导读:本文包含了病毒转化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:丝素蛋白支架,骨髓间充质干细胞,骨形态发生蛋白,骨缺损
病毒转化论文文献综述
范少鹏,李晓辉,时彩霞,范春霞,叶发刚[1]（2019）在《慢病毒介导BMP-2过表达质粒转染骨髓间充质干细胞联合丝素蛋白支架向成骨细胞转化的实验研究》一文中研究指出目的:探究慢病毒介导BMP-2过表达质粒转染骨髓间充质干细胞联合丝素蛋白支架向成骨细胞转化的作用效果。方法:构建慢病毒BMP-2过表达载体,培养骨髓间充质干细胞,构建细胞核支架的联合培养体系,体外实验利用茜素红染色和碱性磷酸酶染色检测骨髓间充质干细胞的成骨转化。选择10只新西兰大白兔,体重3.2～4.5 kg,平均3.9 kg;年龄(2.89±0.45)岁;使用口腔钻在兔子胫骨钻孔(长度5 mm、宽度2 mm、深度3 mm的锥形胫骨缺损)构建兔子胫骨骨缺损模型,HE染色观察动物模型内骨缺损的修复。实验组造模后植入丝素蛋白支架+转染BMP-2过表达载体骨髓间充质干细胞复合物,阴性对照组造模后植入丝素蛋白支架+未转染骨髓间充质干细胞复合物。结果:实验组(丝素蛋白支架+转染BMP-2过表达载体骨髓间充质干细胞复合物)中支架表面黏附的细胞与对照组(丝素蛋白支架+未转染骨髓间充质干细胞)相比,细胞数明显增多。实验组细胞外基质分泌与对照组相比,支架间细胞外基质含量明显增多。对照组支架表面元素EDX分析显示钙离子含量为0.22%,实验组支架表面元素EDX分析显示钙离子含量为0.86%,可见实验组诱导钙离子形成的能力要比对照组强。钙结节茜素红染色结果显示,对照组肉眼观无明显变化,镜下观察可见少量钙结节点。实验组肉眼观可见明显红色区域染色,镜下观察可见大量钙结节点。碱性磷酸酶染色结果显示,对照组肉眼观无明显变化,镜下观察未见明显变化。实验组肉眼观可见紫色区域染色,镜下观察可见ALP染色呈强阳性。丝素蛋白支架与骨髓间充质干细胞联合培养体系可以对软骨缺损有较好的修复作用,转染BMP-2骨髓间充质干细胞后修复作用明显优于未转染组。HE染色结果显示,对照组炎性细胞减少,支架略有消失。实验组炎性细胞明显减少,支架消失,血管生成。结论:慢病毒介导BMP-2过表达质粒可以促进BMSC向骨细胞的分化作用,并且分泌更多的含Ca2+成分的细胞外基质,从而发挥其促进骨缺损修复的作用。(本文来源于《中国骨伤》期刊2019年09期）
龙欢,赵辉,王绪朋,贾瑞宗,贺萍萍[2]（2019）在《基于CRISPR基因编辑系统抗番木瓜曲叶病毒的植物转化载体的构建》一文中研究指出双生科病毒具有毁灭性强、寄主多样、分布地域广等特点,一直是困扰世界农作物生产的一大难题。用物理和化学方法防治该类病毒不仅花费成本高,见效低,而且还可能对环境造成负面影响,因此用分子手段培育抗病品种才是有效途径之一。本研究结合最新的CRISPR/Cas9基因编辑技术和GoldenGate克隆技术,设计并构建了抗番木瓜曲叶病毒基因编辑串联多切点表达载体。表达载体转入农杆菌AGL1后经注射本氏烟草叶片进行瞬时表达,48h后通过激光共聚焦显微镜能观察到有绿色荧光的出现,定位的位置为细胞核与细胞质膜。本研究为番木瓜抗曲叶病毒研究提供理论基础。(本文来源于《热带作物学报》期刊2019年10期）
王宜平,张佩琪,李真诚,岑美珍,纪春晓[3]（2019）在《MDV一种疱疹病毒诱导宿主细胞转化的模型》一文中研究指出马立克病病毒(Marek's disease virus,MDV )是引起鸡T淋巴细胞致瘤的α疱疹病毒,该病毒导致一种致瘤性和免疫抑制性禽病,称为马立克病(MD)。已发现的MDV有3种血清型,Ⅰ型为致瘤性的MDV强毒株,Ⅱ型为无致瘤性的MDV毒株,Ⅲ型为火鸡疱疹病毒(简称HVT)。HVT与MDV有明显区别,对鸡无致病性,广泛用于预防MD的活疫苗。近年来,MDV的致瘤基因在疫苗的防御机制下逐渐出现多态性变化和点突变变化~([1]),从而(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年08期）
