发根农杆菌C58C1。3、Cre蛋白体内重组效应分析采用PCR技术对所有再生发根进行分子检测,确定转化后获得的阳性转基因发根。进一步对PCR检测呈阳性的发根进行GUS组织染色,结果发现,只含有重组酶Cre的单独的拆分片段(NCre或CCre)的转基因发根中,GUS染色为白色,表明单独的Cre拆分蛋白不具有重组活性；而在同时含有NCre和CCre的转基因发根中,GUS染色呈蓝色,说明当NCre和CCre同时存在时可以恢复重组活性,其与含有完整的重组酶Cre的删除结果一致。对删除后的转基因发根进行PCR扩增,测序分析显示,拆分蛋白NCre和CCre重建后确实恢复了重组活性,可有效删除转基因发根中两识别位点loxP之间的所有外源基因。4、GUS阳性率统计将所有载体转化烟草,对获得转基因发根进行GUS组织染色,统计每个转化载体GUS阳性的发根数目,重复叁次,取平均值,用阳性率粗略计算删除效率。染色结果表明,含有完整的重组酶Cre的删除效率为49%,而融合核定位信号后删除效率提高到60%,说明完整的重组酶Cre在烟草发根中具有重组活性；而拆分的重组酶的NCre或者CCre都没有重组活性,但是用同时含有NCre和CCre的双元表达载体转化的烟草发根可以检测到重组酶的活性,删除效率分别为46%和67%,显着提高。(本文来源于《西南大学》期刊2013-04-01）
黄丽萍,唐瑶,江龙[2]（2012）在《发根农杆菌菌株和烟草品种对毛状根诱导率的影响》一文中研究指出采用3×3双因子设计,研究发根农杆菌菌株和烟草品种对烟草毛状根诱导率的影响。结果表明:各菌株在不同烟草品种上均诱导出毛状根,经PCR技术检测,确定了发根农杆菌Ri质粒的rolB基因已整合到烟草基因组中。不同烟草品种和发根农杆菌菌株均显着影响毛状根的诱导率;Sumxun毛状根平均诱导率最高,达到了53.4%,其适宜菌株为A4和ATCC15834;K326为34.2%,其适宜菌株为R1000;云烟85为25.6%,其适宜菌株为ATCC15834。(本文来源于《山地农业生物学报》期刊2012年04期）
刘蓓蓓[3]（2011）在《烟草根特异性启动子植物表达载体的构建及其对红景天发根的遗传转化》一文中研究指出植物特异性启动子能够控制外源基因在特定的组织或器官、特定的时间、特定的生长环境中表达,并使受体植物其他部分的生长发育以及生理指标几乎不发生改变,从而确保了受体植物的正常生长发育。因此对特异性启动子的结构功能、表达特征、作用机制的研究成为基因表达调控的重要内容,根据特异性启动子的特点来正确利用是植物基因工程研究的一种有效途径。根特异性启动子可以驱动外源基因在受体植物的根部特异表达,减少外源基因在受体植物中非特异表达所造成的浪费,使外源基因仅在植物的根部表达,以达到预期表达量。因此,根特异性启动子一直都受到植物基因工程专家的研究,并获得了很大的进步。利用毛状根生产次生代谢产物是目前最为有效的手段,因为毛状根的生长周期短,且具有遗传稳定性,产生的次生代谢物质含量高且稳定,属于激素自养型,所以在生产过程中容易培养、控制,物种不容易变异,所以我们将应用生物技术手段建立高效生产红景天苷这一次生代谢产物的红景天发根系统。红景天中催化合成红景天苷最后一步酪醇糖基化反应的关键酶就是UDP-葡萄糖基转移酶,而红景天苷对人类的药用价值已在运动医学、保健医学、航空航天医学以及军事医学等方面的应用上有所体现,所以提高红景天植物中红景天苷的产量已成为当今世界研究的热点问题。本实验室从红景天中克隆获得了葡萄糖基转移酶基因UGTR,为提高其在红景天发根中的表达量,进而提高红景天发根中红景天苷的含量,本研究将该基因在烟草根特异性启动子控制下,通过转基因技术,使其在转入的红景天发根中得到过量表达。本研究利用PCR技术从烟草中克隆获得了738bp根特异性启动子TobRB7,以双元表达载体pCAMBIA1301为基础,用烟草根特异性启动子TobRB7和葡萄糖基转移酶基因UGTR分别取代双元表达载体中的CaMV 35S启动子和GUS基因,从而获得了烟草根特异性启动子驱动葡萄糖基转移酶基因的表达载体,命名为pCA-Tob7::UGTR。建立红景天发根体系,通过根癌农杆菌介导法转化红景天发根,对再生发根进行PCR、PCR-Southern检测,证明构建的表达载体已成功整合到红景天发根基因组中,而后对转基因发根中红景天苷含量进行了HPLC检测。结果表明,成功构建了特异性表达载体以及建立了红景天发根体系,并已将表达载体整合到了红景天发根基因组中,在转基因发根中,红景天苷的含量比照野生型红景天中的红景天苷含量提高了2.24倍。特异性表达载体的成功构建以及红景天发根体系的成功建立,既为进一步研究特异性启动子对红景天苷合成的调控作用奠定了理论基础,同时又为利用红景天发根作为生物反应器来大量生产人类所需要的、目前较为稀有的红景天苷奠定了实验基础。(本文来源于《吉林农业大学》期刊2011-06-01）
