亚抑菌浓度抗生素对海水浴场来源肺炎克雷伯菌的接合及intI突变影响

论文摘要

目的探讨不同水环境介质及亚抑菌浓度抗生素对肺炎克雷伯菌的生长、耐药表型及抗性基因转移的影响。方法对海水浴场来源的肺炎克雷伯菌进行不同亚抑菌浓度的氧氟沙星、头孢他啶抗生素传代培养、运用DNAstar分析I类整合子（IntI）突变类型及突变位点,以耐药菌为供体菌,EC600为受体菌进行耐青霉素、氧氟沙星的质粒接合实验。结果经亚抑菌浓度抗生素研究发现2种抗生素亚抑菌浓度海水与生理盐水传代培养下的细菌生物量均有明显差异。但头孢他啶亚抑菌浓度下,海水介质比生理盐水介质的影响大。传代培养240 h后,细菌耐药能力增强。亚抑菌浓度抗生素作用下耐药菌的IntI突变类型主要集中于氨基酸的缺失与插入,突变位点集中在262～273。此外,4株耐青霉素耐药基因肺炎克雷伯菌成功接合,接合效率分别是2.6×10-6、4.2×10-6、6.0×10-6、3.6×10-6,1株氧氟沙星1/16mic亚抑菌浓度刺激下的肺炎克雷伯菌成功接合,接合效率是6.4×10-6。结论亚抑菌浓度抗生素对肺炎克雷伯菌传代培养存在差异,有诱导自发性突变的可能;证明了耐药基因可伴随接合型质粒转移。

论文目录

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验菌株

1.1.2 抗生素

1.1.3 培养基

1.1.4 基因检测试剂

1.2 仪器与试剂

1.3 方法

1.3.1 亚抑菌浓度细菌传代培养的细菌生物量检测

1.3.1.1 标准菌株液制备

1.3.1.2 亚抑菌浓度抗生素诱导培养

1.3.1.3 不同环境介质对细菌生长量及耐药的影响

1.3.2 intI的扩增及突变检测方法

1.3.3 耐药细菌接合实验方法

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 一般情况

2.2 传代培养总体结果

2.2.1 不同培养介质培养结果比较

2.2.2 不同亚抑菌培养浓度结果比较

2.2.3 亚抑菌培养下细菌的耐药变化

2.3 IntI基因突变检测结果

2.4 耐药基因的转移实验结果及验证

2.4.1 耐青霉素接合转移实验

2.4.2 氧氟沙星接合转移实验

3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 林彦伶,梁枫,胡高垚,韦孟咪,许士兰,龙文芳

关键词: 亚抑菌浓度抗生素,类整合子,突变,接合

来源: 中国卫生检验杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 环境科学与资源利用,预防医学与卫生学,临床医学

单位: 海南医学院公共卫生学院

基金: 国家自然科学基金(81460487),海南省研究生创新性项目(Hys2016-90),国家大学生创新项目(20161181-0056),海南省大学生创新项目(2017102)

分类号: R446.5;R126.4

页码: 389-392+399

总页数: 5

文件大小: 304K

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标签：亚抑菌浓度抗生素论文; 类整合子论文; 突变论文; 接合论文;

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