刘峰,李春胜,李亚南[4]（2019）在《慢病毒介导shRNA LINGO-1质粒转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究》一文中研究指出目的:探究慢病毒介导shRNA LINGO-1质粒转染促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞转化的研究。方法:利用shRNA基因干扰技术,构建shRNA LINGO-1干扰载体,慢病毒转染BMSCs,根据病毒转染情况分成空白对照组(未转染慢病毒的BMSCs)、空载体病毒组(转染不含shRNA LINGO-1干扰载体慢病毒的BMSCs)、干扰载体病毒组(转染shRNA LINGO-1干扰载体慢病毒的BMSCs)。利用流式细胞仪检测BMSCs的表面蛋白,利用RT-PCR和Western-Blot检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、巢蛋白的表达。结果:CD44和CD29在第2代BMSCs的表达为60.2%和58.3%;CD34和CD45在第2代BMSCs的表达为3.4%和2.6%。慢病毒转染效率为90%以上。空白对照组、空载体病毒组和干扰载体病毒组的GFAP、NSE、NF和巢蛋白m RNA的相对表达量比较差异有统计学意义(P<0.05),其中空载体病毒组和空白对照组的比较差异无统计学意义(P>0.05),干扰载体病毒组和空载体病毒组的差异有统计学意义(P<0.05)。Western-blot检测蛋白表达量也具有同样的表达特点。结论:慢病毒介导shRNA LINGO-1干扰载体转染促进BMSCs可提高BMSCs向神经细胞转化的效率。(本文来源于《神经损伤与功能重建》期刊2019年07期）
夏茂,陈军浩[5]（2019）在《溶瘤麻疹病毒的临床研究与转化进展》一文中研究指出肿瘤已成为危及全人类生命的重大疾病,虽然常规治疗手段如手术及放疗/化疗等不断发展,但对某些复发、难治性恶性肿瘤仍然束手无策,亟需安全、有效可行的治疗手段。在肿瘤基因治疗领域,能在肿瘤细胞内大量自我复制并选择性杀伤肿瘤细胞的溶瘤病毒(Oncolytic virus)逐渐崭露头角,目前溶瘤病毒抗瘤治疗备受关注。其中溶瘤麻疹病毒疫苗株(MV-Edm)因其可靠的安全性和优良的溶瘤效果已进入几项临床试验,为推动其临床转化奠定了基础,期望为肿瘤患者带来治疗上的突破。本文就目前溶瘤麻疹病毒的临床研究与转化进展的相关研究成果进行综述。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2019年03期）
苗艳梅[6]（2019）在《赤爮花叶病毒外壳蛋白基因对马铃薯的转化及其抗病性初步分析》一文中研究指出植物病毒病作为阻碍植物生长发育的第二大疾病,严重影响我国农业经济增长与发展。近年来,随着基因工程技术的发展,植物病毒病的防治效果显着,其中由病毒外壳蛋白(coat protein简称CP)介导植物获得相应病毒抗性的方法相对成熟且效果较好,然而由于植物病毒种类繁多,不同病毒CP基因介导抗性范围和效果也各不相同。本实验选择2017年首次被发现并报道的的赤爮花叶病毒(Thladianrha dubia mosaic virus简称ThDMV)的CP作为研究对象,以期为植物病毒病抗病研究添加新成员,同时为进一步了解ThDMV CP功能打下基础。本研究以野生赤爮叶片为材料提取总RNA,根据已有的ThDMV病毒序列设计特异性引物利用RT-PCR技术经琼脂糖凝胶电泳检测得到大小约为800bp的ThDMV CP基因目的条带,将目的基因纯化回收测序正确,获得ThDMV CP分离物。根据获得的 ThDMV CP 序列信息与 pCAMBIA1301、pCAMBIA1300、pGreen-35s多克隆位点信息,设计引物对ThDMV CP添加酶切位点,利用及BamHI和HindⅢ双酶切连接,成功构建重组植物内表达载体pCAMBIA1301-CP、pCAMBIA1300-CP、pGreen-35sCP。在农杆菌LBA404介导下,将ThDMV CP导入马铃薯叶片,利用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization 简称 FISH)、全组织杂交技术对 ThDMV CP 基因在植物叶片内进行定位分析发现ThDMV CP在植物内分布分散。进一步,以侵染重组植物内表达载体pCAMBIA1301-CP的植物叶片做实验材料进行粗酶液的提取,检测植物防御性酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化物酶POD、过氧化氢酶CAT)在观察5天内活性变化情况。结果显示:在观察的5天内,SOD、POD和CAT都有不同程度的升高,初步判断ThDMV CP对马铃薯的抗性具有一定作用。进一步,利用摩擦接种的方式对侵染重组植物内表达载体pCAMBIA1301-CP的植物接种PVY病毒,利用实时荧光定量PCR检测技术(Quantitative Real-time PCR简称QPCR)检测ThDMV CP介导的马铃薯对PVY具有一定抗性。(本文来源于《东北林业大学》期刊2019-05-01）
