利用单细胞融合技术高效获得融合细胞的方法

论文摘要

试验以小鼠胚胎干细胞(mESC)作为细胞融合对象,用0.25%胰酶将mESC消化成单细胞,利用细胞凝集素构建一对一的单细胞对,在含有50%聚乙二醇的ES培养液中培养1 min,随后将细胞继续培养7 d,获得既表达红色荧光也表达绿色荧光的克隆即为融合成功。结果显示,单细胞融合法的克隆效率(46.25%)显著高于传统融合的效率(0.001 7%)。进一步检测融合细胞的生物学特性发现,虽然细胞形态与mESC具有很大的差异,但依然呈AP阳性,RNA水平上表达Oct4、Sox2和Nanog,具有向三胚层分化的能力等。结果表明,单细胞融合法是一种高效构建融合细胞的新途径。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郭佳,厉雪纯,方园,赵剑超,李妍,郭诗萌,刘忠华

关键词: 小鼠胚胎干细胞,单细胞融合法,细胞融合效率

来源: 中国兽医学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 东北农业大学生命科学学院

基金: 科技部重点研发计划资助项目(2016YFA0100200)

分类号: Q813

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.04.30

页码: 782-786+799

总页数: 6

文件大小: 1684K

下载量: 187

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