分子氢论文_卢宏涛

导读:本文包含了分子氢论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:分子,地幔,同位素,地球,损伤,内质网,蛇纹石。

分子氢论文文献综述

卢宏涛^[1]（2019）在《分子氢通过PTEN改善腹膜透析相关腹膜纤维化的作用及机制研究》一文中研究指出研究背景腹膜透析是终末期肾脏病的主要替代治疗方式之一,全球大约有11%的终末期肾脏病患者需要接受腹膜透析治疗。但是长期腹膜透析治疗会导致腹膜纤维化。炎症是腹膜纤维化最关键的病理生理过程,巨噬细胞参与透析后腹膜炎症反应。目前防治腹膜纤维化主要有两大策略:一是腹腔内给药抑制纤维化进展,二是换用理化性质温和的非葡萄糖腹膜透析液。从临床转化角度看,第一种策略会增加潜在腹腔感染风险且全身作用不明确;第二种策略即便换为非葡萄糖透析液长期应用仍可能出现腹膜纤维化。因此为开发安全高效的新型腹膜透析液,寻找安全、无毒的抗纤维化物质是预防腹膜纤维化的难点。氢气是无色无味的小分子气体,可中和活性氧,发挥抗氧化抗炎症作用。据报道分子氢可以预防肾脏、肝脏、心脏和肺组织纤维化。然而分子氢对腹膜纤维化的保护机制仍未不明确,需要进一步研究。PTEN是作用于多肽和磷酸肌醇底物的磷酸酶,主要功能是催化PIP3去磷酸化,抑制PI3K/AKT/mTOR途径来控制多种细胞过程。本研究旨在探讨分子氢是否具有治疗腹膜纤维化的潜力及是否能够通过PTEN发挥其抗纤维化作用。研究目的一、明确分子氢对于改善腹膜透析相关腹膜纤维化的作用。二、探索分子氢发挥抗纤维作用的可能分子机制,为分子氢的生物学作用提供理论依据。研究方法一、动物模型与分组27只体重在22-26g之间的C57BL/6雄性小鼠被随机平均分成3组,分别是生理盐水组(Saline)、高糖腹膜透析液组(HG)和富氢高糖腹膜透析液治疗组(HGH;氢浓度为1.0-1.5mg/L)。生理盐水组小鼠腹腔注射2ml生理盐水,一天一次,连续注射28天。高糖腹膜透析液组小鼠腹腔注射4.25%高糖腹膜透析液2ml,一天一次,连续注射28天。富氢高糖腹膜透析液治疗组小鼠腹腔注射富氢高糖腹膜透析液2ml,一天一次,连续注射28天。二、组织病理染色小鼠腹膜组织取材固定后,进行石蜡包埋,切片。按照HE、Masson、免疫组织化学和组织免疫荧光的实验步骤进行染色。使用白光或荧光显微镜进行拍照。叁、腹膜功能检测造模28天后,各组小鼠腹腔注射2ml生理盐水,两小时后麻醉小鼠,并打开腹腔用干燥棉球吸取未被腹膜吸收的生理盐水来间接评估小鼠腹膜功能(计算公式:吸收率=(总注射生理盐水质量-干湿棉球质量差)/总注射生理盐水质量*100%)。四、细胞培养与干预细胞采用M199培养基,10%FBS,1%双抗,37℃,5%CO2的条件进行培养。使用浓度梯度的葡萄糖(0mM、25 mM、50 mM、100 mM、150 mM、200 mM)处理MET5A细胞24h;使用含氢细胞培养箱培养MET5A细胞(培养基氢浓度0.6-0.8mg/L);细胞干预分甘露醇对照组(Mannitol)、高糖刺激组(HG)、高糖刺激加氢组(HGH)和甘露醇加氢组(MH)。五、细胞内ROS检测按照1:1000用无血清培养液稀释DCFH-DA,使终浓度为10微摩尔/升。加入到处理好的细胞当中,37℃孵育20min。使用流式细胞仪和荧光成像技术检测细胞DCF荧光强度。六、细胞线粒体膜电位检测按照试剂盒要求对待检测细胞进行JC-1染色,细胞培养箱中37℃孵育20min。利用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位。七、细胞免疫荧光使用腔室载玻片培养细胞,细胞刺激干预之后,用多聚甲醛固定2h。用0.5%TritonX-100室温打孔20min,用含5%山羊血清的PBS封闭1h。一抗4℃孵育过夜。加入荧光标记的二抗(1:500),37℃避光孵育1h。用DAPI避光孵育5min染细胞核。滴加防荧光淬灭剂之后进行封片,通过荧光显微镜观察结果并拍照。八、细胞转染(miRNA mimic)以6孔板为例进行细胞转染操作。A管125μl Opti-MEM无血清培养基中加入5ul20μM浓度的RNA mimic。B管125μl Opti-MEM无血清培养基中加入3.75μl lipo3000试剂,混匀室温放置12 min。然后将试剂加入到6孔板当中,放入细胞培养箱继续培养。九、过表达细胞株构建利用外源性接入目的基因的方式进行过表达质粒的构建。对质粒进行转化扩增与抽提之后,用慢病毒包被质粒形成过表达病毒。用过表达PTEN的慢病毒感染细胞后,使用嘌呤毒素进行细胞株抗药性筛选,RNA或蛋白进行验证后得到稳转细胞株。