高艳丽[7]（2019）在《Piezo基因敲除载体与抗ToMV病毒载体的构建及转化农杆菌》一文中研究指出植物中存在Piezo基因,而且与动物中该基因同源性较高,推测其编码蛋白的功能也应与压力有关,但是目前该基因在植物上的功能尚无任何报道。因此,本文利用TRIzol法提取番茄幼嫩果实的总RNA,PCR扩增番茄Piezo基因片段,利用在线工具寻找靶点,通过Overlapping PCR技术以pYLsgRNA-AtU3b-LacZ质粒为模板构建完整的sgRNA表达盒片段,采用“金门”克隆法将sgRNA表达盒克隆到PYLCRISPR/CAS9Pubi-N表达载体上,构建Piezo基因敲除载体,并成功转化农杆菌,旨在探讨Piezo基因在植物上的功能。番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus,ToMV)是一类世界性分布的植物病毒,西红柿是其主要寄主,侵染西红柿后使栽培面积大幅下降造成农业重大经济损失。最近研究发现CRISPR/Cas13a系统是一种能够靶向和切割基因组单链RNA(ssRNA)分子的2类VI-A型核糖核酸酶,可被开发利用到抗植物RNA病毒研究中。本研究根据西红柿密码子偏好性合成高GC含量的Cas13a,以PYLCRISPR/CAS9Pubi-N质粒为模板扩增Pubi启动子和NOS终止子并将叁者连接构建Cas13a表达体系片段;设计并合成靶向ToMV病毒的4个不同区域位点crRNA片段,以pYLsgRNA-AtU3b-LacZ质粒为模板扩增U3启动子及其终止子与crRNA片段连接构建crRNA表达片段,把Cas13a表达体系片段和crRNA表达片段与PYLCRISPR/CAS9Pubi-N骨架片段融合成一个质粒,并成功转化到农杆菌中,为Cas13a介导的西红柿抗病毒研究做基础。综上所述,本研究利用CRISPR/Cas9系统成功构建了Piezo基因敲除载体;利用CRISPR/Cas13a系统成功构建了西红柿抗ToMV病毒载体。这些结果为研究Piezo基因在植物中的功能以及减少西红柿ToMV病毒提供有价值的帮助。(本文来源于《河北经贸大学》期刊2019-03-01）
邓明,谢萍,马永刚,明江华,周炎[8]（2019）在《慢病毒介导NGF过表达转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究》一文中研究指出目的探究慢病毒介导神经生长因子(NGF)过表达转染促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞转化的作用。方法体外分离,培养人BMSCs,利用基因过表达技术,构建NGF过表达慢病毒载体转染BMSCs。根据转染情况分成3组,空白对照组(未转染慢病毒载体的BMSCs)、空白载体病毒组(转染不含NGF过表达慢病毒载体的BMSCs)和过表达载体病毒组(转染过表达NGF慢病毒载体的BMSCs)。利用流式细胞仪检测BMSCs的表面标记物,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot分别检测神经细胞表面蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE) mRNA及蛋白的表达。结果 (1) BMSCs的表面蛋白标记物CD44和CD29在第2代BMSCs的表达为60. 2%和58. 3%,CD34和CD45在第2代BMSCs的表达为3. 4%和2. 6%。(2)慢病毒转染效率为90%以上。转染效率较高。(3)空白对照组、空白载体病毒组和过表达载体病毒组的GFAP和NSE mRNA的相对表达量叁组比较有统计学差异(P <0. 05);其中空白载体病毒组和空白对照组的组间比较无统计学差异(P> 0. 05);过表达载体病毒组高于空白载体病毒组,组间比较有统计学差异(P <0. 05)。Western blot检测蛋白表达量也具有同样的表达特点。结论慢病毒介导NGF过表达转染促进BMSCs可以提高BMSCs向神经细胞转化的效率,可以为神经损伤和脊髓损伤提供种子细胞。(本文来源于《中国临床研究》期刊2019年02期）
周雪莹,马闻箫,周德敏[9]（2018）在《活病毒直接转化为预防、治疗双功能疫苗研究进展》一文中研究指出疫苗是目前预防病毒感染最有效的方法之一。以流感疫苗为例,目前临床使用的流感疫苗种类包括减毒、灭活、亚单位、载体疫苗等。本研究团队以流感病毒为模型,成功研发了预防和治疗双功能的"复制缺陷型活病毒疫苗"制备技术。该方法彻底突破了现有的疫苗研制手段,利用基因密码子拓展技术,通过将病毒基因组中的一个或多个叁联遗传密码子突变为终止密码子的方式,使病毒在宿主体内的正常繁殖复制的机制失效,同时又保留了病毒完整的结构和感染力,使其成为能够高效刺激机体产生免疫应答,甚至是具有治疗前景的抗病毒药物。(本文来源于《中国科学基金》期刊2018年05期）