侯萌萌,岳彩鹏,乔瑞丽[4]（2010）在《发根农杆菌对不同烟草品种发状根诱导和培养的影响》一文中研究指出为了探讨烟草的发状根培养技术,建立高效的发状根培养系统,为次生代谢物的开发和利用提供新的途径,试验以K326、NC89、鄂烟1号烟草无菌苗为材料,对发根农杆菌C58C1 Ri质粒转化烟草产生发状根进行了研究。结果表明,3个烟草品种中K326转化效率最高,不同部位中子叶叶柄的转化效率最高,最佳的培养基为无激素的MS固体培养基(MS0)。通过根尖活体压片、PCR检测和GUS报告基因检测3种方法,证明发根农杆菌Ri质粒在转化根上得到表达。(本文来源于《贵州农业科学》期刊2010年11期）
王逸群,李田,李文明[5]（2007）在《转乙肝病毒表面抗原基因烟草发根的获得》一文中研究指出构建了乙肝病毒表面抗原基因(HBsAg)植物表达载体,通过冻融法将HBsAg基因转入到发根农杆菌LBA1314中,采用叶盘法将HBsAg基因导入到烟草中,获得了转基因烟草发根.对转基因烟草发根的GUS检测结果表明:转HBsAg基因烟草发根可以染成蓝色,而非转基因烟草的根没有染色反应.这说明gus基因在转HBsAg基因烟草发根获得了表达.(本文来源于《吉首大学学报(自然科学版)》期刊2007年03期）
卓文强[6]（2004）在《发根农杆菌对烟草的转化及发根培育和烟碱合成条件的优化》一文中研究指出本试验研究了发根农杆菌Ri质粒转化烟草的各种影响因素,确定了最佳的转化条件,建立了烟草发根培养系统;对发根与非转化根的形态结构、生长动态进行了研究,并在悬浮条件下,进行了不同理化因子对烟草发根生长和烟碱合成调控的研究。主要结果如下: 1.本研究通过发根农杆菌工程菌Ar1334(含有野生型pRi1855质粒和pIG121HM双元载体质粒,编码NPT Ⅱ基因和GUS基因)转化烟草沙姆逊,获得了具有卡那霉素抗性烟草发状根,该发状根具有典型的发状根特性(多根毛、多分支、在无激素培养基上快速生长),通过根尖压片分析,烟草发状根不具备典型的根冠;发状根向培养液中释放烟碱,释放量最多时占总烟碱量的96.3%;在无激素的培养基上获得了再生植株。 2.对烟草发状根诱导的影响因子(诸如发根农杆菌菌株、烟草品种、叶片程度、菌液浓度、稀释倍数、浸染时间、共培养时间等)进行了研究,确定出最佳的组合条件。 3.悬浮培养中发根的生长和物质合成受多种理化因子的影响(培养基、pH值、装液量、蔗糖浓度、添加物等)的影响,本实验中,以1/2 MS液体为培养基,蔗糖20-30g/L,pH值6.0,装液量为容器体积的2/5,可添加水解酪蛋白(2g/L)和吲哚乙酸(IAA)(1mg/L),在27℃,110rpm下暗培养,25天左右收获,可达最佳效果。 4.烟草发状根培养中,激素对发状根生长和烟碱合成有较大影响。赤霉素(GA3)可显着增加发状根的生长量,但抑制烟碱的生成:IAA在合适浓度(1mg/L)既能增加发状根的生长又能促进烟碱的合成;萘乙酸(NAA)对发状根生长量和烟碱的生成无明显促进作用。(本文来源于《中国农业大学》期刊2004-06-01）
张彦妮,曲敏,徐香玲,李新玲[7]（2003）在《发根农杆菌介导几丁质酶基因和β-1、3-葡聚糖酶基因转化烟草的研究》一文中研究指出用冻融法和叁亲交配法将具有几丁质酶基因、β-1,3-葡聚糖酶基因和卡那霉素抗性标记基因的质粒pBLGC导入具有Ri质粒的发根农杆菌中。用叶盘法转化烟草的叁个品种,经Kan抗性筛选获得126株再生植株,对119株再生植株分别以启动子CaMV35S、几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因的引物进行PCR检测,其中几丁质酶基因呈阳性的植株有72株,β-1,3-葡聚糖酶基因呈阳性的有47株,具有几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因的植株有36株。对转化的24株转基因经PCR-Southern杂交,结果均呈阳性。实验结果表明,外源基因的转化频率与植物品种、外源基因片段的大小有关,几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因分别或共同整合到植物基因组中。(本文来源于《植物研究》期刊2003年02期）