十、组织与细胞蛋白检测使用总蛋白提取试剂提取组织和细胞蛋白(按照1:100将PMSF、蛋白酶抑制剂和磷酸化酶抑制加入到蛋白裂解液中)。通过BCA法测的蛋白浓度,加入蛋白上样缓冲液煮沸负20℃冰箱保存。通过western blot蛋白免疫印迹法进行组织和细胞蛋白表达水平检测。十一、组织与细胞RNA检测使用Trizol法提取组织或细胞总RNA,通过酶标仪检测RNA浓度。使用mRNA反转录试剂或者miRNA茎环法反转录试剂得到样本的cDNA,利用SYBR Green染料法对样本进行实时荧光定量PCR的检测。十二、生物信息学预测使用NCBI GEO DataSets中的数据验证PTEN表达水平,使用miRTargetLink Human网站预测PTEN相关miRNA。十叁、统计学方法实验数据采用(均数±标准误)表示,应用GraphaPad 7.0软件进行统计图表绘制与统计数据分析。实验涉及到两组样本比较的,采用两独立样本t检验,实验涉及多组比较的,采用单因素方差分析(one-way ANOVA)。p<0.05表示组间有统计学差异。结果一、分子氢改善高糖对间皮细胞活力及氧化应激的影响(一)细胞活力检测实验CCK8结果提示分子氢可以改善高糖导致的MET-5A细胞活力的下降。(二)MET-5A细胞内ROS水平随葡萄糖浓度的升高而升高并引起线粒体膜电位的下降,分子氢能够抑制葡萄糖诱导产生的ROS,并且通过上调线粒体膜电位改善线粒体功能。二、分子氢抑制高糖诱导腹膜间皮细胞EMT与纤维化(一)通过定量PCR和细胞免疫荧光实验发现分子氢在mRNA和蛋白水平能够抑制高糖诱导MET-5A间皮细胞EMT,表现为抑制上皮指标E-cadherin的丢失和间质指标Vimentin的增加。(二)通过组织蛋白印迹和免疫荧光实验提示高糖腹膜透析液能够引起小鼠腹膜间皮细胞发生EMT改变(E-cadherin下降,Vimentin升高),而分子氢治疗能够上调E-cadherin、下调Vimentin的表达抑制小鼠腹膜EMT改变。(叁)细胞免疫荧光和蛋白免疫印迹实验结果显示分子氢能够在体外抑制MET-5A细胞在高糖刺激后纤维化指标FN表达增加的现象。(四)小鼠腹膜组织病理结果提示高糖腹膜透析液处理后的小鼠腹膜厚度明显增加,且纤维化相关指标FN、α-SMA和MMP1显着高表达,分子氢治疗组小鼠腹膜厚度及FN、α-SMA和MMP1的表达显着减少。同时小鼠腹膜功能实验显示分子氢能够改善高糖诱导的小鼠腹膜功能的下降。叁、PTEN介导腹膜纤维化且与高糖诱导ROS产生有关(一)通过NCBI GEO数据库检索发现GSE62928编号数据样本为腹膜透析患者腹膜组织,数据提示PTEN在发生包裹性硬化的腹膜组织中低表达。同时利用蛋白免疫印迹的方法检测腹膜超滤衰竭患者和对照患者腹膜组织中PTEN的表达水平,发现超滤衰竭患者腹膜组织中的PTEN表达低于对照患者。(二)通过蛋白免疫印迹实验发现PTEN表达随葡萄糖浓度的升高而下降具有剂量依赖性,同时ROS诱导剂过氧化氢诱导PTEN下降也有剂量效应关系。为明确ROS在高糖诱导PTEN下调中的作用,使用NAC清除高糖刺激后产生的ROS,发现清除ROS后PTEN表达上调。四、高糖通过PTEN激活PI3K/AKT/mTOR通路诱导纤维化发生且分子氢可以抑制这一过程(一)高糖刺激MET-5A细胞后,PI3K/AKT/mTOR通路激活,Vimentin表达升高。PTEN是该通路上游的调控因子,通过过表达PTEN能够有效抑制高糖诱导mTOR活化,进而抑制了Vimentin表达。(二)蛋白免疫印迹实验显示分子氢干预后,被高糖激活的PI3K/AKT/mTOR通路能够被分子氢所抑制,进而抑制了下游活化的Smad蛋白。五、miR-718介导分子氢上调PTEN抑制高糖诱导的腹膜纤维化(一)通过miRTargetLink Human网站寻找到123个与PTEN相关联的miRNA,其中有51个强关联。选择强相关miRNA进行下一步验证发现miR-718在细胞、小鼠腹膜纤维化模型和人纤维化腹膜组织中高表达,同时细胞和动物模型中发现分子氢能够回调高糖引起的miR-718的上调。(二)高糖环境培养的MET-5A细胞转染miR-718 mimic后,PTEN表达水平进一步下调,PI3K/AKT/mTOR通路进一步被激活,纤粘蛋白FN表达增加。同时分子氢在细胞转染miR-718 mimic后同样抑制了PI3K/AKT/mTOR激活与FN的表达。结论一、分子氢能够有效缓解腹膜透析相关腹膜纤维化,改善腹膜功能。二、分子氢的抗纤维化作用可能是通过清除ROS抑制miR-718上调PTEN抑制PI3K/AKT/mTOR途径实现的。(本文来源于《中国人民解放军海军军医大学》期刊2019-05-21）

