粘质沙雷氏菌S823次生代谢产物及其抗肿瘤活性研究

粘质沙雷氏菌S823次生代谢产物及其抗肿瘤活性研究

论文摘要

为从土壤中筛选得到能转化甾体化合物和产生具有抑制肿瘤生长的活性化合物菌株,并分离鉴定出活性化合物。利用胆固醇作唯一碳源筛选,通过形态观察、生理生化测试,以及16S rRNA基因序列同源性分析来确定筛选菌株。以Neuro-2a细胞(小鼠神经瘤细胞)作为供试细胞,通过活性跟踪,用柱层析法分离活性成分,经波谱方法鉴定产生的活性物质等方法。结果表明从土壤中筛选得到一株菌株具有抑制肿瘤生长的活性;此菌株与粘质沙雷氏菌属(Gen Bank No.序列号为KR817904. 1)相似性为99%,命名为粘质沙雷氏菌S823;活性化合物为灵菌红素,其对细胞周期分裂蛋白25B (CDC25B)的抑制率是67. 7±2. 9%,对含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)抑制率为56. 7±0. 4%,对Neuro-2a细胞有抑制作用,其IC50是0. 05μM。灵菌红素是具有抗肿瘤活性的化合物。

论文目录

  • 1 仪器和材料
  •   1.1 菌种来源
  •   1.2 培养基
  •   1.3 供试细胞
  •   1.4 试剂
  •   1.5 仪器
  • 2 实验方法
  •   2.1 菌种初筛
  •   2.2 复筛
  •   2.3 胆固醇转化产物的分离
  •   2.4 抑制肿瘤细胞活性检测
  •   2.5 抗肿瘤活性成分分离
  •   2.6 转化产物和抗菌活性成分的结构鉴定
  •   2.7 菌种鉴定
  •     2.7.1 形态及生理生化测定
  •     2.7.2 16S r DNA基因的克隆与测序
  •   2.8 提取物抑制细胞周期分裂蛋白25B和含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2 (SHP2) 活性测定
  • 3 结果与分析
  •   3.1 筛选结果
  •   3.2 菌株鉴定
  •     3.2.1 菌落形态特征
  •     3.2.2 生理生化实验
  •     3.2.3 16S r DNA鉴定
  •   3.3 转化产物分离
  •   3.4 抗肿瘤活性物质的分离
  •   2.5化合物鉴定
  •   3.6 灵菌红素抑制CDC25B和SHP2活性测定
  •   3.7 抑制肿瘤细胞IC50值测定
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 朱琳妍,庞翠萍,朱向东,陈鲤群

    关键词: 生物转化,抗肿瘤活性,粘质沙雷氏菌,羟基胆固醇,灵菌红素

    来源: 天然产物研究与开发 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 有机化工

    单位: 福州大学生物科学与工程学院,江南大学生物工程学院,江西农业大学生物科学与工程学院

    基金: 江西省教育厅科技计划(GJJ170286),国家自然科学基金(21366012)

    分类号: TQ460.1

    DOI: 10.16333/j.1001-6880.2019.2.002

    页码: 191-197

    总页数: 7

    文件大小: 888K

    下载量: 309

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