王逸群,赵仁贵,王玉兰,孙珊珊[8]（2001）在《利用标记基因lacZ研究根瘤菌对烟草发根的侵染》一文中研究指出用发根农杆菌菌株LBA1314采用叶盘法对烟草进行转化 ,诱导烟草发根。将标记基因nifHDK_lacZ、nifH_lacZ、hemA_lacZ通过叁亲交配法导入根瘤菌 ,然后接种烟草发根。β_半乳糖苷酶组织化学染色和徒手切片观察表明 ,野生型根瘤菌可以感染烟草发根 ,回接试验证明侵染烟草发根的细菌是根瘤菌(本文来源于《吉林农业科学》期刊2001年06期）
王逸群[9]（2001）在《Ri质粒转化烟草的影响因素及豌豆凝集素基因在烟草发根中的表达》一文中研究指出对Ri质粒转化烟草的影响因素进行研究 ,以期获得较为理想的实验系统 .用发根农杆菌介导 ,将豌豆凝集素基因导入烟草 ,获得转基因的烟草发根 .GUS组织化学染色、蛋白免疫原位杂交证明 ,gus报告基因和豌豆凝集素基因已在转基因烟草发根中得到了转译表达 .本结果将为根瘤菌能否扩大宿主范围 ,为研究烟草与豌豆根瘤菌相互作用、结瘤固氮的可能性奠定基础 .图 6参 10(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2001年05期）
陆学斌[10]（1988）在《“发根液”对烟草拔苗移栽的效果》一文中研究指出目前烟草育苗移栽都提倡挖大垛、带足土,这对烟苗栽后早发生长有着良好的促进作用,但是取苗功效低、运苗劳动强度大,为此笔者于1985～1986年在室内用多种激素等促进根系生长物质配制成的12种“发根液”中,筛取了C_2、D_1两“发根液”,于1986年春对烟苗进行了拔苗移栽效果试验,取得了较好的效果,现将试验情况介绍如下。(本文来源于《耕作与栽培》期刊1988年05期）
烟草发根论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
采用3×3双因子设计,研究发根农杆菌菌株和烟草品种对烟草毛状根诱导率的影响。结果表明:各菌株在不同烟草品种上均诱导出毛状根,经PCR技术检测,确定了发根农杆菌Ri质粒的rolB基因已整合到烟草基因组中。不同烟草品种和发根农杆菌菌株均显着影响毛状根的诱导率;Sumxun毛状根平均诱导率最高,达到了53.4%,其适宜菌株为A4和ATCC15834;K326为34.2%,其适宜菌株为R1000;云烟85为25.6%,其适宜菌株为ATCC15834。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
烟草发根论文参考文献
[1].高渊.基于蛋白拆分的Cre/loxp系统构建及其在烟草发根中删除活性的初步验证[D].西南大学.2013
[2].黄丽萍,唐瑶,江龙.发根农杆菌菌株和烟草品种对毛状根诱导率的影响[J].山地农业生物学报.2012
[3].刘蓓蓓.烟草根特异性启动子植物表达载体的构建及其对红景天发根的遗传转化[D].吉林农业大学.2011
[4].侯萌萌,岳彩鹏,乔瑞丽.发根农杆菌对不同烟草品种发状根诱导和培养的影响[J].贵州农业科学.2010
[5].王逸群,李田,李文明.转乙肝病毒表面抗原基因烟草发根的获得[J].吉首大学学报(自然科学版).2007
[6].卓文强.发根农杆菌对烟草的转化及发根培育和烟碱合成条件的优化[D].中国农业大学.2004
[7].张彦妮,曲敏,徐香玲,李新玲.发根农杆菌介导几丁质酶基因和β-1、3-葡聚糖酶基因转化烟草的研究[J].植物研究.2003
[8].王逸群,赵仁贵,王玉兰,孙珊珊.利用标记基因lacZ研究根瘤菌对烟草发根的侵染[J].吉林农业科学.2001
[9].王逸群.Ri质粒转化烟草的影响因素及豌豆凝集素基因在烟草发根中的表达[J].应用与环境生物学报.2001
[10].陆学斌.“发根液”对烟草拔苗移栽的效果[J].耕作与栽培.1988
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