郭佳铭,和生辉,熊泽森,刘哲,赵海男^[2]（2018）在《分子氢对雄性小鼠生殖系统高水平小剂量电离辐射损伤的防护作用》一文中研究指出目的探讨分子氢对雄性小鼠生殖系统高水平小剂量电离辐射损伤的防护作用及机制。方法将小鼠精原细胞系GC-1 spg细胞分为对照组、加氢组、4 Gy照射组、4 Gy照射加氢组,在各组细胞处理后24 h时采用流式细胞术检测细胞凋亡率。将72只雄性BALB/c小鼠分为对照组、加氢组、0.25 Gy照射组、0.25 Gy照射加氢组、0.5 Gy照射组、0.5 Gy照射加氢组,每组12只。小鼠加氢处理采用饮用富氢水联合呼吸高浓度氢气法。各组小鼠经相应处理后24 h分离睾丸组织进行H-E染色,并于内眦静脉取血,采用ELISA试剂盒检测促性腺激素释放激素(GnRH)、血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮含量。照射后4周分离小鼠双侧附睾制备精子悬液,以精子彗星电泳实验检测精子DNA损伤情况。结果 4 Gy照射加氢组GC-1 spg细胞的24 h凋亡率低于4 Gy照射组,差异有统计学意义(t=7.186,P<0.01)。加氢处理缓解了0.5 Gy照射导致的小鼠睾丸组织损伤,纠正了0.25 Gy、0.5 Gy照射诱发的FSH水平升高(t0.25 Gy=3.195 8,P0.25 Gy=0.019;t0.5 Gy=10.723 4,P0.5 Gy<0.05),并减轻了0.25 Gy、0.5 Gy照射后4周小鼠精子DNA彗星拖尾程度和DNA损伤情况(尾部面积:t0.25 Gy=16.592 3,t0.5 Gy=15.891 5;尾部DNA含量:t0.25 Gy=11.296 5,t0.5 Gy=13.785 0;尾部DNA百分含量:t0.25 Gy=26.834 0,t0.5 Gy=10.325 7;尾长:t0.25 Gy=16.865 4,t0.5 Gy=15.441 2;尾矩:t0.25 Gy=26.979 4,t0.5 Gy=13.174 2;Olive尾矩:t0.25 Gy=24.752 4,t0.5 Gy=6.896 1;P均<0.05)。结论分子氢通过降低精原细胞凋亡、调节激素紊乱、减轻精子DNA损伤等方式对雄性小鼠生殖系统高水平小剂量辐射损伤发挥防护作用。(本文来源于《第二军医大学学报》期刊2018年11期）