李其香,曾建涛,牟海波[10]（2018）在《慢病毒介导的赖氨酰氧化酶基因对子宫内膜癌Ishikawa细胞上皮间质转化及转移潜能的影响》一文中研究指出目的探讨慢病毒介导的赖氨酰氧化酶(LOX)基因对子宫内膜癌Ishikawa细胞上皮间质转化及转移潜能的影响及其机制。方法采用RT-PCR和Western blot检测人正常子宫内膜KLE细胞和子宫内膜癌Ishikawa细胞中LOX mRNA和蛋白的表达。将Ishikawa细胞随机分为对照组(未转染)、NC组(转染阴性对照慢病毒LV-NC载体)和LOX干扰组(转染慢病毒干扰LV-shRNA-LOX载体)。采用RT-PCR检测细胞中LOX mRNA表达,Western blot检测LOX、E-钙粘附蛋白(E-cadherin)、N-钙粘附素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞的迁移能力。结果与KLE细胞相比,Ishikawa细胞中LOX mRNA和蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05)。与对照组相比,LOX干扰组细胞中LOX mRNA表达、LOX蛋白、N-cadherin蛋白、Vimentin蛋白、MMP-2蛋白和MMP-9蛋白表达均显着降低(P<0.05),细胞侵袭和迁移能力减弱(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);NC组和对照组间以上指标均无显着差异(P>0.05)。结论下调LOX表达可通过引起N-cadherin、Vimentin、MMP-2和MMP-9表达下降、E-cadherin表达升高,降低子宫内膜癌Ishikawa细胞上皮间质转化及转移潜能。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2018年17期）
病毒转化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
双生科病毒具有毁灭性强、寄主多样、分布地域广等特点,一直是困扰世界农作物生产的一大难题。用物理和化学方法防治该类病毒不仅花费成本高,见效低,而且还可能对环境造成负面影响,因此用分子手段培育抗病品种才是有效途径之一。本研究结合最新的CRISPR/Cas9基因编辑技术和GoldenGate克隆技术,设计并构建了抗番木瓜曲叶病毒基因编辑串联多切点表达载体。表达载体转入农杆菌AGL1后经注射本氏烟草叶片进行瞬时表达,48h后通过激光共聚焦显微镜能观察到有绿色荧光的出现,定位的位置为细胞核与细胞质膜。本研究为番木瓜抗曲叶病毒研究提供理论基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
病毒转化论文参考文献
[1].范少鹏,李晓辉,时彩霞,范春霞,叶发刚.慢病毒介导BMP-2过表达质粒转染骨髓间充质干细胞联合丝素蛋白支架向成骨细胞转化的实验研究[J].中国骨伤.2019
[2].龙欢,赵辉,王绪朋,贾瑞宗,贺萍萍.基于CRISPR基因编辑系统抗番木瓜曲叶病毒的植物转化载体的构建[J].热带作物学报.2019
[3].王宜平,张佩琪,李真诚,岑美珍,纪春晓.MDV一种疱疹病毒诱导宿主细胞转化的模型[J].中国兽医学报.2019
[4].刘峰,李春胜,李亚南.慢病毒介导shRNALINGO-1质粒转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究[J].神经损伤与功能重建.2019
[5].夏茂,陈军浩.溶瘤麻疹病毒的临床研究与转化进展[J].微生物学杂志.2019
[6].苗艳梅.赤爮花叶病毒外壳蛋白基因对马铃薯的转化及其抗病性初步分析[D].东北林业大学.2019
[7].高艳丽.Piezo基因敲除载体与抗ToMV病毒载体的构建及转化农杆菌[D].河北经贸大学.2019
[8].邓明,谢萍,马永刚,明江华,周炎.慢病毒介导NGF过表达转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究[J].中国临床研究.2019
[9].周雪莹,马闻箫,周德敏.活病毒直接转化为预防、治疗双功能疫苗研究进展[J].中国科学基金.2018
[10].李其香,曾建涛,牟海波.慢病毒介导的赖氨酰氧化酶基因对子宫内膜癌Ishikawa细胞上皮间质转化及转移潜能的影响[J].临床和实验医学杂志.2018