李伟^[3]（2017）在《内质网应激-CHOP-CaMKⅡ通路介导分子氢心肌保护作用的实验研究》一文中研究指出一、研究背景心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,IR)使心肌细胞凋亡增加,导致再灌注后心功能不全,是制约心血管手术临床疗效的重要因素。如何有效地降低IR后心肌细胞凋亡,减少心肌损伤,保护心功能,一直都是心血管领域基础和临床研究的热点。近来研究发现,心肌IR时会引起严重的氧化应激,产生大量活性氧簇(reactive oxygen species,ROS),触发内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),诱发氧化型钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(ox-Ca~(2+)/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,ox-CaMKⅡ)激活,导致心肌细胞凋亡。心肌IR发生时,CaMKⅡ能够介导细胞内Ca~(2+)超载而加重心肌IR损伤。晚近有学者发现新型气体分子氢(Hydrogen,H_2)可以在IR中选择性抗氧化而发挥保护作用。我们推测,H_2可能通过减少心肌IR后ROS的产生,调节ERS,降低CaMKⅡ的活化,减少细胞Ca~(2+)([Ca~(2+)]i),维持细胞内钙稳态,从而抑制心肌细胞凋亡,发挥保护心功能的作用。二、研究目的1、明确分子氢在心肌IR损伤中的心肌保护作用;2、阐明分子氢在心肌IR中保护心肌的分子机制。叁、研究方法(一)H_2调节ERS影响细胞凋亡的实验研究乳鼠心肌细胞先经低氧(1%氧气+5%二氧化碳+94%氮气)培养30min,然后正常(5%二氧化碳+95%空气)培养120min,以建立细胞缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,HR)模型。实验用细胞随机分为3组:Con组、HR组和H_2组(先使用0.6m M富氢DMEM培养基培养30min,再进行HR)。采用CCK-8测定心肌细胞活力,二硝基苯肼比色法测定培养液上清中LDH含量,ELISA法测定培养液上清中cTnI含量,流式细胞仪测定细胞凋亡率,以及Western blot检测CHOP、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。(二)H_2调节ERS-CaMKⅡ-Ca~(2+)超载影响细胞凋亡机制研究1、CHOP介导H_2影响CaMKⅡ氧化激活的研究构建大鼠CHOP基因过表达慢病毒载体(Lv-CHOP)和CHOP基因短发卡RNA(sh RNA)慢病毒载体(Lv-sh RNA),分别转染乳鼠离体心肌细胞以上调或下调CHOP的表达水平。采用与第1部分相同方法构建离体细胞HR模型。实验用细胞随机分为7组:Con组、HR组、H_2组、HR+Lv-CHOP组(采用Lv-CHOP转染的细胞,处理同HR组)、HR+Lv-CHOP+H_2组(采用Lv-CHOP转染的细胞,处理同H_2组)、HR+Lv-sh RNA组(采用Lv-sh RNA转染的细胞,处理同HR组)和HR+Lv-sh RNA+H_2组(采用Lv-sh RNA转染的细胞,处理同H_2组)。采用Western blot检测ox-CaMKⅡ和CaMKⅡ蛋白的表达水平。2、CaMKⅡ介导H_2影响细胞内Ca~(2+)超载的研究同第1部分方法建立离体心肌细胞HR模型,使用KN-93特异性阻滞CaMKⅡ激活。实验用细胞随机分成5组:Con组、HR组、H_2组、HR+KN-93组(细胞先在含2μM KN-93的DMEM培养基中培养30min,后处理同HR组)和HR+H_2+KN-93组(细胞先在含2μM KN-93的富氢DMEM培养基中培养30min,后处理同HR组)。采用流式细胞仪检测细胞内Ca~(2+)([Ca~(2+)]i)和细胞凋亡率,以及Western blot检测Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。(叁)H_2调节ERS影响细胞凋亡的在体验证研究通过结扎冠状动脉左前降支缺血30min,随后再通恢复灌注120min建立大鼠心肌IR模型。30只SD大鼠随机分为3组:Sham组(只进行开胸手术)、IR组和H_2组(再灌注前5min给予腹腔注射10m L/kg富氢生理盐水)。再灌注后120min测定大鼠的左心室收缩压(LVSP)和左心室等容收缩期压力最大变化速率(+dp/dtmax),Evans-Blue/TCC双染色测定心肌梗死面积。采用免疫组织化学法测定心肌中8-OHd G和3-NT的阳性表达指数,二硝基苯肼比色法测定血清中LDH含量,ELISA测定血清中c Tn I含量,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,以及Western blot检测CHOP、ox-CaMKⅡ、CaMKⅡ、Bcl-2、Bax蛋白表达水平。四、研究结果(一)H_2调节ERS影响细胞凋亡的实验研究1、H_2改善心肌细胞HR后细胞活力各组心肌细胞的细胞活力分别为:Con 98.8±1.0%,HR 32.6±5.2%,H_2 59.3±3.9%,其中H_2组显着高于HR组(P<0.001),提示H_2可改善心肌细胞HR后细胞活力。2、H_2减少心肌细胞HR后损伤各组心肌细胞培养液上清中LDH含量分别为:Con 12.2±1.7 U/L,HR 24.7±3.1U/L,H_2 19.3±2.9 U/L,其中H_2组显着低于HR组(P=0.047);各组培养液上清中c Tn I含量分别为:Con 68.2±8.8 ng/L,HR 127.8±16.6 ng/L,H_2 95.7±7.6 ng/L,其中H_2组显着低于HR组(P=0.015),提示H_2可减少心肌细胞HR后损伤。3、H_2减少心肌细胞HR后细胞凋亡与Con组相比,HR组Bcl-2/Bax比值显着降低(P<0.001),而H_2组Bcl-2/Bax比值显着高于HR组(P<0.001),提示H_2在心肌细胞HR后可通过升高Bcl-2/Bax比值而减少细胞凋亡。各组心肌细胞凋亡率分别为:Con 7.7±1.6%,HR 87.7±9.0%,H_2 68.9±9.6%,其中H_2组显着低于HR组(P=0.024),提示H_2可减少心肌细胞HR后细胞凋亡率。4、H_2影响心肌细胞HR后ERS,降低CHOP表达与Con组相比,HR组ERS相关蛋白CHOP表达显着升高(P<0.001),而H_2组CHOP表达显着高于HR组(P<0.001),提示H_2影响心肌细胞HR后ERS,降低CHOP表达水平。(二)H_2调节ERS-CaMKⅡ-Ca~(2+)超载影响细胞凋亡机制研究1、CHOP介导H_2对心肌细胞CaMKⅡ氧化激活水平的影响与Con组相比,HR组ox-CaMKⅡ/CaMKⅡ比值显着升高(P<0.001),而H_2组ox-CaMKⅡ/CaMKⅡ比值显着低于HR组(P<0.001),提示H_2可降低细胞HR后CaMKⅡ氧化激活(即ox-CaMKⅡ)水平。当上调CHOP表达(即HR+Lv-CHOP组),与HR组相比,ox-CaMKⅡ/CaMKⅡ比值显着升高(P=0.002),在此基础上再给予氢(即HR+Lv-CHOP+H_2组),与HR+Lv-CHOP组相比,ox-CaMKⅡ/CaMKⅡ比值降低(P<0.001),但与HR组之间无统计学差异(P=0.163);当下调CHOP表达(即HR+Lv-sh RNA组),与HR组相比,ox-CaMKⅡ/CaMKⅡ比值显着降低(P<0.001),在此基础上再给予氢(即HR+Lv-sh RNA+H_2组),与HR+Lv-sh RNA组相比,oxCaMKⅡ/CaMKⅡ比值显着降低(P<0.001),且与H_2组无统计学差异(P=0.940),提示CHOP介导H_2对CaMKⅡ氧化激活水平的影响。2、CaMKⅡ介导H_2对心肌细胞[Ca~(2+)]i水平的影响与Con组相比,HR组[Ca~(2+)]i水平显着升高(P<0.001),而H_2组[Ca~(2+)]i水平显着低于HR组(P<0.001),提示H_2可降低细胞HR后[Ca~(2+)]i水平。当KN-93抑制CaMKⅡ激活(即HR+KN-93组),与HR组相比,[Ca~(2+)]i水平显着降低(P<0.001),在此基础上再给予氢(即HR+KN-93+H_2组),与HR+KN-93组相比,[Ca~(2+)]i水平显着降低(P=0.001),且与H_2组无统计学差异(P=0.143),提示CaMKⅡ介导H_2对[Ca~(2+)]i水平的影响。3、CaMKⅡ介导H_2对心肌细胞凋亡的影响与HR组相比,HR+KN-93组Bcl-2/Bax比值显着升高(P=0.004),而HR+KN-93+H_2组Bcl-2/Bax比值显着高于HR+KN-93组(P=0.030),且与H_2组无统计学差异(P=0.372),提示CaMKⅡ介导H_2对Bcl-2/Bax比值的影响。同样地,与HR组相比,HR+KN-93组细胞凋亡率显着降低(P<0.001),而HR+KN-93+H_2组细胞凋亡率显着低于HR+KN-93组(P<0.001),且与H_2组无统计学差异(P=0.272),提示CaMKⅡ介导H_2对细胞凋亡率的影响。(叁)H_2调节ERS影响细胞凋亡的在体验证研究1、H_2减少心肌IR后羟自由基(·OH)和过氧亚硝基阴离子(ONOO-)反映·OH水平的8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHd G)在各组心肌中的阳性表达指数分别为:Sham 4.3±0.8%,IR 89.1±0.8%,H_2 54.9±5.0%,其中H_2组显着低于IR组(P<0.001);反映ONOO-水平的3-硝基酪氨酸(3-NT)在各组中的阳性表达指数分别为:Sham 9.7±0.8%,IR 86.7±5.2%,H_2 63.4±7.4%,同样的,H_2组显着低于IR组(P<0.001),提示H_2减少心肌IR中·OH和ONOO-的含量。2、H_2影响心肌IR后ERS,降低CHOP表达与Sham组相比,IR组CHOP表达水平显着升高(P<0.001),而H_2组CHOP表达水平显着低于IR组(P=0.001),证实H_2可调控ERS,降低心肌IR后CHOP表达。3、H_2降低心肌IR后CaMKⅡ氧化激活水平与Sham组相比,IR组ox-CaMKⅡ/CaMKⅡ比值显着升高(P<0.001),而H_2组ox-CaMKⅡ/CaMKⅡ比值显着低于IR组(P<0.001),证实H_2可降低心肌IR后CaMKⅡ氧化激活水平。4、H_2减少心肌IR后细胞凋亡与Sham组相比,IR组Bcl-2/Bax比值显着降低(P<0.001),而H_2组Bcl-2/Bax比值显着高于IR组(P=0.003),证实H_2在心肌IR后可通过升高Bcl-2/Bax比值而减少细胞凋亡。各组大鼠心肌细胞凋亡指数分别为:Sham 4.6±1.1%,IR 42.7±5.7%,H_228.1±6.9%。其中H_2组显着低于IR组(P=0.001),证实H_2可减少心肌IR后细胞凋亡数。5、H_2降低心肌IR后损伤各组大鼠血清中LDH含量分别为:Sham 2195.4±167.6 U/L,IR 4159.7±243.1 U/L,H_2 3699.4±182.7 U/L,其中H_2组显着低于HR组(P=0.003);各组大鼠血清中c Tn I含量分别为:Sham 35.4±3.5 ng/L,IR 150.5±18.4 ng/L,H_2 121.6±13.8 ng/L,其中H_2组显着低于HR组(P=0.005),证实H_2可减少心肌IR后损伤。6、H_2减少心肌IR后梗死面积与IR组相比,H_2组心肌梗死区面积/危险区面积(INF/AAR)显着降低(22.4±2.9vs 48.4±3.5%,P<0.001),证实H_2可减少心肌IR后梗死面积。7、H_2改善心肌IR后心功能体现左心室心肌收缩能力的LVSP和+dp/dtmax在IR组均显着低于Sham组(92.4±6.3 vs 131.8±8.1 mm Hg,P<0.001;3601.2±339.6 vs 8563.4±514.6 mm Hg/s,P<0.001),而H_2组的LVSP和+dp/dtmax较IR组显着提高(120.0±9.7 vs 92.4±6.3mm Hg,P<0.001;5801.0±816.8 vs 3601.2±339.6 mm Hg/s,P<0.001),证实H_2可改善心肌IR后左心室心肌收缩能力,保护心功能。五、研究结论1、心肌IR能激活ERS,增加心肌细胞的凋亡;2、H_2可通过减轻心肌IR后ERS,下调CHOP表达,降低CaMKⅡ的氧化激活,减少细胞凋亡;3、H_2影响心肌细胞凋亡的具体机制与CaMKⅡ介导细胞内Ca~(2+)超载有关。(本文来源于《第二军医大学》期刊2017-03-01）

Yang,Xiaozhi,Keppler,Hans,Li,Yan,夏群科^[4]（2017）在《地球深部水的新形式:分子氢》一文中研究指出地球上水的起源以及地幔中水的存储,是长期以来的前沿领域和热门方向。学术界广为流行的学说是:早期地球生长过程中,水来自其他星体中氧化形式的H_2O或OH(+1价的氢);地幔主要由各种硅酸盐矿物组成,以OH等点缺陷形式赋存在矿物结构中的氢(结构水)构成了深部地球最重要的水储库。在长达四十多亿年的漫长地质演化过程中,这些水在地球内外不同层圈中不断发生交换和循环,影响整个地球的动力学过程乃至(本文来源于《矿物岩石地球化学通报》期刊2017年01期）

杨晓志^[5]（2016）在《分子氢:地幔矿物中一种新形式的水》一文中研究指出地幔主要是由橄榄石、辉石和石榴石等各种名义上无水矿物(即理想化学式中不含氢的矿物,NAMs)组成的。自上个世纪80年代以来,分子光谱学的研究发现,这些名义上无水矿物中普遍含有一定量以与氢有关的点缺陷形式存在的结构水(以OH为主),并可能构成了地幔中最重要的水储库(Bell and Rossman,1992)。过去的几十年间,地幔名义上无水矿物中的OH引起了众多学者广泛的研究兴趣(本文来源于《2016中国地球科学联合学术年会论文集（叁十四）——专题63：油气成藏机理、专题64：沉积物源分析：过去、现在和未来、专题65：矿物结构与矿物表面过程》期刊2016-10-15）

刘国丹,韩清,高翔春,王进,田苗^[6]（2016）在《分子氢对糖尿病视网膜小胶质细胞的保护作用及其机制研究》一文中研究指出目的:研究分子氢对糖尿病视网膜小胶质细胞的保护作用及其可能机制。方法:采用100 ng/m L的LPS诱导视网膜小胶质细胞,同时将两组细胞分别置于正常培养环境和含有饱和氢培养环境下培养36小时。RT-PCR检测小胶质细胞中miR-9、miR-21和miR-199的表达。Western Blot测定TLR4信号途径相关蛋白的表达。结果:miR-9、miR-21在分子氢作用后明显下调,而miR-199在分子氢作用后下调不明显。并且,小胶质细胞活化后TLR4途径相关信号蛋白的表达增加,在分子氢处理后Myd88和IKKβ蛋白的表达明显减少,而NF-κB蛋白的表达前后没有明显的变化。结论:分子氢对视网膜小胶质细胞的炎症损伤具有明显的保护作用,氢作为一种信号分子对Myd88介导的TLR4炎症信号通路的调节及通路中部分miRNA的调节作用可能是其抗炎作用的机制。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2016年26期）

王希彬,李中平,张铭杰,邢蓝田,曹春辉^[7]（2016）在《固相微萃取—气相色谱—同位素质谱法测定天然气中微量烃类单分子氢同位素组成》一文中研究指出将固相微萃取技术(SPME)与气相色谱—同位素质谱(GC—IRMS)联用,通过分析涂层类型、萃取温度、萃取时间对萃取效果及化合物同位素的影响,优化操作条件,实现了天然气中微量烃类化合物单分子氢同位素的分析。实验结果表明:(1)聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯/碳分子筛(PDMS/DVB/CAR)对天然气中微量烃类的萃取效果最好,灵敏度高;(2)通过单因素实验,得到优化的萃取条件:萃取温度为30℃,萃取时间为60min;(3)萃取过程对同位素的影响不大,所得氢同位素组成与样品真实值偏差小于等于5‰,样品氢同位素组成未发生明显的分馏。将优化后的参数应用于天然气同位素分析,所得化合物(C_1—C_9)单体氢同位素比值标准偏差小4‰,满足实验要求,证明SPME—GC—IRMS方法的准确高效。(本文来源于《天然气地球科学》期刊2016年06期）

薛乾^[8]（2016）在《分子氢对心肌缺血再灌注损伤保护的膜分子机制研究》一文中研究指出一、研究背景随着人民生活水平的日益提升和人口老龄化的逐年加重,冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生率呈逐年上升趋势,在治疗冠心病的诸多方法中,给予缺血后心肌的再血管化处理是目前最常用和最有效的治疗手段之一。然而在心肌再血管化的过程中,心肌缺血再灌注(Ischemia reperfusion, IR)损伤是每一个心脏血管临床医师都必须面对,且无法有效治疗的困境。因而如何有效减少心肌IR损伤具有重要的现实意义。目前有研究表明：大量生成的氧自由基(Oxygen free radical, OFR)、心肌细胞内钙超载、细胞膜成分改变及其流动性降低、细胞膜通透性的增加等在IR损伤的发生和发展进程中起着主导性的作用。自由基主要包括非脂性自由基和脂性自由基,是维持正常生命活动所必须的物质。前者主要指OFR,包括超氧阴离子和羟自由基等。自由基作为人体正常的代谢产物,在非病理情况下,体内自由基不停地产生与清除,对危害机体的物质具有一定的积极防御作用；自由基过量释放或过量清除均能够对人体造成影响和损害,过量产生的自由基,特别是OFR,具有极强的氧化反应能力,能通过氧化作用攻击生命大分子,能改变细胞膜的组分,促进“脂质叁联体”的形成,降低细胞膜的流动性,并可激活中性粒细胞,损伤线粒体,从而导致机体组织的结构和功能破坏。因此有文献报道,OFR是心肌IR损伤的直接原因之一,尤其对细胞膜的损伤作用较明显,这会导致细胞内钙超载,并形成恶性循环,最终导致细胞死亡。长久以来,尽管对IR损伤后在的氧化应激的预防及治疗方面的研究较多,但目前仍没有找到有效的抗氧化药物治疗心肌IR损伤。现有常见的氧自由基拮抗剂主要包括酶类清除剂和非酶类清除剂两大类,前者酶分子量大、稳定性不高、对理化因素较为敏感、透皮或透膜吸收困难；后者还原性强、选择性差,可能引起内源性氧化还原失衡。因此,寻找一种疗效明确、具有高选择性的自由基清除剂,已成为医学和生命科学等领域关注的重点。2007年有日本学者发现,氢能够通过特异性清除部分氧自由基发挥对IR损伤的保护作用,溶解在液体中的氢气可选择性中和IR过程中产生的羟自由基和过氧亚硝基阴离子。有部分学者新近研究发现,应用呼吸含氢的气体对肝脏、视网膜等器官的IR损伤也发挥着重要的保护作用。二、研究目的本研究应用大鼠在体心肌IR模型及离体心肌细胞缺氧复氧模型,通过明确分子氢对心肌细胞膜流动性的影响,对心肌细胞内钙稳态的影响,阐述分子氢心肌保护作用的可能膜分子机制,为氢治疗心肌IR损伤提供相关理论依据,同时为临床上治疗心肌IR损伤提供新思路。叁、研究方法在体实验研究：将雄性成年SD大鼠随机分为5组：假手术组(实施开胸手术,并针线穿过左前降支下缘,并不结扎,关胸前给予腹腔注射20ml/kg生理盐水),IR组(结扎左前降支造成心肌缺血,30min后放松线结,再灌注前给予腹腔注射20ml/kg生理盐水,再灌注2h),氢饱和盐水处理组(心肌再灌注之前5min,通过腹腔给予注射不同浓度(5,10,20ml/kg)饱和H2生理盐水预处理,其余同IR组)。采用膜片钳及激光扫描共聚焦检测不同组之间钙离子通道流量的变化,应用电子自旋共振测定心肌细胞膜的流动性。离体实验研究：离体培养的乳鼠心肌细胞采用缺氧复氧模型来模拟在体心肌的IR损伤。将心肌细胞分为3组：对照组：5%二氧化碳和95%空气,37℃培养2.5h；IR组：5%二氧化碳和95%氮气,37℃培养30min,复氧培养2h；氢处理组：在缺氧复氧之前给予富氢培养基,其余处理同R组。应用CCK8方法比较各组心肌细胞活力,测定心肌细胞损伤的代谢功能指标(LDH、CK、cTn)等。并应用Western-blot及流式细胞方法测定不同组别间Bcl-2的活性,并测定心肌细胞凋亡率。四、研究结果(一)相较于假手术组,H2组和IR组大鼠的细胞膜总磷脂含量、胆固醇含量、细胞膜的整体流动性及区域流动性明显低于假手术组(P<0.05),虽然H2组大鼠细胞膜各项指标仍低于假手术组,但相较于IR组,H2组的这些指标明显改善(P<0.05),尤以20ml/kg改善最为显着(P<0.05),证明氢盐水能够影响IR过程中心肌细胞膜的整体流动性及区域流动性。(二)IR组的L型钙通道电流密度及钙火花发生频率明显高于假手术组,而H2组的电流密度水平和钙火花发生率虽然也高,但比较IR组明显降低,尤以20ml/kg改善最为显着(P<0.05),这提示分子氢可以有效改善异常增多的钙内流和异常增多的钙火花；IR组的钙瞬变峰值明显低于假手术组,而H2组的钙瞬变峰值虽然也较低,但较IR组明显升高,尤以20ml/kg改善最为显着(P<0.05),提示分子氢可以有效改善异常降低的钙瞬变,改善心肌收缩功能。(叁)实验组心肌细胞活力显着低于氢处理组(P<0.05),而细胞损伤相关代谢指标显着高于氢处理组(P<0.05),提示氢盐水可以有效减少IR过程中对细胞功能的损害。(四)IR组心肌细胞的凋亡发生率显着高于H2组(P<0.05),凋亡抑制相关蛋白活性显着低于H2组(P<0.05),提示氢盐水可以有效减少心肌R过程中出现的凋亡现象,保护心功能。五、研究结论(一)一定浓度的H2可以影响心肌细胞膜脂的组分,并且影响心肌细胞膜脂的流动性。(二)一定浓度的H2可以影响跨膜蛋白L型钙通道的电流密度,并最终影响心肌细胞内的钙稳态。(叁)一定浓度的H2抑制心肌细胞的凋亡,对缺血再灌注心肌的保护作用可能与其影响细胞膜脂流动性及膜蛋白的功能有关。(本文来源于《第二军医大学》期刊2016-03-01）

陈印忠,宋国华,贾庆卫,吴云,秦树存^[9]（2016）在《新型抗氧化气体分子氢的临床应用研究及其可能的作用机制》一文中研究指出氢气是一种无色、无嗅、无味,且具有一定还原性的双原子气体,溶解度低,不能被机体大量吸收,所以,氢气在生物体内的作用一直未被人们重视。直到2007年Ohsawa等[1]证实,吸入2%的氢气能选择性清除羟自由基(OH)和过氧亚硝基阴离子(ONOO-),显着改善大鼠脑缺血再灌注损伤。从此启动了氢气分子生物学研究热潮。2008年Buchholz等[2]证实,氢气可以减轻大鼠肠移植过程的炎性反应,(本文来源于《中华老年心脑血管病杂志》期刊2016年01期）

王先彬,卓胜广,张明峰,迟洪兴,郑国东^[10]（2015）在《蛇绿岩中蛇纹石化作用,分子氢和前生命/生命有机质—寻觅过去生命证据》一文中研究指出生命起源/演化是重大而又最具争议的科学问题。寻找地球和地球外生命起源/演化痕迹是现代科学久远和必然的追求目标。面临的核心挑战是寻找和鉴别生命残存有机质。为此,需要评估生命环境的可居性,前生命支撑环境对有机体残骸,特别是大有机分子的保存性。在极为稀少的早期生命记录中寻求答案需要:1寻找可保存生物学信息的时间和空间场所;2研究可最大限度保存原始有机质的岩石类型及其矿物学组合;3鉴别复杂有机分子的非生物/或生物成因特征;4防止和鉴别人为和近代生物质的污染。地球最(本文来源于《中国矿物岩石地球化学学会第15届学术年会论文摘要集（2）》期刊2015-06-24）

分子氢论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

目的探讨分子氢对雄性小鼠生殖系统高水平小剂量电离辐射损伤的防护作用及机制。方法将小鼠精原细胞系GC-1 spg细胞分为对照组、加氢组、4 Gy照射组、4 Gy照射加氢组,在各组细胞处理后24 h时采用流式细胞术检测细胞凋亡率。将72只雄性BALB/c小鼠分为对照组、加氢组、0.25 Gy照射组、0.25 Gy照射加氢组、0.5 Gy照射组、0.5 Gy照射加氢组,每组12只。小鼠加氢处理采用饮用富氢水联合呼吸高浓度氢气法。各组小鼠经相应处理后24 h分离睾丸组织进行H-E染色,并于内眦静脉取血,采用ELISA试剂盒检测促性腺激素释放激素(GnRH)、血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮含量。照射后4周分离小鼠双侧附睾制备精子悬液,以精子彗星电泳实验检测精子DNA损伤情况。结果 4 Gy照射加氢组GC-1 spg细胞的24 h凋亡率低于4 Gy照射组,差异有统计学意义(t=7.186,P<0.01)。加氢处理缓解了0.5 Gy照射导致的小鼠睾丸组织损伤,纠正了0.25 Gy、0.5 Gy照射诱发的FSH水平升高(t0.25 Gy=3.195 8,P0.25 Gy=0.019;t0.5 Gy=10.723 4,P0.5 Gy<0.05),并减轻了0.25 Gy、0.5 Gy照射后4周小鼠精子DNA彗星拖尾程度和DNA损伤情况(尾部面积:t0.25 Gy=16.592 3,t0.5 Gy=15.891 5;尾部DNA含量:t0.25 Gy=11.296 5,t0.5 Gy=13.785 0;尾部DNA百分含量:t0.25 Gy=26.834 0,t0.5 Gy=10.325 7;尾长:t0.25 Gy=16.865 4,t0.5 Gy=15.441 2;尾矩:t0.25 Gy=26.979 4,t0.5 Gy=13.174 2;Olive尾矩:t0.25 Gy=24.752 4,t0.5 Gy=6.896 1;P均<0.05)。结论分子氢通过降低精原细胞凋亡、调节激素紊乱、减轻精子DNA损伤等方式对雄性小鼠生殖系统高水平小剂量辐射损伤发挥防护作用。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

分子氢论文参考文献

[1].卢宏涛.分子氢通过PTEN改善腹膜透析相关腹膜纤维化的作用及机制研究[D].中国人民解放军海军军医大学.2019

[2].郭佳铭,和生辉,熊泽森,刘哲,赵海男.分子氢对雄性小鼠生殖系统高水平小剂量电离辐射损伤的防护作用[J].第二军医大学学报.2018

[3].李伟.内质网应激-CHOP-CaMKⅡ通路介导分子氢心肌保护作用的实验研究[D].第二军医大学.2017

[4].Yang,Xiaozhi,Keppler,Hans,Li,Yan,夏群科.地球深部水的新形式:分子氢[J].矿物岩石地球化学通报.2017

[5].杨晓志.分子氢:地幔矿物中一种新形式的水[C].2016中国地球科学联合学术年会论文集（叁十四）——专题63：油气成藏机理、专题64：沉积物源分析：过去、现在和未来、专题65：矿物结构与矿物表面过程.2016

[6].刘国丹,韩清,高翔春,王进,田苗.分子氢对糖尿病视网膜小胶质细胞的保护作用及其机制研究[J].现代生物医学进展.2016

[7].王希彬,李中平,张铭杰,邢蓝田,曹春辉.固相微萃取—气相色谱—同位素质谱法测定天然气中微量烃类单分子氢同位素组成[J].天然气地球科学.2016

[8].薛乾.分子氢对心肌缺血再灌注损伤保护的膜分子机制研究[D].第二军医大学.2016

[9].陈印忠,宋国华,贾庆卫,吴云,秦树存.新型抗氧化气体分子氢的临床应用研究及其可能的作用机制[J].中华老年心脑血管病杂志.2016

[10].王先彬,卓胜广,张明峰,迟洪兴,郑国东.蛇绿岩中蛇纹石化作用,分子氢和前生命/生命有机质—寻觅过去生命证据[C].中国矿物岩石地球化学学会第15届学术年会论文摘要集（2）.2015

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